NGHIÊN cứu SUGARCANE YELLOW LEAF VIRUS gây BỆNH VÀNG gân lá TRÊN mía (YLS) BẰNG KÍNH HIỂN VI HUỲNH QUANG và kỹ THUẬT RT PCR

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** NGUYỄN MINH NAM NGHIÊN CỨU SUGARCANE YELLOW LEAF VIRUS GÂY BỆNH VÀNG GÂN LÁ TRÊN MÍA (YLS) BẰNG KÍNH HIỂN VI HUỲNH QUANG VÀ KỸ THUẬT RT-PCR Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 09/2006 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ************* NGHIÊN CỨU SUGARCANE YELLOW LEAF VIRUS GÂY BỆNH VÀNG GÂN LÁ TRÊN MÍA (YLS) BẰNG KÍNH HIỂN VI HUỲNH QUANG VÀ KỸ THUẬT RT-PCR LUẬN VĂN KỸ SƢ Chuyên ngành CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giáo viên hƣớng dẫn: PGS TS BÙI CÁCH TUYẾN Sinh viên thực NGUYỄN MINH NAM Niên khóa: 2002 – 2006 Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 09/2006 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC DEPARTMENT OF BIOTECHNOLOGY ***000*** RESEARCH ON SUGARCANE YELLOW LEAF VIRUS, THE CAUSAL AGENT OF YELLOW LEAF SYNDROME IN SACCHARUM BY FLUORESCENCE MICROCOPY AND RT-PCR METHOD Graduation thesis Major: Biotechnology Professor Student A.Professor Dr BUI CACH TUYEN NGUYEN MINH NAM Term: 2002 - 2006 Ho Chi Minh City 09/2006 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM TẠ Con xin thành kính khắc ghi cù lao cha mẹ, Ngƣời sinh thành, dƣỡng dục hy sinh tất anh em đƣợc ăn học nên ngƣời Con xin cảm ơn gia đình chỗ dựa vững cho vững bƣớc vƣợt qua khó khăn Em xin chân thành cảm ơn: Ban Giám Hiệu Trƣờng Đại Học Nông Lâm Tp HCM, ban Chủ Nhiệm môn Công Nghệ Sinh Học tạo điều kiện cho em thực thành cơng khóa luận PGS TS Bùi Cách Tuyến tận tình hƣớng dẫn tạo điều kiện thuận lợi để em hồn tất khóa luận TS Bùi Minh Trí tận tình dạy bảo giúp đỡ em suốt thời gian qua PGS TS Trần Thị Dân, TS Nguyễn Ngọc Hải, ThS Trần Nhật Phƣơng giúp đỡ em giải vƣớng mắc trình thực khóa luận Tồn thể Thầy, Cơ trang bị cho em kiến thức quí báu TS M Irey (USDA) tận tình cung cấp trình tự primers protocol RTPCR cho em TS Tania (South African Sugarcane Research Institute) TS S Schenck (HARC) tận tình cung cấp antiserum ScYLV cho em TS Becky (itdna company) cung cấp cho em tài liệu q giá Anh Hà Đình Tuấn anh Thống Trung tâm Nghiên cứu Mía đƣờng An Phú, anh trại giống Đức Huệ, Long An hộ dân xã Phú Lý, Vĩnh Cửu, Đồng Nai tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ em q trình thu thập mẫu Các Thầy, Cơ anh chị Trung tâm Phân tích Hóa Sinh hết lòng giúp đỡ cho em kinh nghiệm q báu để em thực thành cơng khóa luận Các bạn lớp công nghệ sinh học 28 ln bên mình, động viên nhiệt tình giúp đỡ suốt thời gian học tập nhƣ lúc thực khóa luận Tp Hồ Chí Minh, ngày 30 tháng 08 năm 2006 Nguyễn Minh Nam LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TĨM TẮT Nguyễn Minh Nam, Đại học Nơng Lâm Tp HCM Tháng năm 2006 “NGHIÊN CỨU SUGARCANE YELLOW LEAF VIRUS GÂY BỆNH VÀNG GÂN LÁ TRÊN MÍA (YLS) BẰNG KÍNH HIỂN VI HUỲNH QUANG VÀ KỸ THUẬT RT-PCR” đƣợc tiến hành Trung tâm Phân tích Hóa Sinh Trƣờng Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh; Trung tâm Công nghệ Quản lý Môi trƣờng Tài nguyên Trƣờng Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh; Trung tâm Nghiên cứu Mía đƣờng An Phú, Bình Dƣơng; xã Phú Lý, huyện Vĩnh Cửu, tỉnh Đồng Nai; xã Mỹ Thạnh Tây, Đức Huệ, Long An, xã Tân An, Thủ Dầu Một từ tháng 3/2006 đến tháng 8/2006 Triệu chứng vàng gân mía sugarcane yellow leaf virus gây ra, tác nhân gây bệnh quan trọng Bệnh xảy nhiều vùng trồng mía giới ScYLV tập trung bó mạch libe Triệu chứng bệnh thƣờng xuất trƣởng thành với biểu vàng gân Bệnh đƣợc chẩn đốn dựa vào biểu triệu chứng, kỹ thuật RT-PCR, ELISA, TBIA, ISEM, kính hiển vi điện