Xác định nấm gây bệnh trên cây Măng tây (Asparagus officinalis L.) tỉnh Ninh Thuận.pdf

NTTU-NCKH-04 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ NĂM 2019-2020 Tên đề tài: Xác định nấm gây bệnh măng tây (Asparagus officinalis L.) tỉnh Ninh Thuận Số hợp đồng: 2020.01.56 Chủ nhiệm đề tài: KS Hồ Thị Cẩm Nguyên Đơn vị công tác: Khoa Công nghệ Sinh học Thời gian thực hiện: 09/2020 – 03/2021 TP Hồ Chí Minh, ngày 09 tháng 04 năm 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ NĂM 2019-2020 Tên đề tài: Xác định nấm gây bệnh măng tây (Asparagus officinalis L.) tỉnh Ninh Thuận Số hợp đồng: 2020.01.56 Chủ nhiệm đề tài: KS Hồ Thị Cẩm Nguyên Đơn vị công tác: Khoa Công nghệ Sinh học Thời gian thực hiện: 09/2020 – 03/2021 Các thành viên phối hợp cộng tác: STT Họ tên Nguyễn Thị Nhã Chuyên ngành CNSH Cơ quan công tác Khoa CNSH Phạm Thị Hồng Gấm CNSH Sinh viên Khoa CNSH Nguyễn Thị Thu Thảo CNSH Sinh viên Khoa CNSH Lương Trần Bảo Quỳnh CNSH Sinh viên Khoa CNSH Ký tên MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.1 Đặc điểm hình thái 1.1.2 Giá trị dinh dưỡng dược liệu 1.1.3 Tình hình sản xuất măng tây Việt Nam 1.2 Bệnh nấm hại măng tây 1.2.1 Bệnh thối gốc măng tây 1.2.2 Bệnh đốm tím măng tây 1.2.3 Bệnh khô thân cành măng tây 1.2.4 Một số bệnh nấm khác măng tây 1.3 Các phương pháp xác định vi nấm gây bệnh trồng 1.3.1 Xác định dựa vào đặc điểm hình thái [7] 1.3.2 Định danh phương pháp sinh học phân tử 1.4 Tình hình nghiên cứu bệnh hại măng tây ngồi nước 10 1.4.1 Nghiên cứu nước 10 1.4.2 Nghiên cứu nước 12 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 14 2.2 Nội dung nghiên cứu 14 2.3 Phương pháp nghiên cứu 14 2.3.1 Mẫu thí nghiệm 14 2.3.2 Phương pháp điều tra, khảo sát số bệnh hại măng tây 14 2.3.3 Phương pháp phân lập làm tác nhân gây bệnh 15 2.3.4 Phương pháp nhận diện tác nhân gây bệnh dựa vào đặc điểm hình thái 16 2.3.5 Phương pháp lây nhiễm nhân tạo 16 2.3.6 Phương pháp sinh học phân tử định danh tác nhân gây bệnh 17 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 3.1 Kết điều tra, khảo sát số bệnh hại măng tây ninh Thuận 18 3.2 Bệnh thối gốc măng tây 20 3.2.1 Kết phân lập làm nấm gây bệnh thối gốc 20 3.2.2 Kết nhận diện tác nhân gây bệnh thối gốc dựa vào đặc điểm hình thái 21 3.2.3 Kết thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo bệnh thối gốc măng tây 22 3.2.4 Kết định danh tác nhân gây bệnh thối gốc măng tây 22 3.3 Bệnh đốm tím măng tây 26 3.3.1 Kết phân lập làm nấm gây bệnh đốm tím 26 3.3.2 Kết nhận diện tác nhân gây bệnh đốm tím dựa vào đặc điểm hình thái 26 3.3.3 Kết thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo bệnh đốm tím măng tây 27 3.3.4 Kết định danh tác nhân gây bệnh đốm tím măng tây 29 3.4 Bệnh khô thân cành măng tây 34 3.4.1 Kết phân lập làm nấm gây bệnh khô thân cành 34 3.4.2 Kết nhận diện tác nhân gây bệnh khô thân cành dựa vào đặc điểm hình thái 34 3.4.3 Kết thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo bệnh khô thân cành măng tây 35 3.4.4 Kết định danh tác nhân gây bệnh khô thân cành măng tây 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT AFLP : Amplified fragment length polymorphism BLAST : Basic Local Alignment Search Toolt DNA : Deoxyribonucleic Acid IGS ITS LSD : Intergenic spacer : Internal transcribed spacer : Leasst Significant Difference PCR PGA : Polymerase chain reaction : Potato glucose agar RNA WA : Ribonucleic Acid : Water agar DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cây măng tây Ninh Thuận Hình 1.2 Vùng gen mã hóa rRNA vi nấm Hình 3.1 Các bệnh hại măng tây huyện Ninh Phước Hình 3.2 Hình thái khuẩn lạc nấm phân lập từ mẫu bệnh thối gốc măng tây thạch Hình 3.3 Bào tử nấm từ mẫu bệnh thối gốc măng tây kính hiển vi Hình 3.4 Kết lây nhiễm nhân tạo bệnh thối gốc măng tây Hình 3.5 Sản phẩm PCR khuếch đại gen mã hóa 18S rRNA gel agarose 1% Hình 3.6 Kết BLAST so sánh trình tự nhóm SR1 với