Đánh giá độc tính cấp của abif thuốc ngũ vị tiêu khát thang. Danh s¸ch ký nhËn lµm thªm ngoµi giê vietnam medical journal n02 OCTOBER 2022 112 228 doi 10 1055/s 0039 3401822 4 Hankil Lee Cost utility analysis of emicizumab prophylaxis in haemophilia A patients[.]
vietnam medical journal n02 - OCTOBER - 2022 228 doi:10.1055/s-0039-3401822 the prevention of bleeding episodes in haemophilia Hankil Lee Cost-utility analysis of emicizumab A patients with anti-FVIII inhibitors in France prophylaxis in haemophilia A patients with factor Haemophilia 2021;27(1):e1-e11 VIII inhibitors in Korea Haemophilia 2020:1-10 doi:10.1111/hae.14129 doi:10.1111/hae.14143 Reviews CCD Pharmacoeconomic Report: Oldenburg J, Mahlangu JN, Bujan W, et al Emicizumab (Hemlibra): Hoffman-La Roche Ltd: The effect of emicizumab prophylaxis on healthIndication: Bleeding prevention, Hemophilia A related outcomes in persons with haemophilia A Ottawa (ON) Canadian Agency for Drugs and with inhibitors: HAVEN Study Haemophilia Technologies in Health 2019 2018;25(1):33-44 doi:10.1111/hae.13618 Zhou ZY RK, Patel AM, Han S, Ji Y, Fang H, et Patel AM CS, Chaplin S, Raimundo K, Sidonio al Model of Short- and Long-Term Outcomes of RF Economic impact model of delayed inhibitor Emicizumab Prophylaxis Treatment for Persons development in patients with hemophilia a with Hemophilia A Journal of managed care & receiving emicizumab for the prevention of specialty pharmacy 2020;26(9):1109-1120 bleeding events Journal of medical economics 10 Scott LJ, Kim ES Emicizumab–kxwh: First Global 2019;22(12):1328-1337 Approval Drugs 2018;78(2):269–274 Polack B, Trossaert M, Cousin M, et al Costdoi:10.1007/s40265–018–0861–2 effectiveness of emicizumab vs bypassing agents in ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP CỦA BÀI THUỐC NGŨ VỊ TIÊU KHÁT THANG TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM Sầm Huyền Sanh1, Lê Ngọc Diễm2, Nguyễn Ngọc Chi Lan2, Nguyễn Hồng Ngân3, Lê Minh Hồng2 TĨM TẮT 26 ANIMAL MODEL Đặt vấn đề: Ngũ vị tiêu khát thang (NVTK) thuốc gia truyền lương y Trần Văn Thoại – An Giang đánh giá có tác dụng hạ đường huyết tốt, nhiên chưa có nghiên cứu thực nghiệm để đánh giá tính an tồn thuốc Mục tiêu nghiên cứu: Đánh giá độc tính cấp thuốc Ngũ vị tiêu khát thang động vật thực nghiệm Phương pháp nghiên cứu: Xác định độc tính cấp thuốc phương pháp Litchfield – Wilcoxon chuột nhắt trắng dịng Swiss Các dấu hiệu nhiễm độc tính cấp chuột chuột chết theo dõi 72 sau uống cao chiết Ngũ vị tiêu khát thang Kết quả: cho chuột uống liều 125g/kg, 175g/kg, 225g/kg, 275g/kg, 325g/kg liều tối đa 375g/kg thể trọng (gấp 26,573 lần liều tương đương liều điều trị quy đổi từ liều người sang liều chuột nhắt trắng) không xác định LD50 thuốc Kết luận: cao lỏng từ thuốc Ngũ vị tiêu khát thang khơng gây độc tính cấp cho chuột nhắt trắng Từ khố: Độc tính cấp, Ngũ vị tiêu khát, Y học cổ truyền, chuột nhắt Background: Ngu Vi Tieu Khat (NVTK) is a traditional medicine formula from Dr Tran Van Thoai An Giang province regarded as an effective remedy