tử kính hiển vi huỳnh quang Nội dung đề tài bao gồm: - Phát nhiễm ScYLV dựa vào triệu chứng - Kiểm tra bó mạch libe có khơng có biểu triệu chứng vàng gân kính hiển vi quang học kính hiển vi huỳnh quang - Chẩn đoán ScYLV kỹ thuật RT-PCR với cặp mồi YLS111 YLS462 Kết đề tài: - Triệu chứng vàng gân mía xuất Trung tâm Nghiên cứu Mía đƣờng An Phú, Bình Dƣơng; xã Phú Lý, huyện Vĩnh Cửu, tỉnh Đồng Nai; xã Mỹ Thạnh Tây, Đức Huệ, Long An, xã Tân An, Thủ Dầu Một, Bình Dƣơng - Đối với có biểu triệu chứng bó mạch libe có phát huỳnh quang bó mạch bình thƣờng khơng - Xây dựng đƣợc qui trình RT-PCR chẩn đốn ScYLV LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SUMMARY The thesis entitled “RESEARCH ON SUGARCANE YELLOW LEAF VIRUS, THE CAUSAL AGENT OF YELLOW LEAF SYNDROME IN SACCHARUM BY FLUORESCENCE MICROCOPY AND RT-PCR METHOD” This research was conducted from 3th, 2006 to 8th, 2006 in the laboratory of Biological and Chemical Analysis Center of Nong Lam University; Research Center for Environmental Technology and Nature Resource Management of Nong Lam University; and at Institute of Sugarcane Research of An Phu; Phu Ly village, Vinh Cuu district, Dong Nai province; My Thanh Tay village, Duc Hue district, Long An province, Tan An village, Thu Dau Mot town, Binh Duong province Sugarcane yellow leaf syndrome is caused by sugarcane yellow leaf virus, being a pathogen of economic importance The disease has been reported to occur in many sugarcane growing area worldwide Sugarcane yellow leaf virus resides in the phloem of diseased canes Symptoms of the disease generally appear in maturing plant as a yellowing of the leaf midrib The disease can be diagnosed by symptoms, RTPCR, ELISA, TBIA, ISEM, EM or fluorescence microcopy The objectives of this research are as follows: - To identify ScYLV infecting plants by symptoms - To examine the phloem of plant with symptom and symptom less plant by light microcopy and fluorescence microcopy - To diagnose the ScYLV by RT-PCR with YLS111 and YLS462 primers The results of this research are as follows: - Sugarcane yellow leaf syndrome has been present in sugarcane grown at Institute of Sugarcane Research of An Phu; Phu Ly village, Vinh Cuu district, Dong Nai province; My Thanh Tay village, Duc Hue district, Long An province, Tan An village, Thu Dau Mot town, Binh Duong province - In plants expressing disease symptom, the vascular bundles presented fluorescence in the phloem while symtomless plants not have fluorescence - Finding out the RT-PCR process that can be used for ScYLV diagnosis LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC CHƢƠNG Trang tựa TRANG LỜI CẢM TẠ i TÓM TẮT ii MỤC LỤC iv DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT vi DANH SÁCH CÁC BẢNG VÀ BIỂU ĐỒ vii DANH SÁCH CÁC HÌNH vii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục Đích 1.3 Yêu Cầu PHẦN 2.1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU Tổng quan mía 2.1.1 Về mía 2.1.2 Một số bệnh virus mía 2.2 Bệnh vàng gân mía sugarcane yellow leaf virus 2.2.1 Bệnh vàng gân mía 2.2.2 Sugarcane yellow leaf virus 2.2.3 Ảnh hƣởng kinh tế bệnh vàng gân 15 2.2.4 Những nghiên cứu tính kháng ScYLV mía 16 2.2.5 Tạo mía chuyển gene kháng ScYLV 16 2.2.6 Tạo mía bệnh kỹ thuật nuôi cấy mô 17 2.2.7 Một số kỹ thuật chẩn đoán ScYLV 17 2.3 Những nghiên cứu ScYLV giới việt nam 25 2.3.1 Những nghiên cứu ScYLV giới 25 2.3.2 Những nghiên cứu ScYLV Việt Nam 26 2.4 Kỹ thuật PCR RT-PCR 27 2.4.1 PCR 27 2.4.2 RT-PCR 28 PHẦN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 30 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 3.2 Phƣơng pháp lấy mẫu 30 3.3 Trang