THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT NICLOSAMIDE Pesticides – Determination of niclosamide content

TCVN : 2019 TCVN TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN : 2019 Dự thảo lần THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT NICLOSAMIDE Pesticides – Determination of niclosamide content HÀ NỘI  2019 TCVN : 2019 Lời nói đầu TCVN : 2019 xây dựng theo CIPAC/599/TC/M TCVN : 2019 Cục Bảo vệ thực vật biên soạn, Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố TCVN : 2019 TCVN : 2019 T I Ê U C H U Ẩ N QUỐC GIA TCVN : 2019 Thuốc bảo vệ thực vật – Xác định hàm lượng hoạt chất niclosamide Pesticides - Determination of niclosamide content Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) sử dụng detector tử ngoại (UV) để xác định hàm lượng hoạt chất niclosamide sản phẩm thuốc bảo vệ thực vật có chứa niclosamide (xem phụ lục A) Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết để áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích phịng thí nghiệm – Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử TCVN 12017:2017 Thuốc bảo vệ thực vật – Lấy mẫu Ngun tắc Hịa tan niclosamide acetonitril sau xác định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC), sử dụng cột pha đảo với detector tử ngoại (UV) bước sóng 260 nm dùng phương pháp ngoại chuẩn Kết định danh xác định dựa so sánh thời gian lưu píc mẫu thử píc chuẩn Kết định lượng xác định dựa so sánh số đo diện tích píc mẫu thử píc chuẩn Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử tinh khiết phân tích, nước dùng q trình phân tích đạt loại TCVN 4851 (ISO 3696) có độ tinh khiết tương đương TCVN : 2019 4.1 Chất chuẩn niclosamide (C13H12F3N5O5S), biết hàm lượng 4.2 Methanol (CH3OH), dùng cho sắc ký lỏng 4.3 Kali dihydrogenphosphate (KH2PO4), dùng cho sắc ký lỏng 4.4 Axit phosphoric, (H3PO4), dùng cho sắc ký lỏng 4.5 Tetrahydrofuran, (C4H8O), dùng cho sắc ký lỏng 4.6 Dung môi pha mẫu Cho 250 ml dung mơi tetrahydrofuran (4.5) vào ống đong 500 ml có chứa sẵn 250 ml methanol (4.2), đặt vào máy siêu âm (5.6) siêu âm để đuổi bọt khí 4.7 Dung mơi pha động Dùng cân phân tích (5.7) cân khoảng g kali dihydrogenphosphate (4.3) vào côc lít có chứa sẵn 150 ml nước dùng đũa thủy tinh khuấy cho tan hết, thêm 850 ml methanol (4.2), thêm ml axit phosphoric (4.4) đặt vào máy siêu âm (5.6) siêu âm min, để nguội đến nhiệt độ phịng, lọc qua giấy lọc 0,45 µm 4.8 Dung dịch chuẩn làm việc Dùng cân phân tích (5.7) cân khoảng 0,01 g chất chuẩn niclosamide (4.1), xác đến 0,00001 g vào bình định mức 20 ml (5.2), hồ tan định mức đến vạch dung mơi pha mẫu (4.6) Đặt vào máy siêu âm (5.6) siêu âm min, để nguội đến nhiệt độ phòng CHÚ THÍCH: - Chất chuẩn bảo quản tủ mát 20 0C ± 0C - Nếu sử dụng cân có cấp xác 0,0001 g lượng mẫu chuẩn tăng lên 10 lần - Dung dịch chuẩn nên bảo quản bình tối màu 0C đến 0C Dụng cụ, thiết bị Sử dụng thiết bị, dụng cụ thơng thường phịng thử nghiệm cụ thể sau: 5.1 Cốc thuỷ tinh, dung tích 1000 ml 5.2 Bình định mức, dung tích 10 ml; 20 ml 5.3 Pipet, dung tích 0,5ml; ml TCVN : 2019 5.4 Xyranh bơm mẫu, dung tích 50 l, chia vạch đến l bơm mẫu tự động 5.5 Màng lọc PTFE, có kích thước lỗ 0,45 µm 5.6 Máy siêu âm 5.7 Cân phân tích, có độ xác đến 0,00001 g 5.8 Thiết bị sắc ký lỏng hiệu cao, trang bị sau: - Máy sắc ký lỏng hiệu cao với detector tử ngoại (UV) - Hệ thống bơm cao áp - Máy tích phân máy vi tính - Cột RP 18, 