for hyperglycemia, however, there are no experimental studies to verify the safety of this remedy Objectives: To independently investigate the acute toxicity of the remedy NVTK on experimental animals Materials and methods: determine the acute toxicity of the remedy by the Litchfield - Wilcoxon method on Swiss white mice Signs of acute intoxication or fatality were monitored for 72 h after the ingestion of NVTK liquid extract Results: administration to the mice the doses of 125g/kg, 175g/kg, 225g/kg, 275g/kg, 325g/kg and the maximal dose of 375g/kg body weight (26,573 times the therapeutic dose calculated by the corresponding dose on a human subject) the LD50 of the remedy was not determined Conclusions: The liquid extract from the remedy of NVTK has no acute toxicity to white mice Keywords: Acute toxicity, NVTK, Traditional medicine, mice SUMMARY I ĐẶT VẤN ĐỀ ACUTE TOXICITY TESTING OF HERBAL REMEDY “NGU VI TIEU KHAT THANG” IN 1Bệnh viện Y Dược cổ truyền Kiên Giang Đại học Y dược Cần Thơ 3Học viện Quân Y 2Trường Chịu trách nhiệm chính: Lê Minh Hồng Email: lmhoang@ctump.edu.vn Ngày nhận bài: 26.8.2022 Ngày phản biện khoa học: 26.9.2022 Ngày duyệt bài: 7.10.2022 112 Bệnh đái tháo đường bệnh rối loạn chuyển hóa khơng đồng nhất, tăng đường huyết thời gian dài gây tổn thương nhiều quan khác nhau, đặc biệt tim mạch máu, thận, mắt, thần kinh [1] Tỷ lệ mắc bệnh đái tháo đường toàn cầu lứa tuổi 20–79 vào năm 2021 ước tính 10,5% (536,6 triệu người), tăng lên 12,2% (783,2 triệu người) vào năm 2045 Tỷ lệ mắc bệnh đái tháo TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 519 - THÁNG 10 - SỐ - 2022 đường nam nữ cao nhóm 75–79 tuổi [5] Y học địa Việt Nam có nhiều thuốc vị thuốc gia truyền có tác dụng hạ đường huyết tốt Tuy nhiên theo hướng dẫn Tổ chức Y tế giới, ngoại trừ thuốc cổ phương chiết xuất theo phương pháp truyền thống, tất thuốc có nguồn gốc từ dược liệu phải đánh giá độc tính cấp bán trường diễn động vật thực nghiệm trước đưa vào thử nghiệm người Bài thuốc “Ngũ vị tiêu khát thang” thuốc gia truyền gia đình lương y Trần Văn Thoại (An Giang) áp dụng điều trị cho bệnh nhân đái tháo đường típ mức độ nhẹ số sở y tế An Giang sở y tế từ thiện thuộc Hội Đông y tỉnh Kiên Giang Theo nhận xét bước đầu thuốc có tác dụng hạ đường huyết, tác dụng khơng mong muốn Tuy nhiên, chưa nghiên cứu cách tồn diện, khoa học để khẳng định tính an tồn thuốc Vì vậy, nhóm nghiên cứu thực đề đề tài “Đánh giá cống trắng (hệ số quy đổi 6,47) 1,2 x 6,47 = 7,764 g/kg/ngày [1] Thuốc nghiên cứu (cao lỏng ngũ vị tiêu khát, viết tắt NVTK) cho chuột uống qua kim cong đầu tù chuyên dụng, với độ dài đưa vào đến dày chuột Các dược liệu thô thuốc bào chế thành dịch chiết dạng cao lỏng theo quy trình sau: tính an tồn thuốc Ngũ vị tiêu khát thang thực nghiệm” với mục tiêu nghiên cứu đánh giá độc tính cấp thuốc “Ngũ vị tiêu khát thang” thực nghiệm II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu Là thuốc “Ngũ vị tiêu khát” thuốc kinh nghiệm gia truyền gia đình Lương y Trần Văn Thoại, An Giang Công thức thuốc: Bộ phận