thiết bị dụng cụ thí nghiệm 31 3.3.1 Máy móc, thiết bị 31 3.3.2 Dụng cụ 31 3.4 Hóa chất 32 3.4.1 Hóa chất sử dụng RT- PCR 32 3.4.2 Hóa chất sử dụng điện di 32 3.5 Phƣơng pháp quan sát kính hiển vi huỳnh quang 33 3.6 Phƣơng pháp phát kỹ thuật RT-PCR 33 3.6.1 Qui Trình Ly Trích RNA 33 3.6.2 Qui trình thực phản ứng RT-PCR 35 3.6.3 Qui trình RT-PCR chỉnh sửa 35 3.7 Phƣơng pháp xử lý số liệu 36 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 4.1 Các biểu triệu chứng vàng gân ScYLV 37 4.2 Kết chuẩn đoán dựa vào triệu chứng 39 4.2.1 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo giai đoạn sinh trƣởng 39 4.2.2 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo địa phƣơng 40 4.2.3 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo nguồn gốc giống 42 4.3 Quan sát mạch dẫn kính hiển vi huỳnh quang 43 4.4 Kết RT-PCR dựa theo qui trình M Irey 46 4.5 Kết Quả RT-PCR 46 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 48 5.1 Kết luận 48 5.2 Đề nghị 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT Bp: Base pair BYDV: Barley Yellow Dwarf Luteovirus cDNA: complementary DNA CP: Coat Protein DAS-ELISA: Double Antibody Sandswich - ELISA DBIA: Dot-Blot Immunoassay DEPC: Diethyl Pyrocarbonate DNA: Deoxyribonucleic Acid dNTP: Deoxyribonucleoside Triphosphate dsRNA: double stranded RNA ELISA: Enzyme - Linked Immunosorbent Assay EM: Electron Microscopy g: Gram ha: Hecta ISEM: Immunosorbent Electron Microscopy k Da: Kilo Dalton kg: Kilogram ml: Mililitre µl: Microlitre µm: Micrometre mm: Milimetre MP: Movement Protein mRNA: Messenger RNA NASBA: Nucleic Acid Sequence-Based Amplification nm: Nanometre ORF: Open Reading Frame PCR: Polymerase Chain Reaction PEMV: Pea enation mosaic virus PLRV: Potato leaf roll virus PTGS: Posttranscriptional Gene Silencing PVP: Polyvinylpyrrolidone RdRp: RNA dependent RNA polymerase RNA: Ribonucleic Acid RT-PCR: Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction SCBV: Sugarcane bacilliform virus ScYLV: Sugarcane Yellow Leaf Virus SDS-PAGE: Sodium Dodecyl Sunfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis SSR: Single Sequence Repeat ssRNA: Single stranded Ribonucleic Acid TIBA: Tissue Blot Immunoassay UTR: Untranslated Region YLS: Yellow Leaf Syndrome vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC BẢNG VÀ BIỂU ĐỒ Bảng 4.1 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo giai đoạn sinh trƣởng 39 Bảng 4.2 Tỷ lệ nhiễm bệnh vàng gân theo địa phƣơng 40 Bảng 4.3 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo giống 42 Biểu đồ 4.1 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo giai đoạn sinh trƣởng 39 Biểu đồ 4.2 Tỷ lệ nhiễm bệnh địa phƣơng 41 Biểu đồ 4.3 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo nguồn gốc giống 43 DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1 Sự phân bố ScYLV giới Hình 2.2 Sugarcane yellow leaf virus dƣới kính Hình 2.3 Rệp bắp Rệp có cánh (A,B), rệp khơng cánh (C) trƣởng thành 11 Hình 2.4 Biểu đồ mơ tả gene Luteovirus thuộc nhóm phụ I II 12 Hình 2.5 Cấu trúc kẹp tóc giả định gene ScYLV 14 Hình 2.6 Các bó mạch gân đƣợc kiểm tra kính hiển vi huỳnh quang 19 Hình 2.7 Vi ảnh điện tử lát cắt siêu mỏng tế bào kèm libe mía 20 Hình 2.8 Kết TIBA vết in gân khỏe (trên) bị nhiễm (dƣới) 21 Hình 2.9 Màng nitrocellulose đƣợc xử lý kỹ thuật TBIA với huyết 22 Hình 2.10 Kết immunoblotting (westren blotting) protein ScYLV 22 Hình 2.11 Phân tử Beacon 23 Hình.2.12 Nguyên tắc phản ứng PCR 27 Hình 2.13 Sơ đồ phản ứng RT-PCR 29 Hình.4.1 Lá biểu triệu chứng vàng gân 37 Hình 4.2 Triệu chứng vàng gân lá thứ 37 Hình 4.3 Cây biểu triệu chứng vàng gân 38 Hình 4.4 Cánh đồng