Bài viết Ảnh hưởng của kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên khả năng nhân chồi của ba giống dâu tây (Fragaria spp.) in vitro được nghiên cứu với mục tiêu xác định kỹ thuật xử lý mẫu cấy thích hợp cho sự nhân chồi của 3 giống dâu tây.
No 09/2020 Journal of Science, Tien Giang University Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên khả nhân chồi ba giống dâu tây (Fragaria spp.) in vitro Effects of explant treatment techniques on shoot multiplication of three strawberry straints (Fragaria spp.) in vitro Hà Thị Tuyết Phượng 1,* Trường Đại học Tiền Giang, 119 Ấp Bắc, Phường 5, Mỹ Tho, Tiền Giang, Việt Nam Thông tin chung Tóm tắt Ngày nhận bài: 28/02/2020 Ngày nhận kết phản biện: 06/05/2020 Ngày chấp nhận đăng: 10/05/2020 Nghiên cứu thực với mục tiêu xác định kỹ thuật xử lý mẫu cấy thích hợp cho nhân chồi giống dâu tây Thí nghiệm bố trí theo thể thức hồn tồn ngẫu nhiên, nhân tố gồm giống dâu tây (giống Mỹ Đá, giống Mỹ Hương, giống dâu Pháp) nhân tố kỹ thuật xử lý mẫu cấy (để nguyên chồi, cắt hết chồi, cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi) với lần lặp lại Môi trường nuôi cấy môi trường MS (Murashige and Skoog, 1962), bổ sung sucrose (30 g/l), benzyl adenine (0,3 mg/l) agar (8 g/l) Kết thí nghiệm cho thấy kỹ thuật xử lý cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi mang lại hiệu cao việc tăng số lượng chồi giống dâu tây thí nghiệm Sự nhân chồi giống dâu Mỹ Hương đánh giá tốt giống dâu Mỹ Đá dâu Pháp Từ khóa: Dâu tây, in vitro, nhân chồi Keywords: In vitro, multiplication, strawberry Abstract The aim of this research to determine suitable explant treatment techniques for shoot multiplication of three strawberry cultivars The experiment was arranged by Randomized Complete Design (RCD), two factors were strawberry cultivars (My Da cultivar, My Huong cultivar, dau Phap cultivar) and explant treatment techniques (no cutting, leaves cutting, leaves cutting and shoot tip wounding) with three replicates Culture medium was MS medium (Murashige and Skoog, 1962), supplemented with sucrose (30 g/l), benzyl adenine (0,3 mg/l) and agar (8 g/l) The results of experiment showed that leaves cutting and shoot tip wounding technique would bring the hightest efficiency in increasing the number of shoots for all of three strawberry cultivars Shoot multiplication of My Huong cultivar was the greatest among these three strawberry cultivars GIỚI THIỆU Cây dâu tây (Fragaria spp.) loại ăn giàu dinh dưỡng, có lợi cho sức khỏe người Tồn thân dâu tây có tính mát, có tác dụng nhiệt Quả dâu tây cung cấp nhiều * loại chất khoáng Ca, K, P, Mg, Fe nhiều vitamin cần thiết cho thể người vitamin A, vitamin B vitamin C Bên cạnh đó, dâu tây cịn có chất fisetin, có tác dụng chống oxy hóa, giúp bảo vệ tế bào khỏi bị lão tác giả liên hệ, hathituyetphuong@tgu.edu.vn, 098 213 7800 -40- Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Tiền Giang hóa [5] Quả dâu tây nguồn cung cấp ellagic acid, chất có khả hạn chế bệnh ung thư [7] Sản phẩm sử dụng từ dâu tây đa dạng