VAÄN DUÏNG TÖ TÖÔÛNG HOÀ CHÍ MINH VEÀ COÂNG TAÙC SÖÛ DUÏNG CAÙN BOÄ, COÂNG CHÖÙC TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trần Thị Minh và các tgk 63 KHẢ NĂNG BẢO VỆ GAN CỦA NẤM LINH CHI ĐỎ (GANODERMA LUCIDU[.]
TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trần Thị Minh tgk KHẢ NĂNG BẢO VỆ GAN CỦA NẤM LINH CHI ĐỎ (GANODERMA LUCIDUM) THE POTENTIAL OF PROTECTING LIVER IN GANODERMA LUCIDUM TRẦN THỊ MINH, NGUYỄN PHẠM QUỲNH GIAO, HUỲNH MINH HIỀN(**), KHƯU YẾN PHƯƠNG TỬ(**) CHUNG QUỐC ĐẠT TÓM TẮT: Theo Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) cho thấy rượu tác nhân gây ngộ độc, suy yếu chức gan có nguy dẫn đến xơ gan, ung thư gan cao Tại Việt Nam, xơ gan rượu ngày nhiều chiếm khoảng 20% số bệnh nhân xơ gan Hiện có nhiều sản phẩm nghiên cứu có chức hỗ trợ, điều trị, bảo vệ gan giải độc rượu, có nấm linh chi đỏ nhờ có chứa hoạt chất có tác dụng dược lý Ganodosterone, Lanisterol, beta-D Glucan, Lucidenol Trong viết này, dựa vào kết xét nghiệm số sinh hóa máu AST, ALT, GGT, xác định ảnh hưởng ethanol rượu đến cấu trúc chức gan lớn Đồng thời khảo sát khả bảo vệ gan nấm linh chi đỏ (Gonoderma Lucidum) trước tác động rượu cho hiệu cao Từ khóa: gan; số sinh hóa máu; nấm linh chi đỏ ABSTRACT: According to The World Health Organization (WHO), alcohol is one of the causes of poisoning, impaired liver function and leading the high level of risk of cirrhosis, liver cancer In Vietnam, alcohol-related cirrhosis is increasing and accounts for about 20% of patients with cirrhosis Currently, there are many studied products which can support, treat, protect the liver and detoxify alcohol, including Ganoderma Lucidum thanks to the active ingredients of pharmacological effects such as Ganodosterone, Lanisterol, beta-D Glucan, Lucidenol In this article, based on the results of tests of blood biochemical indices AST, ALT, GGT, we determined that the influence of ethanol in alcohol on the structure of liver function is very large At the same time, the ability of Ganoderma lucidum (liveroderma lucidum) in protecting the liver from the impact of alcohol is highly effective Key words: liver; biochemical index of blood; Ganoderma Lucidum gan siêu vi B, siêu vi C, độc tố aflatoxin [6] rượu Tuy nhiên, rượu xem tác nhân gây tổn thương gan phổ biến chiếm tỷ lệ cao Theo nghiên cứu Catherine Frakes Vozzo cộng cho thấy, bệnh gan rượu gồm loại gan nhiễm mỡ, viêm gan rượu xơ gan Bệnh gan nhiễm mỡ xảy sau uống rượu cấp tính thường ĐẶT VẤN ĐỀ Gan quan quan trọng người động vật có xương sống Cơ quan đóng vai trị q trình chuyển hóa thể, đồng thời có chức khác dự trữ glycogen, tổng hợp protein huyết tương thải độc [3, tr.15-18] Có nhiều nguyên nhân xác định làm suy yếu chức ThS Trường Đại học Văn Lang, tranthiminh@vanlanguni.edu.vn, Mã số: TCKH21-11-2020 SV Trường Đại học Văn Lang CN Công ty TNHH Vina Lichi, datchungquoc@gmail.com 63 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Số 21, Tháng - 2020 hồi phục kiêng Viêm gan rượu dạng cấp tính chấn thương gan rượu xảy tiêu thụ lượng lớn rượu thời gian dài Xơ gan liên quan đến việc