có triệu chứng vàng gân (A) Cánh đồng khỏe mạnh (B) 38 Hình 4.5 Các bó mạch gân đƣợc kiểm tra kính hiển vi huỳnh quang 44 Hình 4.6 Các bó mạch gân đƣợc quan sát kính hiển vi quang học (100X) 45 Hình 4.7 Sự phát huỳnh quang tế bào có phản ứng chết (200X) 45 Hình 4.8 Kết điện di sản phẩm RT-PCR 46 Hình 4.9 Kết điện di sản phẩm RT-PCR 47 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Bùi Chí Bửu, Nguyễn Thị Lang, 2004 Di truyền phân tử Nhà xuất Nông Nghiệp Tp HCM Trang 270-282 Hồ Huỳnh Thùy Dƣơng, 1998 Sinh học phân tử Nhà xuất giáo dục Trang 190-204 Trần Kim Đồng, Nguyễn Quang Phổ, Lê Thị Hoa, 1991 Giáo trình sinh lý trồng Nhà xuất đại học giáo dục chuyên nghiệp, Hà Nội, 1991 Trang 190204 Nguyễn Thị Lang, Bùi Chí Bửu, 2005 Sinh học phân tử giới thiệu phương pháp ứng dụng Nhà xuất Nông Nghiệp HCM Trang 87-96, 107-119 Nguyễn Thị Lang, 2002 Phương pháp nghiên cứu công nghệ sinh học Nhà xuất Nông Nghiệp Tp HCM Trang 38-46, 114-130, 160-166 Vũ Triệu Mân, 2003 Chẩn đoán nhanh bệnh hại thực vật Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội Trang 37-43, 56-95 Vũ Triệu Mân, Lê Lƣơng Tề, 1998 Giáo trình bệnh nơng nghiệp Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội Trang 17-21, 220-232 Trần Văn Sỏi, 2003 Cây mía Nhà xuất Nghệ An Trang 7-26 Hà Đình Tuấn, 2004 Điều tra thành phần bệnh hại mía số giống mía nhập nội khảo sát diễn biến bệnh hại quan trọng vùng mía ngun liệu miền Đơng Nam Bộ Luận văn thạc sĩ ngành nông học đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh TÀI LIỆU TIẾNG NƢỚC NGOÀI 10 Ahmad Y Abu, M Royer, L Costet, J-H Daugrois, J-M Lett, J.I Victoria and P Rott, 2006 Genotyping of Sugarcane yellow leaf virus in Colombia, Guadeloupe and Reunion VIIIth ISSCT Pathology Workshop Petit-Bourg, Guadeloupe (FWI) 23 - 27 January 2006 Programme and Abstracts 11 Henrik H Albert, Tichaona Mangwende, Ming-Li Wang, T Erik Mirkov, 2003 Functional Analysis Of The P0 Protein Of Sugarcane Yellow Leaf Virus: A Suppressor Of Posttranscriptional Gene Silencing Plant & Animal Genomes XIV Conference Workshop: Intl Consortium for Sugarcane Biotech (ICSB) January 14-18, 2006 Town & Country Convention Center, San Diego, CA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 51 12 S M Aljanabi, Y Parmessur, Y Moutia, S Saumtally and A Dookun, 2001 Further evidence of the association of a phytoplasma and a virus with yellow leaf syndrome in sugarcane Plant Pathology 50, p 628±636 13 Angel S J.C, Guzmán R M L, Angel S F, Victoria K J I, 2006 Studies on the Sugarcane yellow leaf virus (SCYLV) in Colombia VIIIth ISSCT Pathology Workshop Petit-Bourg, Guadeloupe (FWI) 23 - 27 January 2006 Programme and Abstracts 14 Kathryn S Braithwaite, 2003 New virus and virus – like diseases of sugarcane – an overview Sugarcane pathology Volume II: virus and phytoplasma diseases Sugarcane Pathology: Virus and Phytoplasma Diseases v (G.P b, R.E Ford, M.Tǒsic and D.S Teakle) Science Publishers, Inc: p 3-24 15 Chatenet M., Delage C., Ripolles M, Irey M., Lockhart B E L, and Rott P., 2001 Detection of Sugarcane yellow leaf virus in quarantine and production of virus-free sugarcane by apical meristem culture Plant Dis 85: p1177-1180 16 Comstock J C and Gilbert R A Sugarcane Yellow Leaf Disease University of Florida, IFAS extension SS-AGR-256 http://edis.ifas.ufl.edu/pdffiles/SC/SC07400.pdf 17 Comstock J C and Miller J D., 2003 Incidence and spread of sugarcane yellow leaf virus in sugarcane clones in the cp-cultivar development program at Canal Point Journal American Society of Sugarcane Technologists, Vol 23, 2003, p7178 18 Comstock J C., Sood S., and McCorkle K., 2005 Characterization of Sugarcane Populations for Disease Reactions for Use in Molecular Marker Research Agricultural absracts 2005 annual meeting Journal American Society Sugar Cane Technologists, Vol 25, 2005 [Abstracts] 19 Comstock Jack C., Chaparro Jose X., Tai Peter Y P., Serge Edme, Katherine McCorkle, Jim D Miller, 2004 The Association Of Microsatellite Markers With Resistance To Sugarcane Yellow Leaf Virus Workshop: Intl Consortium for Sugarcane Biotech (ICSB) Plant & Animal Genomes XII Conference January 1014, 2004 Town & Country Convention Center San Diego, CA 20 Cronjé C.P.R., 2004 Sugarcane viruses in sub-Saharan Africa Plant virology in sub-Saharan Africa, p 492-497 21 Cu Ramon, Manjunath K L., Petersen Y, Hiebert E and Davis M J., 2004 Development of a Serological Diagnostic Probe to Detect the Sugarcane Yellow Leaf Luteovirus (SCYLV) Using Phage Display Technology Journal American Society Sugar Cane Technologists, Vol 24, 2004 [Abstracts] LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 52 22 Edon Carine, Vaillant Jean, Sauvion Nicolas and Daugrois J.H., 2006 Spatiotemporal evolution of plant infection by SCYLV in a disease free plot Toward modeling virus spread in tropical conditions VIIIth ISSCT Pathology Workshop Petit-Bourg, Guadeloupe (FWI) 23 - 27 January 2006 Programme and Abstracts 23 Garcés Freddy, Reyna Medina and Eloy Orellana, 2006 Transmission of Sugarcane yellow leaf virus and Sugarcane mosaic virus in Ecuador VIIIth ISSCT Pathology Workshop Petit-Bourg, Guadeloupe (FWI) 23 - 27 January 2006 Programme and Abstracts 24 Gaur R.K., Rao G.P., Maneesha Singh and Axel T Lehrer, 2003 Sequence analysis of the entire RNA genome of sugarcane yellow leaf luteovirus of an Indian isolate BSPP Presidential Meeting 2003 (15th – 18th December 2003) Plant Pathogen Genomics - From Sequence To Application Jubilee Campus, University of Nottingham, UK 25 Goldstein C., Wang M-L and Albert H., 2002 Production of recombinant protein in sugarcane and rice Hawaii Agriculture Research center Annual report 20012002 p10-11 26 M.C Gonỗalves, M.M Klerks,, M Verbeek, J.Vega and J.F.J.M van den Heuvel, 2002 The use of molecular beacons combined with NASBA for the sensitive detection of Sugarcane yellow leaf virus European Journal of Plant Pathology 108: p401–407, 2002 Kluwer Academic Publishers Printed in the Netherlands 27 Lockhart Ben E., Cronjié C Pieter R., Rott P., Bailey Roger A., Comstock Jack C., Barry J Croft, A Salem Saumtally, 2000 Yellow leaf syndrome A guide to sugarcane diseases CIRAD/ISSCT 28 McAllister C D., Hoy J W., and Reagan T E., 2006 Temporal increase and spatial distribution of yellow leaf and sugarcane aphid infestations VIIIth ISSCT Pathology Workshop Petit-Bourg, Guadeloupe (FWI) 23 - 27 January 2006 Programme and Abstracts 29 Moonan F., Molina J., and Mirkov T E., 2000 Sugarcane yellow leaf virus: An emerging virus that has evolved by recombination between luteoviral and poleroviral ancestors Virology 269: p156-171 Academic Press 30 Parmessur Y., Aljanabi S., Saumtally S and Dookun-Saumtally A., 2002 Sugarcane yellow leaf virus and sugarcane yellows phytoplasma: elimination by tissue culture Plant Pathology Volume 51 Page 561-566 31 M Paola Rangel, Lorena Gomez, Jorge I Victoria, Fernando Angel, 2005 Transgenic plants of CC 84-75 resistant to the virus associated with the sugarcane yellow leaf disease Silver jubilee congress Guatemala january 30 - february 4, 2005 abstracts of papers International Society of Sugar Cane Technology LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 53 32 Rassabya L., Girard J.