Ngoài việc sử dụng dạng tươi, dâu tây dùng làm rượu vang, mứt, loại kem, sữa tươi tiệt trùng, tạo hương thơm cho loại bánh mứt Do đó, nhu cầu tiêu thụ dâu tây ngày gia tăng Chính vậy, nhu cầu canh tác dâu tây ngày mở rộng Cây dâu tây thường nhân giống truyền thống cách tách thân bò tách từ thân Phương pháp nhân giống cho hệ số nhân giống không cao, dễ bị nhiễm số bệnh từ mẹ Một ứng dụng quan trọng nuôi cấy mô vi nhân giống Ưu điểm phương pháp tiềm sản xuất nhanh, sử dụng nguồn mẫu ban đầu [3] Việc nghiên cứu nhân giống dâu tây phương pháp vi nhân giống thực nghiên cứu quy trình nhân giống dâu tây Mỹ Đá Đà Lạt Văn Thị Như Ngọc (2004) Giống dâu tây Mỹ Đá có đặc tính chua Ngoài ra, nhiều giống dâu tây chất lượng tốt giống Mỹ Hương (ngọt thơm), giống dâu Pháp (rất thơm) Tuy nhiên, chúng chưa nhân giống với số lượng lớn Một số nghiên cứu khác nhân giống dâu tây in vitro bệnh vi rút xoắn bệnh vi rút vàng mép [4], nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng nhân giống in vitro dây tây [12] Nhìn chung, nghiên cứu thực tạo chồi dâu tây từ mô lá, mầm ngủ đốt thân chuyển chồi sang giai đoạn tạo rễ mà bỏ qua giai Số 09/2020 đoạn nhân chồi Trong nhân giống dâu tây in vitro, giai đoạn nhân chồi quan trọng cần nghiên cứu nhằm gia tăng hệ số nhân giống, cho phép tạo số lượng lớn giống thời gian ngắn Việc xử lý mẫu cấy thích hợp giúp gia tăng tiếp xúc mẫu với môi trường nuôi cấy để hấp thu dinh dưỡng tốt hơn; hạn chế sản sinh auxin, hạn chế ưu thân tạo điều kiện cho hình thành phát triển chồi phụ Kỹ thuật xử lý mẫu cấy có vai trị định lớn đến thành cơng nhân giống in vitro nên cần nghiên cứu Vì vậy, nghiên cứu “Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên nhân chồi ba giống dâu tây (Fragaria spp.) in vitro” thực nhằm xác định kỹ thuật xử lý mẫu cấy thích hợp giúp nhân nhanh chồi dâu tây in vitro Đồng thời cung cấp sở khoa học cho nghiên cứu để tối ưu hóa kỹ thuật giúp nhân nhanh giống loại trồng khác NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Vật liệu: Cây dâu tây in vitro chai thủy tinh có chứa mơi trường nuôi cấy giống dâu tây (giống Mỹ Đá, giống Mỹ Hương giống dâu Pháp) nhân giống lưu giữ phòng Sinh học Phân tử Chọn tạo Giống trồng Viện Sinh học Tây Nguyên Các chồi dâu tây có chiều cao trung bình 25-30 mm, có từ 4-5 phát sinh từ nuôi cấy mô dâu tây in vitro sử dụng làm nguồn mẫu cho nghiên cứu Hóa chất: Các khoáng đa lượng (Merck), khoáng vi lượng (Merck) dùng để pha môi trường MS (Murashige -41- No 09/2020 and Skoog, 1962); chất điều hòa sinh trưởng benzyl adenine (BA)-(Merck) 2.2 Phương pháp Thí nghiệm tiến hành điều kiện nhiệt độ phòng 25 ± 2oC, thời gian chiếu sáng 10 giờ/ngày với cường độ 2.500-3.000 lux, ẩm độ trung bình 70-75% Mơi trường ni cấy thí nghiệm môi trường MS (Murashige and Skoog, 1962) Các chất bổ sung: sucrose (30 g/l), benzyl adenine (0,3 mg/l) agar (8 g/l) Môi trường nuôi cấy điều chỉnh pH từ 5,7-5,8 70 ml mơi trường rót vào chai thủy tinh 500 ml hấp khử trùng 121oC 20 phút Thí nghiệm bố trí theo thể thức hồn tồn ngẫu nhiên, hai nhân tố: nhân tố giống dâu tây (giống Mỹ Đá, giống Mỹ Hương, giống dâu Pháp) nhân tố kỹ thuật xử lý mẫu cấy (để nguyên chồi, cắt hết chồi, cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi) Thí nghiệm gồm nghiệm thức, lần lặp lại Mỗi lần lặp lại 15 chai, chai cấy mẫu Chọn chồi dâu tây in vitro ba giống dâu tây thí nghiệm, có chiều cao trung bình cao 25-30 mm, có 4-5 Thực xử lý chồi dâu tây trước cấy vào chai thủy tinh có chứa môi trường tương ứng với kỹ thuật xử lý mẫu khác nhau: Kỹ thuật để nguyên chồi hay no cutting: Để nguyên chồi dâu tây cấy chồi vào chai chứa môi trường Kỹ thuật cắt hết chồi hay leaves cutting: Dùng dao cấy cắt hết chồi, sau cấy chồi vào chai chứa mơi trường Journal of Science, Tien Giang University Kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi hay leaves cutting and shoot tip wounding: Dùng dao cấy cắt hết dùng mũi dao cấy chích vào đỉnh chồi (chích lần, chích trực diện vào đỉnh chồi cho thủng đỉnh chồi), sau cấy chồi vào chai chứa mơi trường Chỉ tiêu theo dõi: + Thời gian tạo chồi (ngày sau cấy): Được ghi nhận có khoảng 50% số mẫu phát sinh chồi lần lặp lại (khi có 7-8 mẫu phát sinh chồi lần lặp lại) + Tỷ lệ (%) tạo chồi mới: Tỷ lệ (%) tạo chồi = Số mẫu tạo chồi mới/Tổng số mẫu x 100 + Số chồi tạo (chồi): Được ghi nhận cách đếm số chồi (chồi có chiều cao ≥ 5,00 mm) mẫu cấy lần lặp lại + Chiều cao chồi (mm): Được đo từ phần gốc đến chóp cao chồi thước có độ xác đến millimet, lần lặp lại đo 30 chồi Ghi nhận tiêu sau 10 tuần nuôi cấy (trừ tiêu thời gian phát sinh chồi mới) Phân tích số liệu Các số liệu thu thập tính trung bình tiến hành phân tích phương sai ANOVA để đánh giá khác biệt nghiệm thức Các giá trị trung bình so sánh phương pháp kiểm định Duncan mức ý nghĩa 1% 5% KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên thời gian tạo chồi mới, số chồi tạo thành điều kiện in vitro ba giống dâu tây Thời gian tạo chồi -42- Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Tiền Giang Kết ghi nhận sau 10 tuần nuôi cấy cho thấy, nghiệm thức có khả phát sinh chồi nuôi cấy môi trường MS có bổ sung sucrose (30 g/l), benzyl adenine (0,3 mg/l) agar (8 g/l) Tỷ lệ (%) tạo chồi tất nghiệm thức 100% Tuy nhiên, thời gian tạo chồi thay đổi theo giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy khác lên mẫu ban đầu trước nuôi cấy giống dâu Mỹ Đá, Mỹ Hương dâu Pháp (Bảng 1) Bảng Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên thời gian tạo chồi (ngày sau cấy) giống dâu tây Kỹ thuật xử lý mẫu cấy Trung Giống NC LC LCSTW bình Mỹ Đá 15,0cd 13,6e 11,4g 13,3b Mỹ 14,6de 12,4f 10,7g 12,6b Hương Dâu 23,8a 18,3b 15,9c 19,3a Pháp Trung 17,8a 14,8b 12,7c bình F(giống) = ** F(kỹ thuật xử lý mẫu cấy) = ** F(tương tác) = ** CV (%) = 5,1 Ghi chú: Các số trung bình cột có mẫu tự theo sau khơng khác biệt mức ý nghĩa 1% qua phép thử Duncan NC: để nguyên chồi, LC: cắt hết chồi, LCSTW: cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi Kết phân tích Bảng cho thấy, thời gian tạo chồi khác biệt có ý nghĩa thống kê giống dâu tây thí nghiệm Thời gian tạo chồi