thay nhu mô gan bình thường dải mơ dày nốt tái tạo dày, dẫn đến biểu lâm sàng tăng huyết áp suy gan [5] Ở Việt Nam có nhiều nghiên cứu cho thấy mức độ tổn thương gan rượu dựa vào kết xét nghiệm sinh hóa máu với số Aspartate aminotransferase (AST), Alanine aminotransferase (ALT) Gamma-glutamyl transpeptidase (GGT) Các aminotransferase điểm nhạy đánh giá tổn thương tế bào gan bao gồm AST (GPT) ALT (GOT) AST tìm thấy gan, tim, xương, thận, não, tụy, phổi, bạch cầu, hồng cầu với hoạt tính theo thứ tự giảm dần ALT chủ yếu tìm thấy gan Mức độ GGT cao cho thấy nguyên nhân gây tổn hại gan thường có hàm lượng cao ngộ độc rượu [4] Năm 1999, Min Zhu cộng thực nghiên cứu chất chống oxy hóa có nấm linh chi Kết cho thấy hiệu việc bổ sung chiết xuất nấm linh chi (nồng độ 80–400 mg/mL) giúp ngăn chặn màng hồng cầu bị tổn thương anion superoxide đến 96% [7, tr.529-531] Năm 2006, Wen-Chuan Lin Wei-Lii Lin thực nghiên cứu tác dụng cải thiện nấm linh chi bệnh xơ gan carbon tetrachloride (CCL4) chuột Kết cho thấy nấm linh chi có hiệu việc giảm tổn thương gan mạn tính, thơng qua tác dụng bảo vệ chống lại hoại tử tế bào gan nhờ khả nhặt gốc tự [8, tr.494-499] Năm 2013, nghiên cứu tác dụng tăng cường miễn dịch, chống oxy hóa khả phân bào thực nghiệm nấm linh chi đỏ linh chi vàng Kết nghiên cứu cho thấy, nấm linh chi đỏ trồng Việt Nam có hàm lượng acid ganoderic A cao gấp 4,6 lần so với nấm linh chi đỏ Nhật Bản, hàm lượng acid ganoderic A cao chiết cồn cao gấp 1,6 lần so với cao chiết nước [1] Nấm linh chi có vị nhạt, tính ấm, có tác dụng tư bổ cường tráng, bổ can chí, an thần, tăng trí nhớ Trong nấm linh chi có germanium giúp tế bào hấp thụ oxy tốt hơn; polysaccharit làm tăng miễn dịch thể, mạnh gan, diệt tế bào ung thư; acid ganodermic chống dị ứng, chống viêm [2] Trên thị trường có nhiều sản phẩm nghiên cứu có chức hỗ trợ, điều trị, bảo vệ giải độc rượu, có nấm linh chi Nấm linh chi đỏ có tác dụng chống oxy hóa, thải trừ gốc tự do, ức chế q trình peroxy hóa màng tế bào Nhiều cơng trình nghiên cứu giới xác định hoạt chất tác dụng dược lý nấm linh chi Ganodosterone, Lanisterol, beta-D Glucan, Lucidenol [1] Từ lý trên, tiến hành nghiên cứu nhằm đánh giá mức độ ảnh hưởng ethanol đến chức gan xét nghiệm sinh hóa máu tiêu AST, ALT, GGT Đồng thời xác định khả bảo vệ gan nấm linh chi dựa tiêu sinh hóa AST, ALT, GGT Bài viết nhằm cung cấp thông tin cho tất người khả bảo vệ gan nấm linh chi đỏ trước tác động ethanol đến người tiêu dùng có phương thức bảo vệ sức khỏe cho NỘI DUNG 2.1 Vật liệu phương pháp nghiên cứu Vật liệu nghiên cứu: Nấm linh chi đỏ (Ganoderma Lucidum) công ty TNHH VINA LICHI; Chuột nhắt trắng (Mus Musculus) tháng tuổi, trọng lượng 28 ± g/con, mua Viện kiểm nghiệm thuốc viện Pasteur Thành phố Hồ Chí Minh Phương pháp nghiên cứu: Nội dung nghiên cứu 1: Khảo sát khả gây độc ethanol đến chức gan chuột Gồm thí nghiệm (chuột uống rượu với liều lượng 0,5 ml/1 ngày ml/1 ngày), thí nghiệm có nghiệm thức (NT1: Nước, NT2: Rượu vang (nồng độ 13,5%), NT3: Rượu trắng 64 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trần Thị Minh tgk Tỷ lệ % chuột chết (nồng độ 39,5%)) nghiệm thức có số chuột n=5, thực 30 ngày Phương pháp đánh giá kết quả: 1) Xác định tỷ lệ chuột chết tác dụng ethanol; 2) Đánh giá cảm quan đặc điểm cấu trúc gan chuột sau thử nghiệm, tiến hành mổ quan sát cảm quan bề mặt, màu sắc, kích thước hình dáng gan chuột; 3) Đánh giá khả gây độc ethanol dựa số men gan máu xét nghiệm sinh hóa ALT, AST, GGT phòng khám Medlatec (Quyết định số: 320/QĐ-BYT ngày 23 tháng 01 năm 2014 Bộ trưởng Bộ Y tế) Nội dung nghiên cứu 2: Đánh giá khả bảo vệ gan nấm linh chi đỏ xét nghiệm sinh hóa ALT, AST, GGT đánh giá cấu trúc gan sau cho chuột sử dụng dịch chiết nấm linh chi đỏ Bước 1: Chiết xuất dịch nấm linh chi đỏ phương pháp sắc thuốc; Bước 2: Thử nghiệm khả bảo vệ gan dịch chiết nấm linh chi đỏ chuột uống ml rượu vang (nồng độ 13,5%) ngày, 30 ngày với nghiệm thức, nghiệm thức có số chuột n=5: NT1: ml rượu vang (nồng độ 13,5%) + ml nước (đối chứng); 90 80 70 60 50 40 30 20 10 TN1: Chuột uống 0,5ml rượu/ngày TN2: Chuột uống 1ml rượu/ngày NT2: ml rượu vang (nồng độ 13,5%) + ml gồm 50% dịch chiết nấm linh chi; NT3: ml rượu vang (nồng độ 13,5%) + ml 100% dịch nấm linh chi) Bước 3: Đánh giá kết quả, mổ đánh giá cảm quan đặc điểm cấu trúc gan chuột sau thử nghiệm bề mặt, màu sắc, kích thước hình dáng; Đánh giá khả bảo vệ gan dịch chiết nấm linh chi đỏ dựa số men gan máu xét nghiệm sinh hóa ALT, AST, GGT Mẫu máu tiến hành xét nghiệm số sinh hóa gan phịng khám Đa khoa Medlatec Sài Gòn Sau thu kết quả, tiến hành đối chiếu ngưỡng giá trị bình thường số men gan phòng khám Medlatec (Quyết định số: 320/QĐ-BYT ngày 23 tháng 01 năm 2014 Bộ trưởng Bộ Y tế) 2.2 Kết thảo luận 2.2.1 Mức độ ảnh hưởng ethanol đến chức gan chuột Sau 30 ngày thực nghiệm, tiến hành đánh giá mức độ ảnh hưởng ethanol đến chức gan chuột thu kết sau: Tỷ lệ chuột chết tác dụng ethanol: NT1 NT2 NT3 0 60 80 80 Hình Tỷ lệ chuột chết thí nghiệm Từ hình cho thấy, chuột không uống rượu NT1, tỷ lệ sống 100% Ở NT2, chuột uống rượu vang với nồng độ cồn 13,5% vol, tỷ lệ chuột chết (80%) cao vượt trội cho chuột uống với thể tích ml/ ngày so với chuột uống 0,5 ml/1 ngày Đối với NT3, chuột uống rượu trắng với nồng độ cồn 39,5% vol, tỷ lệ tử vong cao (60%) 65 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Số 21, Tháng - 2020 U/L uống 0,5 ml/ ngày Điều cho thấy mức độ ảnh hưởng ethanol rượu đến tỷ lệ sống sót chuột cao Kết xét nghiệm sinh hóa máu: Sau 30 ngày thử nghiệm, tiến hành xét nghiệm sinh 700 600 500 400 300 200 100 hóa máu số ALT, AST, GGT cho thấy mức độ ảnh hưởng ethanol rượu đến chức gan chuột sau: Kết thí nghiệm 1: AST NT1 38.45 NT2 478.9 NT3 660.8 ALT 25.08 217.7 493.2 GGT 17.71 74.3 203.4 Hình Biểu đồ kết xét nghiệm sinh hóa thí nghiệm U/L Hình cho thấy, NT1 số AST, ALT, GGT không vượt mức quy định, gan chuột bình thường Đối với NT2 NT3, số AST, ALT, GGT tăng cao so với NT1 Cụ thể, NT2 số AST 478,9 U/L tăng gấp 12 lần, số ALT 217,7 U/L tăng gấp lần, số GGT 74,3 U/L tăng gấp lần; NT3 số AST 660,8 U/L tăng gấp 17 lần, số ALT 493,2 U/L tăng gấp 20 lần, số GGT 203,4 U/L tăng gấp 11 lần Các số NT2, NT3 