Liều dùng dùng Dây thìa canh Cành 10g Huyền sâm Rễ củ 15g Tầm bóp Tồn 20g Cây mật gấu Toàn bỏ rễ 10g Núc nác Vỏ thân 5g Tác dụng thuốc theo YHCT: Thanh nhiệt, tả hoả, tư âm, khát Theo đề xuất Lương y Trần Văn Thoại, tổng số dược liệu thô dùng 60g/người/ngày dạng thuốc sắc, cao lỏng Liều dùng nghiên cứu tính theo gram dược liệu khô Tổng thuốc 60g, dùng cho người ngày thang Với cân nặng thể tham chiếu để tính liều người 50 kg [1], liều dùng người 1,2 mg/kg/ngày Quy đổi liều dự kiến có tác dụng chuột nhắt trắng (hệ số quy đổi 11,76) 1,2 x 11,76 = 14,112 g/kg/ngày Liều dự kiến có tác dụng chuột Vị thuốc Hình Sơ đồ quy trình bào chế thành dạng cao lỏng 5:1 2.1.2 Động vật dùng nghiên cứu Chuột nhắt trắng dòng Swiss giống, trọng lượng 20 ± g, Động vật Ban động vật - Học viện Quân y cung cấp, ni dưỡng điều kiện phịng thí nghiệm tuần trước làm thí nghiệm, ăn thức ăn theo tiêu chuẩn thức ăn cho động vật nghiên cứu (do ban chăn nuôi Học viện Quân y cung cấp), nước (đun sơi để nguội) uống tự Hình Chuột nhắt trắng chủng Swiss (nguồn: nhóm nghiên cứu) 2.2 Phương pháp nghiên cứu Chuột nhắt trắng chủng Swiss, hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 18-22g, nuôi phịng ni động vật thực nghiệm Bộ mơn 113 vietnam medical journal n02 - OCTOBER - 2022 Dược lý – Học viện Quân y ngày trước tiến hành nghiên cứu Xác định độc tính cấp LD50 thuốc thử chuột nhắt trắng đường uống theo phương pháp Litchfield - Wilcoxon theo hướng dẫn Bộ y tế hướng dẫn WHO [2], [6] Chuột nhịn ăn 12 trước uống thuốc, uống nước đầy đủ Từng lô chuột nhắt trắng, lơ 10 con, uống mẫu thuốc nghiên cứu theo liều tăng dần Theo dõi số chuột chết 72 đầu tình trạng chung chuột ngày sau uống thuốc ăn uống, hoạt động thần kinh, lại, leo trèo, tiết, Nếu chuột chết, mổ chuột để đánh giá đại thể tổn thương quan, cần thiết làm xét nghiệm vi thể số phủ tạng Tìm liều cao khơng gây chết chuột (0 %), liều thấp gây chết chuột hoàn toàn (100 %) liều trung gian Từ xây dựng đồ thị tuyến tính để xác định LD50 thuốc thử Xử lý số liệu: Các số liệu phân tích xử lý theo phương pháp thống kê y sinh học máy vi tính phần mềm SPSS 20.0 Các thuật toán sử dụng: + Tính trung bình: (X), độ lệch chuẩn (SD) + Tính tỷ lệ phần trăm (%) + So sánh số trung bình lơ nghiên cứu thời điểm với phương pháp so sánh cặp + So sánh số trung bình nhóm với thời điểm thuật toán StudentT-test tỷ lệ theo thuật toán χ2 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Độc tính cấp đường uống mẫu nghiên cứu chuột nhắt trắng Bảng Độc tính cấp đường uống mẫu nghiên cứu chuột nhắt trắng Lô chuột Lô Lô Lô Lô Lô Lô Số chuột 10 10 10 10 10 10 Liều dùng (g/kg thể trọng) 125,0 175,0 225,0 275,0 325,0 375,0 Số chuột sống/chết sau 72 sau ngày 10/0 10/0 10/0 10/0 10/0 10/0 Chuột nhắt trắng uống thuốc thử với mức liều khác từ liều thấp 125,0g/kg thể trọng đến liều cao 375,0g/kg thể trọng, 0,25mL/10g/lần x 3lần/ngày Chuột uống đến liều 375,0g/kg thể trọng liều tối đa dùng đường uống để đánh giá độc tính cấp thuốc thử khơng có chuột chết, khơng xuất triệu chứng bất thường 72 sau uống thuốc