-C, Lemaire O., Costet L., Irey M S., Kodja H., Lockhart B E L and Rott P., 2004 Spread of Sugarcane yellow leaf virus in sugarcane plants and fields on the island of Réunion Plant Pathology Volume 53 Page 117-125 Sambrook J and Russell D W, 2001 Molecular Cloning- A laboratory manual Volume Third edition CSHL Press, New York p 7.1 – 7.88 33 Scagliusi Sandra Mansur and Lockhart B E L., 2000 Transmission, characterization, and serology of a luteovirus associated with yellow leaf syndrome of sugarcane Phytopathology 90: p120-124 34 Schenck S., Lehrer A.T., Wu K.K., 2001 Yellow Leaf Syndrome Hawaii Agriculture Research Center, Pathology Report 68 February 2001 http://www.hawaiiag.org/harc/path68.pdf 35 Schenck Susan, 2001 Sugarcane yellow leaf syndrome: History and current concepts Sugarcane pathology Volume II: virus and phytoplasma diseases Sugarcane Pathology: Virus and Phytoplasma Diseases v (G.P Rao, R.E Ford, M.Tǒsic and D.S Teakle) Science Publishers, Inc: p24-35 36 Smith Grant R., Borg Zara, Lockhart Ben E L., Braithwaite Kathryn S and Gibbs Mark J., 2000 Sugarcane yellow leaf virus: a novel member of the Luteoviridae that probably arose by inter-species recombination Journal of General Virology (2000), 81, p1865–1869 Printed in Great Britain 37 Vega J., Scagliusi S M M., Ulian E C, 1997 Sugarcane yellow leaf disease in Brazil: evidence of the association with a luteovirus Plant Disease Vol 81No p21 - 26 38 Viswanathan R and Balamuralikrishnan M, 2004 Detection of sugarcane yellow leaf virus, the causal agent of yellow leaf syndrome in sugarcane by DAS-ELISA Archives of Phytopathology and Plant Protection Volume 37, Number / August 2004, p169 – 176 Publisher: Taylor & Francis [Abstract] 39 Wang M-L., Schenck S and Albert H., 2006 Antibody to a short peptide sequence detected Sugarcane yellow leaf virus isolates from several sources VIIIth ISSCT Pathology Workshop Petit-Bourg, Guadeloupe (FWI) 23 - 27 January 2006 Programme and Abstracts 40 Wang M-L., Ancheta S., Clayton J., Goldstein C and Albert H., 2003 Production of a biologically active pharmaceutical protein in sugarcane and rice Hawaii Agriculture Research center Annual report 2003 p.12 41 Zhu Y J., Osterman G., Moritomo C., McCafferty H., Agabayani R., Lehrer A., Schenck S and Moore P., 2003 Developing Transgenic Sugarcane for ScYLV Resistance Hawaii Agriculture Research center Annual report 2003 p LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 54 ĐỊA CHỈ TRÊN WEB 42 www.ento.csiro.au 43 www.ento.okstate.edu 44 www.ipgri.cgiar.org/Publications/pdf/818.pdf 45 www.ipgri.cgiar.org/Publications/pdf/336.pdf 46 http://www.assct.org/journal/JASSCT%20PDF%20Files/vol24/ASSCT%20abstr %20June%2003.pdf 47 http://edis.ifas.ufl.edu/pdffiles/sc/sc07400.pdf 48 http://www.iita.org/info/virology/pdf_files/492-497.pdf 49 http://www.molecular-beacons.org 50 http://www.cosmobio.co.jp/export_e/products/products_top.asp 51 http//:ipm_ncsu_edu-AG295-pics-corn_leaf_aphid_gif.htm LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PHỤ LỤC Phụ lục : Danh sách giống điều tra Kí hiệu Giống TL1 KU00-15-8 TL2 KU00-1-92 TL3 K92-51-56 TL4 TL5 K95-1-61 Uthong942483 TL6 K95-1-56 TL7 KU98-009 TL8 K90-50 TL9 Uthong483 TL10 Uthong60-1 TL11 Uthong2 TL12 KU60-2 TL13 K95-84 TL14 KU00-1-61 TL15 K93-236 TL16 Uthong3 TL17 K84-92 TL18 LK11 TL19 KU207 TL20 K9087 TL21 K93-219 TL22 K95-32 TL23 K88-200 TL24 K9045 TL25 K95238 TL26 KU603 TL27 Uthong95156 TL28 K8865 VSX1 K84-200 VSX2 Co62170 VSX3 ROC26 VSX4 DLM24 VSX5 VN844137 VSX6 VN841427 Nguồn gốc Tuổi - Sự phát huỳnh quang + Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng + - + + + + + + + + - Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Ấn Độ Ấn Độ gốc Mỹ Việt Nam Việt Nam Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Triệu chứng (YLS) RTPCR + + + + + + + + + + - LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com VSX7 VN84422 VSX8 K84-200 VSX9 RB72454 VSX10 K8865 VSX11 My55-14 VSX12 K8865 G1 C876 G2 C2217 G3 C8651 G4 C8756 G5 C14148 G6 C14262 G7 C17272 G8 C18768 G9 C20859 G10 C23651 G11 C28863 G12 C29073 G13 C32368 G14 C33464 G15 C37472 G16 C69347 G17 C81967 G18 C6675 G19 C306275 G20 My645 G21 My5369 G22 MY5464 G23 MY5465 G24 My5715 G25 My53174 G26 My54129 G27 Ja605 G28 Ja6411 G29 Ja6416 G30 Ja6419 G31 Ja6420 BD1 R570 BD2 R570 BD3 ROC16 BD4 ROC16 BD5 ROC16 + + + + + + + + + + + + + + + + + + -+ + + + + + + + + + + + + Việt Nam Thái Lan Braxin Thái Lan Cuba Thái Lan Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Pháp Pháp Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BD6 ROC16 BD7 ROC16 BD8 ROC16 BD9 Commus BD10 Commus BD11 Commus BD12 Commus LA1 K84-200 LA2 K84-200 LA3 K84-200 LA4 K84-200 LA5 K84-200 LA6 K84-200 LA7 K84-200 LA8 K84-200 LA9 K84-200 LA10 K84-200 LA11 K84-200 LA12 K84-200 LA13 K84-200 LA14 K84-200 LA15 K84-200 LA16 VN84-422 LA17 VN84-422 LA18 VN84-422 LA19 VN84-422 LA20 VN84-422 LA21 VN84-422 LA22 VN84-422 LA23 VN84-422 LA24 VN84-422 LA25 VN84-422 LA26 VN84-422 LA27 VN84-422 LA28 VN84-422 LA29 VN84-422 LA30 VN84-422 LA31 VN84-422 LA32 VN84-422 LA33 VN84-422 LA34 VN84-422 LA35 VN84-422 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Đài Loan Đài Loan Đài Loan Australia Australia Australia Australia Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LA36 VN84-422 LA37 VN84-422 LA38 VN84-422 LA39 VN84-422 LA40 VN84-422 DN1 My55-14 DN2 My55-14 DN3 My55-14 DN4 My55-14 DN5 My55-14 DN6 My55-14 DN7 My55-14 DN8 My55-14 DN9 My55-14 DN10 My55-14 DN11 My55-14 DN12 My55-14 DN13 My55-14 DN14 My55-14 DN15 My55-14 DN16 H39-3633 DN17 H39-3633 DN18 H39-3633 DN19 H39-3633 DN20 H39-3633 DN21 H39-3633 DN22 H39-3633 DN23 H39-3633 DN24 H39-3633 DN25 H39-3633 DN26 H39-3633 DN27 H39-3633 DN28 H39-3633 DN29 H39-3633 DN30 H39-3633 DN31 ROC16 DN32 ROC16 DN33 ROC16 DN34 ROC16 DN35 ROC16 DN36 ROC16 DN37 ROC16 + + + + + + + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + + + + + + + Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DN38 ROC16 DN39 ROC16 DN40 ROC16 DN41 ROC16 DN42 ROC16 DN43 ROC16 DN44 ROC16 DN45 ROC16 Kí hiệu Giống TL1 TL2 TL3 TL4 KU00-15-8 KU00-1-92 K92-51-56 K95-1-61 Uthong942483 K95-1-56 KU98-009 K90-50 Uthong483 Uthong60-1 Uthong2 KU60-2 K95-84 KU00-1-61 K93-236 Uthong3 K84-92 LK11 KU207 K9087 K93-219 K95-32 K88-200 K9045 K95238 TL5 TL6 TL7 TL8 TL9 TL10 TL11 TL12 TL13 TL14 TL15 TL16 TL17 TL18 TL19 TL20 TL21 TL22 TL23 TL24 TL25 + + + + - - + + + + - Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Nguồn gốc Tuổi - Sự phát huỳnh quang + Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng + + + + - Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Triệu chứng (YLS) RTPCR + + + + + + LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TL26 KU603 TL27 Uthong95156 TL28 K8865 VSX1 K84-200 VSX2 Co62170 VSX3 ROC26 VSX4 DLM24 VSX5 VN844137 VSX6 VN841427 VSX7 VN84422 VSX8 K84-200 VSX9 RB72454 VSX10 K8865 VSX11 My55-14 VSX12 K8865 G1 C876 G2 C2217 G3 C8651 G4 C8756 G5 C14148 G6 C14262 G7 C17272 G8 C18768 G9 C20859 G10 C23651 G11 C28863 G12 C29073 G13 C32368 G14 C33464 G15 C37472 G16 C69347 G17 C81967 G18 C6675 G19 C306275 G20 My645 G21 My5369 G22 MY5464 G23 MY5465 G24 My5715 G25 My53174 G26 My54129 G27 Ja605 + + + + + + + + + + + + + + - -+ -+ + + + + + + + + + - Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Ấn