Chọn lọc và nuôi cấy các chủng Tảo nước ngọt có hoạt tính sinh học.pdf

0 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TÁT THÀNH NGUYỄN NGỌC HUNG CHỌN LỌC VÀ NUÔI CẤY CÁC CHỦNG TẢO NƯỚC NGỌT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược ĐẠI HỌC TPHCM - NÀM 2019 ffl BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TÁT THÀNH NGUYỄN NGỌC HUNG CHỌN LỌC VÀ NUÔI CẤY CÁC CHỦNG TẢO NƯỚC NGỌT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC Chun ngành: Quản lý cung ứng thuốc KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược ĐẠI HỌC Hướng dẫn khoa học: TS Võ Hồng Trung TPHCM - NĂM 2019 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy TS Võ Hồng Trung - Trưởng mơn Hóa sinh - Độc chất tận tình hướng dẫn, bảo, tạo điều kiện tốt cho em suốt trình nghiên cứu thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn Thầy, Cô Cán khoa Dược, trường Đại học Nguyễn Tất Thành đà giúp đỡ em q trình học tập thực khóa luận tốt nghiệp Cảm ơn bạn monitor mơn Độc chất - Hóa sinh: Trần Phú Đạt, Nìm Chí Trân, Bùi Kim Phụng, Đỗ Anh Thư, Phạm Lương Anh Tuấn, Nguyễn Tuyết Như nhiệt tình hồ trợ, giúp đờ em hồn thành tốt khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè động viên, tạo điều kiện đe em học tập nghiên cứu LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nên luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác SINH VIÊN sv Nguyền Ngọc Hưng MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC CHỪ VIẾT TẤT iv DANH MỤC HÌNH V DANH MỤC BẢNG vii ĐẶT VÁN ĐÈ CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu vi tảo 1.2 Các chất có hoạt tính sinh học vi tảo 1.3 Sinh tổng hợp lipid vi tảo 1.3.1 Sinh tổng hợp acid béo 1.3.2 Sinh tong hợp triacyglycerol 1.4 Sinh tông hợp carotenoid vi tảo 1.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến tích lũy hoạt chất sinh học vi tảo 1.5.1 Nhiệt độ 1.5.2 Ánh sáng 1.5.3 Dinh dường 1.6 Tình hình nghiên cứu vi tảo 1.6.1 Tình hình nghiên cứu vi tảo nước 1.6.2 Tình hình nghiên cứu vi tảo nước 10 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 12 2.1 Phương pháp thu mầu 13 2.1.1 Vị trí thu mẫu 13 2.1.2 Phương pháp thu mẫu 14 2.2 Phương pháp phân lập 14 2.3 Phương pháp tinh kháng sinh 17 2.4 Các phương pháp phân tích 17 2.4.1 Quan sát hình thái tế bào 17 2.4.2 Phân tích tăng trưởng 17 2.4.3 Xác định tốc độ tăng trưởng đặc hiệu 18 2.4.4 Phân tích sắc tố 18 2.4.5 Xác định hàm lượng lipid tổng phương pháp Sulfo-phospho- vanillin 19 2.5 Phương pháp chọn lọc 19 2.5.1 Chọn lọc dựa đặc điểm hình thái 19 2.5.2 Chọn lọc dựa đặc diem sinh lý - sinh hóa 20 2.6 Xử lý số liệu .21 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 3.1 Kết thu mẫu 22 3.2 Kết phân lập 22 3.3 Ket chọn lọc 25 3.3.1 Chọn lọc dựa hình thái 25 3.3.2 Chọn lọc dựa đặc diem sinh lý - sinh hóa 26 3.4 Bàn luận 42 3.4.1 Thu mầu chọn lọc chủng đặc điểm hình thái 42 ii 3.4.2 Chọn lọc cách nuôi đến cạn kiệt dinh dưỡng 42 3.4.3 Chọn lọc cách ức chế ánh sáng cường độ cao 44 3.4.4 Phân loại sơ chủng vi tảo .45 3.4.5 Nhận xét .50 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 51 4.1 