liệu genbank Hình 3.7 Kết BLAST so sánh trình tự nhóm SR2 với liệu genbank Hình 3.8 Cây phát sinh lồi nấm gây bệnh thối gốc măng tây Hình 3.9 Kết phân lập làm nấm gây bệnh đốm tím mơi trường PGA Hình 3.10 Hình thái sợi nấm bào tử nấm gây bệnh đốm tím kính hiển vi Hình 3.11 Kết lây nhiễm nhân tạo bệnh đốm tím măng tây Hình 3.12 Nấm gây bệnh đốm tím tái phân lập từ thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo Hình 3.13 Sản phẩm PCR khuếch đại gen mã hóa 18S rRNA gel agarose 1% Hình 3.14 Kết BLAST so sánh trình tự nhóm PS1 với liệu genbank Hình 3.15 Kết BLAST so sánh trình tự nhóm PS2 với liệu genbank Hình 3.16 Cây phát sinh lồi nhóm nấm gây bệnh đốm tím măng tây Hình 3.17 Cây phát sinh lồi nhóm nấm gây bệnh đốm tím măng tây Hình 3.18 Kết phân lập làm nấm gây bệnh khô thân cành môi trường PGA Hình 3.19 Hình thái sợi nấm bào tử nấm gây bệnh khơ thân cành kính hiển vi Hình 3.20 Kết lây nhiễm nhân tạo bệnh khơ thân cành măng tây Hình 3.21 Hình thái khuẩn lạc, hệ sợi bào tử mẫu nấm bệnh khô thân cành tái phân lập Hình 3.22 Sản phẩm PCR khuếch đại gen mã hóa 18S rRNA gel agarose 1% nấm gây bệnh khơ thân cành Hình 3.23 Kết BLAST so sánh trình tự nấm gây bệnh khơ thân cành với liệu genbank Hình 3.24 Cây phát sinh lồi nấm gây bệnh khơ thân cành măng tây DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 3.1 Mức độ phổ biến bệnh hại măng tây huyện Ninh Phước Bảng 3.2 Tỷ lệ bệnh số bệnh bệnh hại măng tây Danh sách chủng tham chiếu với tác nhân gây bệnh thối gốc Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Danh sách chủng tham chiếu với tác nhân gây bệnh đốm tím nhóm Danh sách chủng tham chiếu với tác nhân gây bệnh đốm tím nhóm Danh sách chủng tham chiếu với tác nhân gây bệnh khơ thân cành TĨM TẮT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU STT Công việc thực Kết đạt Nôi dung 1: Điều tra, khảo sát mức Xác định loại bệnh hại măng độ phổ biến mức độ gây hại tây diện vùng trồng măng tây số bệnh hại măng huyện Ninh Phước, tỉnh Ninh Thuận tây Asparagus officinalis L Ninh Thuận Nội dung 2: Xác định tác nhân gây Xác định tác nhân gây bệnh tương số bệnh phổ biến măng ứng với bệnh thối gốc, đốm tím khơ thân cành măng tây Ninh Thuận tây Nội dung 3: Định danh phân tử tác Định danh tác nhân gây bệnh nhân gây bệnh măng măng tây: bệnh thối gốc F tây Ninh Thuận equiseti F proliferatum; bệnh đốm nâu Alternaria alternaria Curvularia sp.; bệnh khô thân cành Fusarium equiseti STT Sản phẩm đăng ký Sản phẩm đạt 01 báo đăng có giấy xác nhận gửi đăng Tạp chí chuyên ngành nước 01 báo: Hồ Thị Cẩm Nguyên, Nguyễn Thị Nhã, “Nghiên cứu tác nhân gây bệnh thối gốc măng tây (Asparagus officinalis L.) tỉnh Ninh Thuận”, Tạp chí KH&CN – Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Đào tạo: 02 SV thực 03 SV hoàn thành KLTN đại học, chuyên ngành KLTN tốt nghiệp bậc đại CNSH: học, chuyên ngành CNSH Phạm Thị Hồng Gấm: “Identification of the pathogen of root and stem rot disease among Asparagus (Asparagus officinalis L.) cultivated in Ninh Thuan” Nguyễn Thị Thu Thảo: “Xác định tác nhân gây bệnh đốm nâu măng tây (Asparagus officinalis L.) trồng Ninh Thuận” Lương Trần Bảo Quỳnh: “Xác định tác nhân gây bệnh khô thân cành măng tây (Asparagus officinalis L.) trồng Ninh Thuận” Thời gian thực hiện: Từ tháng 06/2020 đến tháng 03/2021 Thời gian nộp báo cáo: Ngày 15/04/2021 ... Xác định loại bệnh hại măng độ phổ biến mức độ gây hại tây diện vùng trồng măng tây số bệnh hại măng huyện Ninh Phước, tỉnh Ninh Thuận tây Asparagus officinalis L Ninh Thuận Nội dung 2: Xác định. .. nhân gây Xác định tác nhân gây bệnh tương số bệnh phổ biến măng ứng với bệnh thối gốc, đốm tím khơ thân cành măng tây Ninh Thuận tây Nội dung 3: Định danh phân tử tác Định danh tác nhân gây bệnh. .. hình sản xuất măng tây Việt Nam 1.2 Bệnh nấm hại măng tây 1.2.1 Bệnh thối gốc măng tây 1.2.2 Bệnh đốm tím măng tây 1.2.3 Bệnh khô thân cành măng tây