Luận văn thạc sĩ HUS nghiên cứu quy trình xử lý mẫu nước tiểu để phân tích một số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS bằng phương pháp CE c4d

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Tạ Thùy Linh NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƢỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHÓM ATS BẰNG PHƢƠNG PHÁP CE-C4D LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2016 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Tạ Thùy Linh NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƢỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHÓM ATS BẰNG PHƢƠNG PHÁP CE-C4D Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: HD 1: TS Nguyễn Thị Ánh Hƣờng HD 2: TS Nguyễn Xuân Trƣờng Hà Nội - 2016 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Thị Ánh Hƣờng TS Nguyễn Xuân Trƣờng Thầy, giao đề tài, tận tính hƣớng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn công ty 3Sanalysis (http://www.3sanalysis.vn/) hỗ trợ trang thiết bị cho nghiên cứu Tôi xin cảm ơn hỗ trợ kinh phì Đại học Quốc gia Hà Nội đề tài QG.15.15: “Quy trính phân tìch số chất ma túy nhóm ATS (MA; MDA; MDMA; MDEA) thƣờng sử dụng Việt Nam mẫu bị bắt giữ mẫu nƣớc tiểu phƣơng pháp điện di mao quản sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc CE-C4D” Tôi xin chân thành cảm ơn thầy, giáo khoa Hóa, trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên dạy dỗ, bảo động viên tơi suốt q trính học tập nghiên cứu trƣờng Tôi xin cảm ơn CN Nguyễn Thị Liên SV Lê Thị Hƣơng Giang phối hợp thực nghiên cứu Tôi xin cảm ơn anh, chị Trung tâm giám định ma túy – Viện Khoa học hính nhƣ đồng nghiệp đội giám định Hóa học – phịng PC54 – CATP Hà Nội giúp đỡ, tạo điều kiện để tơi hồn thành luận văn Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đính, bạn học viên sinh viên Bộ môn Hóa phân tìch ln hỗ trợ, động viên, chỗ dựa vững giúp tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 01 tháng năm 2016 Học viên Tạ Thùy Linh LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung ma túy tổng hợp nhóm ATS 1.1.1 Nguồn gốc, tổng hợp MA, MDA, MDMA MDEA 1.1.2 Vai trò tác dụng ma túy tổng hợp 1.1.3 Cơ chế hoạt động 1.2 Tính hính sử dụng ma túy tổng hợp nhóm ATS giới Việt Nam 1.2.1 Trên giới 1.2.2 Ở Việt Nam 10 1.3 Một số phƣơng pháp xác định ma túy tổng hợp nhóm ATS 11 1.3.1 Phƣơng pháp điện hóa 11 1.3.2 Phƣơng pháp ELISA 12 1.3.3 Các phƣơng pháp sắc ký 12 1.3.3.1 Phƣơng pháp sắc ký khì 12 1.3.3.2 Phƣơng pháp sắc ký lỏng 14 1.3.4 Các phƣơng pháp điện di mao quản 15 1.4 Các phƣơng pháp xử lý mẫu phẩm sinh học 18 1.4.1 Phƣơng pháp chiết lỏng - lỏng 18 1.4.2 Phƣơng pháp chiết pha rắn 20 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM 24 2.1 Mục tiêu nội dung nghiên cứu 24 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu 24 2.1.2 Nội dung nghiên cứu 24 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 24 2.2.1 Phƣơng pháp phân tìch 24 2.2.2 Phƣơng pháp xử lý mẫu 25 2.3 Hóa chất thiết bị 26 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 2.3.1 Hóa chất 26 2.3.1.1 Chất chuẩn 26 2.3.1.2 Hóa chất, dung mơi 26 2.3.1.3 Chuẩn bị dung dịch hóa chất 26 2.3.2 Thiết bị, dụng cụ 27 2.4 Các phƣơng pháp đánh giá độ tin cậy phƣơng pháp phân tìch 28 2.4.1 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lƣợng (LOQ) 28 2.4.2 Độ chụm (độ lặp lại) phƣơng pháp 28 2.4.3 Độ (độ thu hồi) thiết bị, phƣơng pháp 29 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 Xây dựng đƣờng chuẩn chất phân tìch 30 3.1.1 Xây dựng đƣờng chuẩn 30 3.1.2 Đánh giá phƣơng trính hồi quy đƣờng chuẩn 33 3.2 Đánh giá phƣơng pháp phân tìch 33 3.2.1.Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lƣợng (LOQ) 33 3.2.2 Đánh giá độ chụm (độ lặp lại) thiết bị 35 3.3 Nghiên cứu, tối ƣu điều kiện trính chiết lỏng - lỏng nhằm xác định MA, MDA, MDMA, MDEA mẫu nƣớc tiểu 38 3.3.1 Khảo sát dung môi chiết 38 3.3.2 Khảo sát pH môi trƣờng chiết 39 3.3.3 Khảo sát thể tìch dung mơi chiết 40 3.3.4 Đánh giá độ độ chụm phƣơng pháp chiết lỏng - lỏng 42 3.4 Nghiên cứu tối ƣu điều kiện trính chiết pha rắn nhằm xác định MA, MDA, MDMA, MDEA mẫu nƣớc tiểu 44 3.4.1 Khảo sát lựa chọn cột chiết 44 3.4.2 Khảo sát pH dung dịch đệm 47 3.4.3 Khảo sát thành phần dung dịch rửa tạp 48 3.4.4 Ảnh hƣởng thể tìch dung dịch axit H3PO4 dùng để rửa tạp đến hiệu suất thu hồi chất phân tìch 50 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 3.4.5 Khảo sát ảnh hƣởng dung môi rửa giải 52 3.4.6 Ảnh hƣởng thể tìch rửa giải đến độ thu hồi chất phân tìch 53 3.4.7 Đánh giá độ độ chụm phƣơng pháp chiết pha rắn 54 3.5 Phân tìch mẫu thực tế 56 3.6 Phân tìch đối chứng phƣơng pháp CE – C4D với phƣơng pháp GC/MS 60 KẾT LUẬN 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO 63 PHỤ LỤC 68 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thơng tin chất phân tìch (MA, MDA, MDMA, MDEA) Bảng 3.1 Sự phụ thuộc diện tìch pic vào nồng độ MA, MDA, MDMA, MDEA 31 Bảng 3.2 Phƣơng trính hồi quy chất phân tìch 32 Bảng 3.3 Kết so sánh giá trị a với giá trị phƣơng trính đƣờng chuẩn MA, MDA, MDMA, MDEA 33 Bảng 3.4 Giới hạn phát MA, MDA, MDMA, MDEA xác định phƣơng pháp điện di mao quản CE-C4D 34 Bảng 3.5 Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lƣợng (LOQ) MA, MDA, MDMA, MDEA 35 Bảng 3.6 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MA 35 Bảng 3.7 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MDA 36 Bảng 3.8 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MDMA 37 Bảng 3.9 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MDEA 37 Bảng 3.10 Hiệu suất thu hồi dung môi pH= 7-11 39 Bảng 3.11 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MA 42 Bảng 3.12 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDA 43 Bảng 3.13 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDMA 43 Bảng 14 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDEA 43 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Bảng 3.15 Kết xác định độ lặp lại phƣơng pháp chiết lỏng-lỏng định lƣợng MA, MDA, MDMA MDEA 44 Bảng 3.16 Hiệu suất thu hồi trính chiết sử dụng cột SCX cột C18 47 Bảng 3.17 Hiệu suất thu hồi chất phân tìch pH khác đệm 48 Bảng 3.18 Hiệu suất thu hồi chất phân tìch sử dụng dung dịch rửa tạp khác 50 Bảng 3.19 Hiệu suất thu hồi chất phân tìch sử dụng thể tìch dung dịch H3PO4 rửa tạp khác 51 Bảng 3.20 Hiệu suất thu hồi chất phân tìch sử dụng dung môi rửa giải khác 52 Bảng 3.21 Hiệu suất thu hồi chất phân tìch sử dụng thể tìch dung mơi rửa giải khác 53 Bảng 3.22 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MA 54 Bảng 3.23 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDA, MDMA MDEA 55 Bảng 3.24 Kết xác định độ lặp lại phƣơng pháp CE-C4D định lƣợng MA, MDA, MDMA MDEA 55 Bảng 3.25 Thơng tin mẫu nƣớc tiểu đƣợc phân tìch 56 Bảng 3.26 Kết phân tìch số mẫu nƣớc tiểu chứa ma túy 57 Bảng 3.27 Kết phân tìch mẫu nƣớc tiểu H2 60 Bảng 3.28 Kết phân tìch số mẫu thực phƣơng pháp GC/MS 61 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC CÁC HÌNH Hính 1.1 Ngun lý hoạt động cảm biến đo độ dẫn không tiếp xúc 16 Hính 1.2 Sơ đồ biểu diễn cấu trúc (A) mạch điện tƣơng đƣơng (B) cảm biến đo độ dẫn không tiếp xúc 16 Hính 2.1 Hệ thiết bị CE-C4D 25 Hính 3.1 Đƣờng chuẩn MA 32 Hính 3.2 Đƣờng chuẩn MDA 32 Hính 3.3 Đƣờng chuẩn MDMA 32 Hính 3.4 Đƣờng chuẩn MDEA 32 Hính 3.5 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với dung môi chiết khác 39 Hính 3.6 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với dung mơi chiết etyl acetat pH khác 40 Hính 3.7 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc hiệu suất thu hồi vào pH môi trƣờng chiết 40 Hính 3.8 Điện di đồ biểu diễn kết khảo sát với lƣợng dung môi chiết khác 41 Hính 3.9 Biểu đồ phụ thuộc hiệu suất thu hồi vào thể tìch dung môi chiết 41 Hính 3.10 Điện di đồ phân tìch mẫu SPE sử dụng cột SCX cột C18 47 Hính 3.11 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với điều kiện pH đệm khác 48 Hính 3.12 Hiệu suất thu hồi chất phân tìch pH khác đệm 49 Hính 3.13 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với dung dịch rửa tạp khác 50 Hính 3.14 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với thể tìch H3PO4 rửa tạp khác 51 Hính 3.15 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com với dung môi rửa giải khác 52 Hính 3.16 Điện di đồ phân tìch số mẫu nƣớc tiểu 58 Hính 3.17 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H2 mức nồng độ khác 59 Hính 3.18 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H12 mức nồng độ khác 60 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 