lần cuối suốt ngày sau uống thuốc IV BÀN LUẬN Độc tính cấp tính đề cập đến tác động bất lợi nghiêm trọng sức khỏe (tức gây tử vong) xảy sau tiếp xúc với miệng, da hít phải chất hỗn hợp thời gian ngắn ngắn hạn với chất hỗn hợp [7] Thử độc tính cấp nhằm cung cấp thông tin cho việc xếp loại mức độ độc thuốc, dự đoán triệu chứng dự kiến biện pháp điều trị ngộ độc cấp, đồng thời làm để thiết lập mức liều cho nghiên cứu (nghiên cứu độc tính dài hạn, nghiên cứu tác dụng dược lý) Các số cần xác định phép thử độc tính cấp bao gồm: liều an toàn; liều dung nạp tối đa; 114 Biểu bất thường không không không không không không liều gây độc tính quan sát được; liều thấp gây chết động vật thí nghiệm (nếu có); liều LD50 (liều gây chết 50% số động vật thực nghiệm) gần (nếu xác định được); triệu chứng ngộ độc điển hình quan sát động vật khả hồi phục (nếu có) [2] Lồi động vật thường sử dụng nghiên cứu độc tính cấp lồi gặm nhấm, chuột cống chuột nhắt [2] Theo tiến sĩ Rick Woychilk, giám đốc Phòng thí nghiệm Jackson Bar Harbour, Maine, phịng thí nghiệm nghiên cứu chuột hàng đầu giới, cho biết “chuột sinh vật mẫu hoàn hảo” để dùng làm thí nghiệm Các nhà nghiên cứu cho chuột có kích thước nhỏ vơ hại Đây lồi dễ ni, khơng cần nhiều khơng gian sống, chịu sống lồng đồng thời có tốc độ sinh sản nhanh nên dễ nhân giống hàng loạt với giá rẻ Ngoài ra, tuổi thọ chuột ngắn, thường vài năm tuổi Do nhà khoa học dễ dàng nghiên cứu tác dụng thuốc/phương pháp chữa bệnh với hệ khác loài chuột Và điều quan trọng người chuột có hệ gene giống TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 519 - THÁNG 10 - SỐ - 2022 đến 90%, động vật có vú [4] Theo định nghĩa Hệ thống hịa hợp tồn cầu (Globally Harmonised System - GHS), độc tính cấp tác dụng khơng mong muốn xảy sau dùng chất vòng 24 Động vật (thường dùng chuột) dùng thuốc 24 quan sát tuần để xác định triệu chứng độc (nếu có) Chuột nghiên cứu lựa chọn bao gồm chuột đực chuột cái, kết nghiên cứu bao hàm cho giống Đường đưa thuốc sử dụng đường uống, theo đường dự kiến sử dụng người Kết nghiên cứu không xác định LD50 dịch chiết thuốc theo đường uống chuột nhắt trắng Khơng có chuột chết 72 sau uống thuốc suốt bảy ngày sau uống thuốc dù cho chuột uống đến liều 375,0g/Kg thể trọng liều tối đa dùng đường uống để đánh giá độc tính cấp mẫu thử Do khơng có chuột chết nên khơng xác định LD50 NVTK chuột, kết luận liều dung nạp tối đa chuột nhắt 375,0 g/Kg thể trọng Q trình nghiên cứu có vài biểu quan sát chuột, nhiên khơng phải biểu độc tính mẫu thử Trong ngày đầu chuột phân mềm, ăn uống giảm Đây biểu thông thường chuột sau uống cưỡng lượng lớn thuốc nghiên cứu vào dày Nếu mẫu thử gây lỏng, với lượng thuốc lớn đưa vào dày chuột thường chuột phân nát, lỏng nước, biểu kéo dài kèm theo triệu chứng nước điện giải chuột, nặng làm chuột chết Nếu mẫu thử gây táo bón, với lượng lớn thuốc dễ gây tắc ruột, chướng bụng Mẫu thử không gây biểu đáng kể, phân mềm hơn, dày bơm căng thuốc nên ảnh hưởng đến hành vi ăn uống ngày đầu Quan sát đánh giá ảnh hưởng lên đường tiêu hóa chuột cho uống thuốc thử