Độ Ấn Độ gốc Mỹ Việt Nam Việt Nam Việt Nam Thái Lan Braxin Thái Lan Cuba Thái Lan Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đầu vƣơn lóng Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com G28 G29 G30 G31 BD1 BD2 BD3 BD4 BD5 BD6 BD7 BD8 BD9 BD10 BD11 BD12 LA1 LA2 LA3 LA4 LA5 LA6 LA7 LA8 LA9 LA10 LA11 LA12 LA13 LA14 LA15 LA16 LA17 LA18 LA19 LA20 LA21 LA22 LA23 LA24 LA25 LA26 Ja6411 Ja6416 Ja6419 Ja6420 R570 R570 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 Commus Commus Commus Commus K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 K84-200 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + -+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Cuba Cuba Cuba Cuba Pháp Pháp Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Australia Australia Australia Australia Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Thái Lan Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Giữa vƣơn lóng Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LA27 LA28 LA29 LA30 LA31 LA32 LA33 LA34 LA35 LA36 LA37 LA38 LA39 LA40 DN1 DN2 DN3 DN4 DN5 DN6 DN7 DN8 DN9 DN10 DN11 DN12 DN13 DN14 DN15 DN16 DN17 DN18 DN19 DN20 DN21 DN22 DN23 DN24 DN25 DN26 DN27 DN28 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 VN84-422 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 My55-14 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 H39-3633 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Việt Nam Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Cuba Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Hawaii Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Thu hoạch Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DN29 DN30 DN31 DN32 DN33 DN34 DN35 DN36 DN37 DN38 DN39 DN40 DN41 DN42 DN43 DN44 DN45 H39-3633 H39-3633 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 ROC16 + + + + + + + + - + + + + + + + + - Hawaii Hawaii Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đài Loan Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Đẻ nhánh Ghi chú: (-): âm tính; (+) dƣơng tính; ( ) khơng khảo sát Phụ lục 2: PHIẾU ĐIỀU TRA NÔNG DÂN Ngày điều tra…… /03/2006 Mã số mẫu:……………………………………… Họ tên chủ ruộng Nơi chốn:…… Ấp: Giống cây:………………………………………………………………… Giai đoạn sinh trƣởng: …………………………………… Tổng diện tích canh tác: (ha) Số cây:……………… Loại đất:…………………………………… Mức độ khô hạn vào mùa khô khô khô vừa khô không khơ Tƣới tiêu: có khơng Nguồn nƣớc: nƣớc giếng nƣớc máy 10 Khả giữ nƣớc đất: tốt trung bình 11 Kỹ thuật canh tác: + khoảng cách trồng (m): + Vƣờn trồng hay trồng xen Xen với gì: 12 Tình hình sử dụng phân bón: Có khơng ………………………………………………………………………………… Có sử dụng chất kích thích sinh trƣởng khơng: có khơng Loại gì: LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 13 Sâu bệnh gây hại ……………… …………………………………………………………… 14 Bệnh có thƣờng xảy không? 15 Sử dụng thuốc bảo vệ thực vật: có khơng ………………………………………………………………………………………… 16 Năng suất:………………………………… 17 Triệu chứng 10 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... học Nông Lâm Tp HCM Tháng năm 2006 “NGHIÊN CỨU SUGARCANE YELLOW LEAF VIRUS GÂY BỆNH VÀNG GÂN LÁ TRÊN MÍA (YLS) BẰNG KÍNH HIỂN VI HUỲNH QUANG VÀ KỸ THUẬT RT- PCR? ?? đƣợc tiến hành Trung tâm Phân tích... Sugarcane yellow leaf virus cần thiết vi? ??c hạn chế phòng ngừa thiệt hại virus gây Vi? ??t Nam Với thực tế thực đề tài: ? ?Nghiên cứu sugarcane yellow leaf virus gây bệnh vàng mía (YLS) kính hiển vi. .. chứng vàng gân kính hiển vi quang học kính hiển vi huỳnh quang - Chẩn đốn ScYLV kỹ thuật RT- PCR với cặp mồi YLS111 YLS462 Kết đề tài: - Triệu chứng vàng gân mía xuất Trung tâm Nghiên cứu Mía đƣờng