đạt thấp giống Mỹ Hương (12,8 ngày sau cấy) cao giống dâu Pháp (19,3 ngày sau cấy) Kỹ thuật xử lý mẫu cấy ảnh hưởng có ý nghĩa lên thời gian tạo chồi Số 09/2020 chồi dâu tây nuôi cấy điều kiện in vitro Kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi cho thời gian tạo chồi nhanh (12,7 ngày sau cấy) khác biệt có ý nghĩa thống kê so với thời gian tạo chồi kỹ thuật xử lý mẫu lại Thời gian tạo chồi chồi dâu tây để nguyên chồi nuôi cấy lâu (17,8 ngày sau cấy) Qua cho thấy, việc thực xử lý mẫu chồi dâu tây trước nuôi cấy giúp thúc đẩy nhanh trình phát sinh chồi Thời gian tạo chồi nghiệm thức tương tác giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy khác biệt có ý nghĩa thống kê Thời gian tạo chồi biến thiên khoảng từ 10,7-23,8 (ngày sau cấy) Đối với dâu tây giống dâu Pháp ứng với kỹ thuật để nguyên chồi lâu (23,8 ngày sau cấy) khác biệt có ý nghĩa so với nghiệm thức lại Đối với dâu tây giống Mỹ Hương (10,7 ngày sau cấy) giống Mỹ Đá (11,4 ngày sau cấy) xử lý kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi tương đương thấp so với nghiệm thức lại Trong kỹ thuật xử lý mẫu, kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi giúp rút ngắn thời gian phát sinh chồi tốt giống dâu tây Chính việc cắt hết kết hợp với tạo vết thương đỉnh chồi góp phần hạn chế ưu chồi dâu tây cách tối hảo, qua kích thích q trình phát sinh chồi bên Số chồi tạo thành Kết phân tích Bảng cho thấy, nhân tố giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy ảnh hưởng có ý nghĩa lên số chồi tạo thành Số chồi tạo thành từ chồi -43- No 09/2020 dâu tây giống Mỹ Hương đạt cao (16,3 chồi) khác biệt có ý nghĩa thống kê so với số chồi tạo thành từ chồi dâu tây giống Mỹ Đá (12,3 chồi) giống dâu Pháp (12,7 chồi) Số chồi tạo thành từ chồi dâu tây xử lý kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi trước nuôi cấy cao (22,2 chồi) khác biệt có ý nghĩa thống kê so với số chồi tạo thành ứng với kỹ thuật cắt hết chồi (14,4 chồi) để nguyên chồi (4,6 chồi) Bảng Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên số chồi tạo thành (chồi) giống dâu tây Kỹ thuật xử lý mẫu cấy Trung Giống NC LC CLSTW bình Mỹ Đá 4,7d 12,2c 19,9b 12,3b Mỹ 4,7d 18,3b 25,8a 16,3a Hương Dâu 4,3d 12,8c 21,0b 12,7b Pháp Trung 4,6c 14,4b 22,2a bình F(giống) = ** F(kỹ thuật xử lý mẫu cấy) = ** F(tương tác) = * CV (%) = 12,9 Ghi chú: Các số trung bình cột có mẫu tự theo sau khơng khác biệt mức ý nghĩa 1% 5% qua phép thử Duncan Chỉ tiêu ghi nhận sau 10 tuần nuôi cấy NC: để nguyên chồi, LC: cắt hết chồi, LCSTW: cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi Số chồi tạo thành nghiệm thức tương tác giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy khác biệt có ý nghĩa thống kê Số chồi tạo thành biến thiên từ 4,3-25,8 (chồi) Số chồi tạo thành từ chồi dâu tây giống dâu Pháp ứng với kỹ thuật để nguyên chồi thấp (4,3 chồi) Số chồi tạo thành từ chồi dâu Journal of Science, Tien Giang University tây giống Mỹ Hương ứng với kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi đạt nhiều (25,8 chồi) khác biệt có ý