250 mm, đường kính 4,6 mm, kích thước hạt µm loại tương đương - Bộ bơm mẫu tự động bơm mẫu tay Cách tiến hành 6.1 Lấy mẫu chuẩn bị mẫu 6.1.1 Lấy mẫu Lấy mẫu theo TCVN 12017:2017 6.1.2 Chuẩn bị mẫu Mẫu cần làm đồng trước cân: Đối với mẫu dạng lỏng phải lắc đều, bị đông đặc nhiệt độ thấp cần làm tan chảy nhiệt độ 30 0C ± 0C; mẫu dạng bột, hạt phải trộn đều; mẫu dạng bả rắn phải nghiền mịn rây qua rây có đường kính lỗ mm, trộn làm mẫu phân tích 6.1.3 Chuẩn bị dung dịch mẫu thử Dùng cân phân tích (5.7) cân mẫu thử có chứa khoảng 0,01 g hoạt chất niclosamide, xác đến 0,00001 g vào bình định mức 20 ml (5.2), hồ tan định mức đến vạch dung mơi pha mẫu (4.6) Đặt vào máy siêu âm (5.6) siêu âm min, để nguội đến nhiệt độ phòng, lọc qua màng lọc 0,45 µm (5.5) 6.2 Xác định hàm lượng hoạt chất 6.2.1 Điều kiện phân tích Pha động: Theo 4.7 TCVN : 2019 Bước sóng: 236 nm Tốc độ dịng: 1,0 ml/min Thể tích bơm mẫu: l Nhiệt độ buồng cột: 400C 6.2.2 Xác định Bơm dung dịch chuẩn làm việc (4.8) số đo diện tích, thời gian lưu pic chất chuẩn thay đổi khơng lớn % Sau đó, bơm dung dịch chuẩn làm việc (4.8) dung dịch mẫu thử (6.1.3), lặp lại lần (bơm lượng cân mẫu) Tính kết Hàm lượng hoạt chất niclosamide mẫu, X, biểu thị phần trăm khối lượng (%) tính theo cơng thức 1: X Sm mc P (1) Sc mm Trong đó: Sm số đo diện tích pic mẫu thử; Sc số đo diện tích pic chuẩn; mc khối lượng chất chuẩn, tính gam (g); mm khối lượng mẫu thử, tính gam (g); P độ tinh khiết chất chuẩn, tính phần trăm (%) Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) thông tin cần thiết việc nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu sử dụng; c) phương pháp thử sử dụng viện dẫn tiêu chuẩn này; TCVN : 2019 d) thao tác không quy định tiêu chuẩn này, điều coi tự chọn, chi tiết có ảnh hưởng tới kết quả; e) kết thử nghiệm thu được, với hai chữ số sau dấu phẩy TCVN : 2019 Phụ lục A (Tham khảo) A Giới thiệu hoạt chất niclosamide A.1.1 Công thức cấu tạo: A.1.2 Tên hoạt chất: Niclosamide A.1.3 Tên hoá học: IUPAC: 5-chloro-N-(2-chloro-4-nitrophenyl)-2-hydroxybenzamide A.1.4 Công thức phân tử: C13H8Cl2N2O4 A.1.5 Khối lượng phân tử: 327,1 A.1.6 Nhiệt độ nóng chảy: 230 ºC A.1.7 Áp suất bão hoà 25 ºC: 0.013 mPa A.1.8 Độ hịa tan A.1.9 Dung mơi (ở 20 ºC) Độ hòa tan (g/l) Nước (pH 6,4) 1,6 m/l Nước (pH 9,1) 110 m/l Dạng bên ngoài: Tinh thể vàng A.1.10 Độ bền: DT50 nước (ở 20 oC) Thời gian bán phân huỷ pH 6,9 ngày pH 13 18,8 ngày A.1.11 Chênh lệch hai kết xác định song song không lớn 1,1 %, mức 70% 10 TCVN : 2019 A.2 Sắc ký đồ chuẩn Niclosamide 11 TCVN : 2019 Thư mục tài liệu tham khảo [1] CIPAC/599/TC/M [2] CDS Tomlin, The Pesticide Manual, Thirteeth Edition, 2003 [3] TC 05/CL:2005, thuốc trừ ốc chứa hoạt chật niclosamide- Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử 12 ... N QUỐC GIA TCVN : 2019 Thuốc bảo vệ thực vật – Xác định hàm lượng hoạt chất niclosamide Pesticides - Determination of niclosamide content Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp sắc ký... lỏng hiệu cao (HPLC) sử dụng detector tử ngoại (UV) để xác định hàm lượng hoạt chất niclosamide sản phẩm thuốc bảo vệ thực vật có chứa niclosamide (xem phụ lục A) Tài liệu viện dẫn Các tài liệu... để phân tích phịng thí nghiệm – Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử TCVN 12017:2017 Thuốc bảo vệ thực vật – Lấy mẫu Nguyên tắc Hòa tan niclosamide acetonitril sau xác định phương pháp sắc ký lỏng