cao, tăng vượt mức 900 800 700 600 500 400 300 200 100 tham chiếu chứng tỏ chuột NT2 NT3 cho uống rượu với liều lượng 0,5 ml/ngày, 30 ngày chức gan bị ảnh hưởng số AST, ALT, GGT tăng cao Kết tương tự kết nghiên cứu cho chuột uống dung dịch ethanol 20% (g/ml) biểu tình trạng tăng số men gan Tất Chí Hùng Đỗ Thị Hồng Tươi (năm 2013) Điều chứng tỏ ethanol rượu ảnh hưởng đến chức gan [5] Kết thí nghiệm 2: NT1 AST 38.45 ALT 25.08 GGT 17.71 NT2 468.4 146.6 11.7 NT3 857.1 552.6 189.6 Hình Biểu đồ kết xét nghiệm sinh hóa thí nghiệm 66 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trần Thị Minh tgk Từ hình cho thấy, với thí nghiệm 2, NT1 uống nước có số AST, ALT, GGT khơng vượt mức quy định thí nghiệm 1, gan chuột bình thường Đối với NT2, số tăng cao nhiều lần so với NT1, cụ thể, số AST 302,1 U/L tăng gấp lần, số ALT 429,96 U/L tăng gấp lần, số GGT 126,78 U/L tăng gấp lần; NT3, số sinh hóa tăng cao NT2, số AST 468,4 U/L, ALT 552,6 U/L, GGT 189,6 U/L Điều chứng tỏ hai NT2 NT3 cho chuột uống rượu với liều lượng ml/ngày liên tục vòng 30 ngày gan bị tổn thương nghiêm trọng Đánh giá cảm quan đặc điểm cấu trúc mơ gan chuột Thí nghiệm NT1 NT3 NT2 Thí nghiệm NT1 NT2 NT3 Hình Hình ảnh cấu trúc mơ gan Hình cho thấy, NT1 thí nghiệm, 100% gan chuột không uống rượu nên thu gan có thùy gan kích thước bình thường, nhu mô gan đồng nhất, trơn láng, mềm mịn 80% gan chuột NT2 có màu sắc gan nhạt, màu vàng, nhu mô gan không đồng nhất, xuất vệt trắng bất thường 100% gan chuột NT3 có màu sắc nhạt, vàng hơn, xuất nhiều vệt trắng to hơn, nhu mô gan không đồng cho thấy nấm linh chi đỏ giúp cải thiện tác động rượu đến thể Tỷ lệ chuột chết (%) 100 80 60 40 20 2.2.2 Khả bảo vệ gan nấm linh chi đỏ NT1 Tỷ lệ chuột chết tác dụng ethanol có sử dụng dịch chiết nấm linh chi đỏ: Hình cho thấy, NT1 có tỷ lệ chuột chết cao chiếm 80%, chuột uống rượu uống nước Còn NT2 NT3 chuột uống rượu có kết hợp uống dịch chiết nấm linh chi đỏ tỷ lệ chuột chết giảm rõ rệt Điều sơ NT2 NT3 Hình Tỷ lệ chuột chết Khả bảo vệ gan dịch chiết nấm linh chi đỏ dựa kết xét nghiệm sinh hóa máu: Hình NT3 có uống dịch chiết nấm linh chi đỏ ml/1 ngày số AST, ALT giảm NT2 nhiều so với NT1 Ở NT1 khơng sử dụng dịch chiết nấm linh chi đỏ có 67 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Số 21, Tháng - 2020 số men gan cao gấp nhiều lần Đối với số GGT NT2 NT3 giảm tương đối thấp, so với số tham chiếu nằm mức bình thường Kết tương tự kết nghiên cứu mức độ ảnh hưởng thuốc sắc Zhihuang lên số men gan chuột Rui Zhu cộng năm 2009 Điều chứng tỏ, dịch chiết nấm linh chi đỏ có khả bảo vệ gan trước tác động ethanol cao b Gan chuột NT2 c Gan chuột NT3 Hình Kết đánh giá cảm quan cấu trúc gan chuột 800 Hình cho thấy gan chuột NT1 có màu sắc nhạt khơng cịn màu đỏ tươi, thùy gan có kích thước bình thường, bề mặt gan sần khơng nhẵn mịn Gan chuột NT2 có màu nhạt, bề mặt gan vết sần hơn, bề mặt gan khơng đồng Gan chuột NT3 có màu đỏ tươi, bề mặt gan trơn láng, mềm mịn, thùy gan có kích thước bình thường Điều cho thấy dung ml/ngày dịch chiết nấm linh chi đỏ giúp bảo vệ gan tốt hơn, cấu trúc mô gan không bị