nghĩa so với nghiệm thức lại Kết nghiên cứu thí nghiệm cho thấy kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi mang lại hiệu việc tăng số lượng chồi giống dâu tây Trịnh Xuân Vũ ctv (1976) cho đỉnh sinh trưởng nơi sản sinh auxin, nhóm chất điều hịa sinh trưởng khơng có tác dụng kích thích sinh trưởng tế bào mà cịn vận chuyển xuống phía dưới, gây kìm hãm sinh trưởng chồi bên Do đó, loại bỏ hạn chế việc sản sinh auxin từ đỉnh sinh trưởng thông qua việc cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi kích thích mầm bên nách thân phát triển thành chồi 3.2 Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên chiều cao chồi dâu tây điều kiện in vitro ba giống dâu tây Kết phân tích Bảng cho thấy, ảnh hưởng nhân tố giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy có ý nghĩa lên chiều cao chồi dâu tây in vitro Chiều cao chồi giống dâu Mỹ Đá đạt 31,0 mm, tương đương với chiều cao chồi giống dâu Mỹ Hương (30,7 mm) khác biệt có ý nghĩa với chiều cao chồi giống dâu Pháp (26,1 mm) Khả vươn chồi giống dâu Pháp thấp Bên cạnh đó, chiều cao chồi đạt cao để nguyên chồi nuôi cấy (32,9 mm) khác biệt có ý nghĩa thống kê so với sử dụng kỹ thuật cắt hết chồi kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi -44- Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Tiền Giang trước nuôi cấy Việc cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi trước ni cấy kích thích phát sinh chồi nhiều chiều cao chồi (25,1 mm) thấp so với kỹ thuật lại Bảng Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên chiều cao chồi (mm) giống dâu tây Kỹ thuật xử lý mẫu cấy Trung Giống NC LC LCSTW bình Mỹ Đá 34,4a 32,4b 26,2d 31,0a Mỹ 34,9a 31,6b 25,6d 30,7a Hương Dâu 29,4c 25,4d 23,6e 26,1b Pháp Trung 32,9a 29,8b 25,1c bình F(giống) = ** F(kỹ thuật xử lý mẫu cấy) = ** F(tương tác) = ** CV (%) = 2,8 Ghi chú: Các số trung bình cột có mẫu tự theo sau không khác biệt mức ý nghĩa 1% qua phép thử Duncan Chỉ tiêu ghi nhận sau 10 tuần nuôi cấy NC: để nguyên chồi, LC: cắt hết chồi, LCSTW: cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi Chiều cao chồi nghiệm thức tương tác giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy khác biệt có ý nghĩa thống kê Chiều cao chồi biến thiên khoảng từ 23,6-34,9 mm Chiều cao chồi giống Mỹ Hương ứng với kỹ thuật để nguyên chồi đạt (34,9 mm), tương đương với chiều cao chồi giống Mỹ Đá ứng với kỹ thuật (34,4 mm) khác biệt có ý nghĩa thống kê so với chiều cao chồi nghiệm thức lại Chiều cao chồi giống dâu Pháp ứng với kỹ thuật cắt hết tạo vết Số 09/2020 thương đỉnh chồi đạt thấp (23,6 mm) Điều giống dâu Pháp sinh trưởng giống Mỹ Đá Mỹ Hương Theo Eunju and Margaret (2003), kiểu di truyền có ảnh hưởng đến sinh trưởng chồi in vitro Ngoài ra, kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi hạn chế ưu chồi, kích thích phát sinh nhiều chồi phụ so với kỹ thuật lại Tuy nhiên, số lượng chồi phát sinh mẫu có tương quan nghịch với chiều cao chồi cạnh tranh dinh dưỡng chồi Điều phù hợp với kết nghiên cứu Trương Thị Diệu Hiền ctv (2007) Torenia (Torenia