10 mV MA pic l¹ Møc Møc 300 400 500 600 700 800 900 Thêi gian di chun (s) Hình 4.10 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H11 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H11 pha loãng 10 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 69,7ppm vào mẫu H11 pha loãng 10 lần ion 10 mV MA Mức Mức 300 400 500 600 700 800 Hình 4.11 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H13 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H13 Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 20ppm vào mẫu H13 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ion 10 mV MA pic lạ Mức Møc 400 500 600 700 800 900 Thêi gian di chun (s) Hình 4.12 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H14 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H12 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H14 pha lỗng 20 lần c¸c ion 10 mV pic lạ MA Mức Mức 300 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.14 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H15 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H15 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H15 pha loãng 20 lần LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 10 mV ion pic l¹ MA Møc Møc 300 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.15 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H16 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H16 pha loãng 10 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 47,6 ppm vào mẫu H16 pha loãng 10 ln 10 mV ion MA Mức Møc 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.16 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H17 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H17 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H17 pha loãng 20 lần LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MA 10 mV c¸c ion Mức Mức 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.17 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H18 Mức 0: Khơng thêm chuẩn MA vào mẫu H18 pha lỗng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H18 pha loãng 20 lần ion 10 mV MA Mức Mức 400 500 600 700 800 Thêi gian di chuyÓn (s) Hình 4.18 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H19 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H19 Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 20ppm vào mẫu H19 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 10 mV ion MA Møc Møc 300 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.19 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H20 Mức 0: Khơng thêm chuẩn MA vào mẫu H20 pha lỗng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 69,7 ppm vào mẫu H20 pha loãng 20 lần *Một số sắc ký đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu đối chứng phƣơng pháp GC/MS (gồm mẫu H11, H12, H13, H14, H15, H16, H17, H18, H19 H20) LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Phụ lục 2: Kết phân tích đối chứng số mẫu thực phƣơng pháp GC/MS * Mẫu nước tiểu H11 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H12 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H13 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H14 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H15 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H16 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H17 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H18 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H19 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com * Mẫu nước tiểu H20 MA MA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... Thùy Linh NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƢỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHÓM ATS BẰNG PHƢƠNG PHÁP CE- C4D Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC... luanvanchat@agmail.com CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM 2.1 Mục tiêu nội dung nghiên cứu 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu luận văn là: Nghiên cứu quy trính xử lý mẫu nƣớc tiểu để phân tìch số chất ma túy tổng hợp nhóm. .. dung nghiên cứu cần thực bao gồm: - Tổng quan tài liệu phƣơng pháp khác để xác định đồng số hợp chất ma túy tổng hợp nhóm ATS phƣơng pháp xử lý mẫu nƣớc tiểu - Xây dựng đƣờng chuẩn chất phân