ĐỀ CƢƠNG MÔN HỌC KỸ THUẬT SẮC KÝ NÂNG CAO (Advanced Chromatography) Thông tin chung môn học - Tên môn học: Kỹ thuật sắc ký nâng cao - Mã mơn học: 211503 - Số tín chỉ: - Môn học bắt buộc: Thiết bị kỹ thuật Công nghệ Sinh học - Giờ tín hoạt động: 30 tiết + Nghe giảng lý thuyết: 15 tiết + Thực hành (ở PTN): 15 tiết + Tự học: 15 tiết Mục tiêu môn học Môn học cung cấp cho sinh viên ngành Công nghệ Sinh học kiến thức kỹ thuật sắc ký nâng cao, môn khoa học phương pháp xác định thành phần, định tính định lượng chất hỗn hợp chúng Nhằm giúp cho sinh viên tiếp cận phương pháp phân tích hóa học đại, đồng thời xây dựng kỹ phân tích, xác định thành phần hóa học chất Tóm tắt nội dung mơn học: Mơn học tiến hành giảng dạy theo nội dung sau: lý thuyết chung phương pháp sắc ký, phương pháp chuẩn bị mẫu trước tiến hành phân tích máy, thực hành phân tích hàm lượng vitamin C sắc ký lỏng cao áp (HPLC) phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật Cypermethrin sắc ký khí (GC) Nội dung chi tiết mơn học Chƣơng 1: Lý thuyết chung phƣơng pháp phân tích sắc ký 1.1 Lịch sử đời phát triển 1.2 Nguyên tắc phương pháp sắc ký 1.3 Phân loại phương pháp sắc ký 1.4 Peak sắc ký đặc trưng trình rửa giải 1.5 Ưu nhược điểm 1.6 Ứng dụng phương pháp sắc ký phân tích Chƣơng 2: Phƣơng pháp tách chiết 2.1 Bản chất trình phân chia (tách) 2.2 Các phương pháp chiết 2.3 Ứng dụng trình chiết Chƣơng 3: Phƣơng pháp sắc ký khí sắc ký lỏng cao áp 3.1 Các phận sắc ký lỏng sắc ký khí 3.2 Nguyên tắc hoạt động vận hành hệ thống sắc ký Phân tích ứng dụng: Bài 1: Định lƣợng Vitamin C phƣơng pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Nguyên tắc phương pháp : Vitamin C có sản phẩm trích hệ lỏng-lỏng với dung môi hữu (methanol, nước pH 2,1 chuẩn H2SO4) Sau đưa vào máy sắc ký lỏng cao áp (HPLC 1100 Hawlett Packard, đầu dò VWD, Cột Hypersil BDS, 3um C18), để định lựơng Vitamin C có mẫu Chuẩn bị dung dịch chuẩn: pha dãy nồng độ 50ppm, 20ppm, 10ppm, 5ppm, 1ppm từ chuẩn rắn ban đầu Chuẩn bị mẫu: chiết mẫu, lọc mẫu định mức Xác định máy HPLC 117 Tính tốn kết quả: dựa vào đường chuẩn tính tốn hàm lượng vitamin C mẫu ban đầu Mục tiêu yêu cầu bài: Sinh viên hiểu rõ nguyên tắc hoạt động máy HPLC, biết cách chuẩn bị mẫu phân tích tính tốn hàm lượng vitamin C mẫu Bài 2: Xác định dƣ lƣợng thuốc bảo vệ thực vật Cypermethrin rau Nguyên tắc phương pháp: Dư lượng Cypermethrin tách dung mơi petroleum ether, sau làm qua cột florisil để loại bớt tạp chất Mẫu phân tích sắc ký khí với đầu dị cộng kết điện tử (GC/ECD) Chuẩn bị dung dịch chuẩn: pha nồng độ 1ppm, 2ppm, 4ppm từ chuẩn gốc 100ppm dung môi methanol Chuẩn bị chất hấp thụ florisil: sấy florisil 1300C qua đêm, cất vào bình hút ẩm trước sử dụng Khi sử dụng bổ sung 2% nước cất Chuẩn bị mẫu: trích mẫu làm mẫu Xác định máy sắc ký khí: cán hướng dẫn sinh viên bơm mẫu vào máy Tính tốn kết quả: dựa vào đường chuẩn tính tốn dư lượng Cypermethrin mẫu ban đầu Mục tiêu yêu cầu bài: Sinh viên hiểu rõ nguyên tắc hoạt động máy GC, biết cách chuẩn bị mẫu phân tích tính tốn hàm lượng thuốc BVTV mẫu rau ban đầu Học liệu Jalal AWADH Jian LOU, De-sheng ZHAO, De-fang FAN, 2001 “Multiresidue Determination of Pyrethroid Insecticides in Chrysanthemi” Analytical sciences 2001, vol.17 supplement p i733-p i735 AOAC.Chapter 45; p.6-7;45.1.05; Bo.4 AOAC.Chapter 45; p.51-53;45.2.08; Bo.4 Chính sách môn học yêu cầu khác giảng viên Điểm danh, kiểm tra đầu giờ, yêu cầu sinh viên có mặt đầy đủ hồn thành tất thực hành buổi học Phƣơng pháp, hình thức kiểm tra - đánh giá kết học tập môn học Nội dung đánh giá: tham gia học tập lớp (10%), báo cáo kết thực hành (50%), kiểm tra - đánh giá cuối kì (thi vấn đáp) (40%) 118 ... mơn học yêu cầu khác giảng viên Điểm danh, kiểm tra đầu giờ, yêu cầu sinh viên có mặt đầy đủ hoàn thành tất thực hành buổi học Phƣơng pháp, hình thức kiểm tra - đánh giá kết học tập môn học Nội... ẩm trước sử dụng Khi sử dụng bổ sung 2% nước cất Chuẩn bị mẫu: trích mẫu làm mẫu Xác định máy sắc ký khí: cán hướng dẫn sinh viên bơm mẫu vào máy Tính tốn kết quả: dựa vào đường chuẩn tính toán... Cypermethrin tách dung mơi petroleum ether, sau làm qua cột florisil để loại bớt tạp chất Mẫu phân tích sắc ký khí với đầu dị cộng kết điện tử (GC/ECD) Chuẩn bị dung dịch chuẩn: pha nồng độ 1ppm, 2ppm,