Fournieri L.) Qua kết nghiên cứu ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên khả nhân chồi dâu tây điều kiện in vitro cho thấy, khả nhân chồi dâu tây phụ thuộc vào nhân tố giống, kỹ thuật xử lý mẫu cấy tương tác nhân tố giống với kỹ thuật xử lý mẫu cấy Giống Mỹ Hương có khả nhân chồi cao so với giống Mỹ Đá giống dâu Pháp Kỹ thuật cắt tạo vết thương đỉnh chồi có hiệu tốt cho trình nhân chồi dâu tây Chồi dâu tây giống Mỹ Hương ứng với kỹ thuật cắt tạo vết thương đỉnh chồi có khả nhân chồi cao nhất, chồi xanh, khỏe đạt độ đồng so với nghiệm thức cịn lại (Hình 1) Kết nghiên cứu phù hợp với số nghiên cứu ảnh hưởng nhân tố giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên khả nhân giống in vitro số loài Chow et al (1992) cho khả nhân giống bảy giống hoa thủy tiên (Narcissus) cải thiện cụm chồi cắt ngắn, bỏ hết -45- No 09/2020 Journal of Science, Tien Giang University (severe cutting) Severe cutting có tác dụng loại bỏ ưu đồng thời giúp tăng khả tạo chồi phát triển Nghiên cứu Nhut et al (2005) cho thấy chồi Lan Hài (Paphiopedilum delenatii) khơng có khả tái sinh chồi không gây vết thương Việc gây vết thương cách cắt hết rễ dùng vật nhọn chích 34 lần vào phần gốc điều kiện tiên hình thành chồi Các tế bào phần bị gây tổn thương phản ứng dễ dàng với tác nhân kích thích có mơi trường ni cấy, qua kích thích phân hóa quan mới, hình thành chồi bất định A B C Hình Chồi dâu tây Mỹ Hương sau 10 tuần nuôi cấy ba kỹ thuật xử lý mẫu cấy khác Ghi chú: A: Cụm chồi dâu tây tạo ứng với kỹ thuật để nguyên chồi, B: Cụm chồi dâu tây tạo ứng với kỹ thuật cắt hết chồi, C: Cụm chồi dâu tây tạo ứng với kỹ thuật cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi Việc hạn chế tính ưu thường áp dụng ngành sản xuất hoa kiểng nhân giống ex vitro thông qua việc cắt tỉa cành lá, đốn phớt hay đốn đau Ngược lại, nhân giống in vitro, hầu hết nhà nghiên cứu sử dụng chất điều hòa sinh trưởng cytokinin để giúp hạn chế tính ưu gia tăng hệ số nhân chồi Tuy nhiên, nghiên cứu Eunju and Margaret (2003) cho thấy sinh trưởng chồi in vitro môi trường có nồng độ cytokinin cao thường có số tượng bất thường tượng thủy tinh thể, biến dị kiểu hình Do đó, nghiên cứu kỹ thuật xử lý mẫu cấy nhằm giúp hạn chế sử dụng cytokinin đảm bảo hiệu nhân chồi chất lượng chồi chất lượng cấy mô vấn đề mới, cần nghiên cứu nhiều nhân giống in vitro KẾT LUẬN Kỹ thuật xử lý cắt hết tạo vết thương đỉnh chồi thích hợp cho nhân chồi dâu tây in vitro ba giống Mỹ Đá, Mỹ Hương dâu Pháp Sử dụng kỹ thuật trước nuôi cấy giúp rút ngắn thời gian tạo chồi kích thích tạo chồi nhiều (nhân nhanh chồi) so với để nguyên chồi cắt hết chồi Giống dâu tây Mỹ Hương có khả nhân chồi tốt giống Mỹ Đá dâu Pháp điều kiện thí nghiệm LỜI CẢM ƠN Tác giả xin chân thành gửi lời cám ơn tới Giáo sư tiến sĩ Dương Tấn Nhựt, tiến sĩ Bùi Minh Trí hướng dẫn tạo điều kiện sở vật chất để thực nghiên cứu TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Chow Y.N., Selby C and Harvey B.M.R (1992) “A simple method for maintaining hight multiplication of Narcissus shoot