Kết luận 51 4.2 Kiến nghị 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Chú thích ADP Adenosine diphosphat ATP Adenosine triphosphat BBM Bold’s Basal Medium DNA Deoxyribonucleic acid NADP Nicotinamide adenosine dinucleotide phosphate RNA Ribonucleic acid TAG Triacylglycerol IV DANH MỤC • HÌNH Hình 1.1 Sơ đồ tổng hợp acid béo lục lạp [51 ] Hình 1.2 Sơ đồ tổng hợp triacyglycerol vi tảo [51] Hình 1.3 Các đường tong hợp carotenoid sinh vật tự dưỡng tạo oxy [65] Hình 2.1 Sơ đồ bước thực đề tài 12 Hình 2.2 Các khu vục lấy mầu (A): Hồ Đá, (B): Ho sinh thái Đại Học Quốc Gia, (C): Hồ Con Rùa, (D): Quận 13 Hình 2.3 Khu vực lấy mẫu đảo Phú Quốc, tỉnh Kiên Giang 14 Hình 2.4 Quy trình phương pháp phân lập 16 Hình 2.5 Cấu tạo buồng đếm hồng cầu vị trí đếm tảo 18 Hình 3.1 Các chai mẫu thu sau thu mầu 22 Hình 3.2 Đìa thạch ống thạch nghiêng số mẫu sau phân lập 23 Hình 3.3 Các chủng tảo có màu vàng/cam ống nghiệm thạch nghiêng tế bào 25 Hình 3.4 Các chủng tảo có màu xanh ống nghiệm thạch nghiêng tế bào 26 Hình 3.5 Hình thái tế bào chủng vi tảo .27 Hình 3.6 Mật độ tế bào chủng tảo nhóm 1,2 28 Hình 3.7 Mật độ tế bào chủng vi tảo 3,4,5 29 Hình 3.8 Tốc độ tăng trưởng đặc hiệu cùa chủng vi tảo 29 Hình 3.9 Hàm lượng carotenoid thể tích chủng tảo (a) nhóm 1,2, (b) nhóm 3,4,5 30 Hình 3.10 Hàm lượng carotenoid tế bào chủng tảo (a) nhóm 1, (b) nhóm 2, (c) nhóm 3,4,5 31 Hình 3.11 Hàm lượng lipid the tích chùng tảo nhóm 1,2 32 Hình 3.12 Hàm lượng lipid the tích chủng tảo nhóm 3,4,5 33 Hình 3.13 Hàm lượng lipid tế bào chủng tảo (a) nhóm 1, (b) nhóm 33 Hình 3.14 Hình thái tế bào chủng vi tảo nhóm 1,2,3,4,5 35 Hình 3.15 Hình thái tế bào chủng vi tảo nhóm 36 Hình 3.16 Mật độ tế bào chủng vi tảo nhóm 1,2 37 V Hình 3.1 Mật độ tế bào chủng vi tảo nhóm 3,4,5,6 38 Hình 3.18 Tốc độ tăng trưởng đặc hiệu 18 chủng vi tảo 38 Hình 3.19 Hàm lượng carotenoid chủng vi tảo (a) nhóm 1,2, (b) nhóm 3,4,5,639 Hình 3.20 Hàm lượng carotenoid tế bào chủng vi tảo (a) nhóm 1,2, (b) nhóm 3,4,5,6 40 Hình 3.21 Hàm lượng lipid the tích chủng vi tảo (a) nhóm 1,2, (b) nhóm 3,4,5,6 41 Hình 3.22 Hàm lượng lipid tế bào chủng vi tảo nhóm 1,2 41 Hình 3.23 Hàm lượng lipid tế bào chủng vi tảo nhóm 3,4,5,6 42 Hình 3.24 Hình dạng tế bào chi Heamatococcus [67] 46 Hình 3.25 Hình dạng tế bào (A) sinh sản (B),(C) chi Chlorella [67] 47 Hình 3.26 Hình dạng tế bào (A), sinh sản (B-I) chi Scenedesmus [67] 47 Hình 3.27 Hình dạng tế bào chi Clostenium [67] .48 VI ... Do đa dạng sinh học tảo, đặc biệt tảo lục phong phú Khả chọn lọc phân lập chủng tảo có hoạt tính sinh học lớn Trên sở đó, đề tài ? ?Chọn lọc ni cấy chủng tảo nước có hoạt tính sinh học” thực nhằm... học 2014 - 2019 CHỌN LỌC VÀ NUÔI CẤY CÁC CHỦNG TẢO NƯỚC NGỌT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC Nguyễn Ngọc Hưng Hướng dần khoa học: TS Võ Hồng Trung TÓM TẤT Mở đầu: Các sản phẩm có giá trị sinh học cao từ...ffl BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TÁT THÀNH NGUYỄN NGỌC HUNG CHỌN LỌC VÀ NI CẤY CÁC CHỦNG TẢO NƯỚC NGỌT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC Chuyên ngành: Quản lý cung ứng