ảnh hưởng nhiều rượu KẾT LUẬN Tỷ lệ chết chuột xảy NT3 (60%) sử dụng rượu trắng nồng độ 39,5% vol với liều lượng 0,5 ml/1 ngày Tỷ lệ chết xảy cao cho chuột uống với liều lượng ml/ ngày 80% với rượu vang (13,5% vol) rượu trắng (39,5% vol); Cấu trúc mô gan thay đổi rõ rệt tác động rượu Chuột khơng uống rượu có cấu trúc mơ gan bình thường, mơ gan thơ sần chuột uống rượu vang, xuất đốm trắng thô bề mặt mô gan chuột uống rượu trắng Nhưng kết nghiên cứu chuột uống rượu uống dịch chiết nấm linh chi đỏ cho thấy chuột uống rượu có cấu trúc mơ gan thô sần trên, cấu trúc mô gan không bị tổn thương nhiều liều lượng 50% (dịch chiết linh chi), không tổn thương liều lượng 100% (dịch chiết linh chi); U/L 600 400 200 NT1 AST 660.8 ALT 493.2 GGT 714.65 NT2 201.2 173.39 98.1 NT3 101.01 78.45 38.72 Hình Biểu đồ kết số men gan Kết đánh giá cảm quan đặc điểm cấu trúc gan chuột thử nghiệm với dịch chiết nấm linh chi đỏ a Gan chuột NT1 68 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trần Thị Minh tgk Mức độ ảnh hưởng ethanol rượu đến chức gan chuột thể rõ kết xét nghiệm sinh hóa máu (ALT, AST, GGT), tất ba số tăng cao nhiều chuột uống rượu so với chuột không uống rượu Các số men gan giảm nhiều chuột sử dụng dịch chiết nấm linh chi TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Nguyễn Thị Thu Hương (2013), Nghiên cứu tác dụng tăng cường miễn dịch, chống oxy hóa khả phân bào thực nghiệm nấm linh chi đỏ (Ganoderma lucidum) linh chi vàng (Ganoderma Colossum), Tạp chí STINFO, số [2] Đỗ Tất Lợi (1962), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Y học [3] Trần Thị Khánh Tường (2018), Đánh giá sơ hóa gan từ lý thuyết đến thực hành lâm sàng, Nxb Đại học Huế [4] Trần Thị Khánh Tường (2018), Phân tích xét nghiệm sinh hóa gan dấu ấn virus viêm gan, Nxb Đại học Huế [5] Catherine Frakes Vozzo (2018), DO Nicole Welch, MD Carlos Romero-Marrero, MD Kyrsten D Fairbanks, MD, Alcoholic Liver Disease, Center for Continuing Education [6] Fratamico PM, Bhunia AK, Smith JL (2008), Foodborne Pathogens: Microbiology and Molecular Biology, Norofolk, UK: Horizon Scientific Press [7] Min Zhu, Qi Chang, Leone K Wong et al (1999), Triterpene Antioxidants from Ganoderma lucidum Phytother Res 13 [8] Wen-Chuan Lin and Wei-Lii Lin (2006), Post‐treatment of Ganoderma lucidum reduced liver fibrosis induced by thioacetamide in mice Phytotherapy Research Ngày nhận bài: 24-02-2020 Ngày biên tập xong: 28-4-2020 Duyệt đăng: 26-5-2020 69 ... Musculus) tháng tuổi, trọng lượng 28 ± g/con, mua Viện kiểm nghiệm thuốc viện Pasteur Thành phố Hồ Chí Minh Phương pháp nghiên cứu: Nội dung nghiên cứu 1: Khảo sát khả gây độc ethanol đến chức gan... nghiệm thức (NT1: Nước, NT2: Rượu vang (nồng độ 13,5%), NT3: Rượu trắng 64 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trần Thị Minh tgk Tỷ lệ % chuột chết (nồng độ 39,5%)) nghiệm thức có số chuột n=5, thực... NT3 857.1 552.6 189.6 Hình Biểu đồ kết xét nghiệm sinh hóa thí nghiệm 66 TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trần Thị Minh tgk Từ hình cho thấy, với thí nghiệm 2, NT1 uống nước có số AST, ALT, GGT