cultures in vitro”, Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 30, 227-230 [2] Duong Tan Nhut, Phan Thi Thuy Trang, Nguyen Hong Vu et al (2005) “A wounding method and liquid culture in Paphiopedilum delenatii propagation”, Propagation of Ornamental Plant, 5(3), 158-163 -46- Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Tiền Giang [3] Dương Tấn Nhựt (2007) Công nghệ sinh học thực vật, 1, NXB Nơng nghiệp, TP Hồ Chí Minh, 8197 [4] Dương Tấn Nhựt, Nguyễn Duy, Hà Thị Tuyết Phượng ctv (2009) “Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR chẩn đoán bệnh virus xoắn vàng mép dâu tây in vitro”, Tạp chí Cơng nghệ Sinh học, 7(3), 335-340 [5] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương ctv (2004) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt nam, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, 618-619 [6] Eunju C and Margaret R.P (2003) “Micropropagation of Chinese Redbud (Cercis yunnanensis) through axillary bud breaking and induction of adventitious shoots from leaf pieces”, In Vitro CellularDevelopmental Biology-Plant, 39, 455-458 [7] Kjersti A., Dag E and Grete S (2007) “Characterization of Phenolic Compounds in Strawberry (Fragaria x annassa) Fruits by Different HPLC Detectors and Contribution of Individual Compounds to Total Antioxidant Capacity”, Journal Agric Food Chem, 55(11), 4395-4406 [8] Murashige T and Skoog F (1962) “A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures”, Physiologia Plantarum, 15(3), 473-497 Số 09/2020 [9] Sunita Jhajhra, Dashora L.K., Jitendra Singh et al (2018) “In vitro propagation of Strawberry (Fragaria x ananassa Duch.)”, International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences, 7(10), 30303035 [10] Trịnh Xuân Vũ, Lê Dỗn Diên, Nguyễn Đình Ngun ctv (1976) Sinh lý thực vật, NXB Nông thôn, 288-293 [11] Trương Thị Diệu Hiều, Phan Đình Kim Thư, Trịnh Thị Lan Anh ctv (2007) So sánh khả phát sinh chồi bất định từ lá, chồi ngủ thân Torenia (Torenia Fourneri L.) điều kiện nuôi cấy in vitro Hội nghị khoa học công nghệ sinh học thực vật công tác nhân giống chọn tạo giống hoa lần I, Viện khoa học công nghệ Việt Nam, 15-16/12/2007, NXB Nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh, 93-102 [12] Văn Thị Như Ngọc (2004) Nghiên cứu quy trình nhân giống dâu tây Mỹ đá (Fragaria spp.) Đà Lạt Luận văn Thạc sĩ ngành Sinh học, Trường Đại học Đà Lạt -47- ... ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên khả nhân chồi dâu tây điều kiện in vitro cho thấy, khả nhân chồi dâu tây phụ thuộc vào nhân tố giống, kỹ thuật xử lý mẫu cấy tương tác nhân tố giống với kỹ thuật. .. hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên chiều cao chồi dâu tây điều kiện in vitro ba giống dâu tây Kết phân tích Bảng cho thấy, ảnh hưởng nhân tố giống kỹ thuật xử lý mẫu cấy có ý nghĩa lên chiều cao chồi. .. nhân giống in vitro nên cần nghiên cứu Vì vậy, nghiên cứu ? ?Ảnh hưởng kỹ thuật xử lý mẫu cấy lên nhân chồi ba giống dâu tây (Fragaria spp.) in vitro? ?? thực nhằm xác định kỹ thuật xử lý mẫu cấy thích