lượng nhiều vào dày đánh giá xác vào ngày thứ hai trở Kết nghiên cứu cho thấy từ ngày thứ hai trở chất thải ăn uống chuột tất lơ trở lại bình thường, cho thấy dịch chiết thuốc không gây biểu bất thường chất thải ăn uống chuột Với liều dùng quy đổi sang chuột nhắt 14,112g/Kg/ngày, liều 375g/Kg gấp 21,2585 lần liều 180g/Kg gấp 25,5102 lần Như vậy, chuột cho uống đến mức liều gấp 26,573 lần liều điều trị khơng có biểu bất thường hay khơng có biểu độc tính cấp Kết chứng tỏ mẫu thử (NVTK) có tính an tồn nghiên cứu đánh giá độc tính cấp đường uống chuột nhắt trắng Như theo hướng dẫn WHO hướng dẫn nghiên cứu thuốc Cục Khoa học công nghệ đào tạo – Bộ y tế, sử dụng thuốc Ngũ vị tiêu khát thang với liều lâm sàng an toàn Kết phù hợp ghi chép y văn thực hành lâm sàng vị thuốc thường xuyên kê phối ngũ với theo biện chứng luận trị để điều trị mà chưa có báo cáo có tác dụng phụ gây cho người bệnh [3] V KẾT LUẬN Chưa tìm thấy LD50 cao lỏng từ dịch chiết thuốc Ngũ vị tiêu khát theo đường uống chuột nhắt trắng Với mức liều 375g/kg thể trọng (gấp 26,573 lần liều tương đương liều điều trị quy đổi từ liều người sang liều chuột nhắt trắng), khơng gây chết chuột nào, khơng có biểu độc tính cấp TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (2017), Hướng dẫn chẩn đoán điều trị đái tháo đường típ 2, Quyết định số 3319/QĐ-BYT ngày 19 tháng năm 2017, Bộ Y tế, Hà Nội Cục Khoa học công nghệ đào tạo (2015), Hướng dẫn thử nghiệm tiền lâm sàng lâm sàng thuốc đông y, thuốc từ dược liệu, Ban hành kèm theo Quyết định số 141/QĐ-K2ĐT ngày 27 tháng 10 năm 2015 Cục trưởng Cục Khoa học Công nghệ Đào tạo, Bộ Y tế Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Vol 12, Nhà xuất vản y học, Hà Nội Clarke Tom (2002), Mice make medical history, London: Nature Hong Sun, Pouya Saeedi, Suvi Karuranga, Moritz Pinkepank cộng (2022), IDF Diabetes Atlas: Global, regional and country-level diabetes prevalence estimates for 2021 and projections for 2045, Diabetes Research and Clinical Practice 183, p 109-119 OECD/OCDE (2018), "OECD guideline for the testing of chemicals." The Hershberger 601, p 858 UNECE (United Nations Economic Commission for Europe) (2019), Globally Harmonized System for the Classification and Labeling of Chemicals (GHS) Part Health Hazards Geneva: United Nations, pp 117 World Health Organization (2000), General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of Traditional Medicine, WHO/EDM/ TRM/2000.1, Geneva 115 ... dạng cao lỏng theo quy trình sau: tính an tồn thuốc Ngũ vị tiêu khát thang thực nghiệm” với mục tiêu nghiên cứu đánh giá độc tính cấp thuốc ? ?Ngũ vị tiêu khát thang? ?? thực nghiệm II ĐỐI TƯỢNG VÀ... thuốc có nguồn gốc từ dược liệu phải đánh giá độc tính cấp bán trường diễn động vật thực nghiệm trước đưa vào thử nghiệm người Bài thuốc ? ?Ngũ vị tiêu khát thang? ?? thuốc gia truyền gia đình lương y... đường uống để đánh giá độc tính cấp thuốc thử khơng có chuột chết, khơng xuất triệu chứng bất thường 72 sau uống thuốc lần cuối suốt ngày sau uống thuốc IV BÀN LUẬN Độc tính cấp tính đề cập đến