Nghiên cứu chế tạo β glucan khối lượng phân tử thấp bằng phương pháp chiếu xạ và khảo sát hiệu ứng giải độc gan, bảo vệ bức xạ định hướng làm thực phẩm chức năng

SỞ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO β-GLUCAN KHỐI LƯỢNG PHÂN TỬ THẤP BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾU XẠ VÀ KHẢO SÁT HIỆU ỨNG GIẢI ĐỘC GAN, BẢO VỆ BỨC XẠ ĐỊNH HƯỚNG LÀM THỰC PHẨM CHỨC NĂNG MSNV: NN01/19-20 Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Cơng nghệ Sinh học TP Hồ Chí Minh Chủ nhiệm nhiệm vụ: ThS Nguyễn Thị Ngọc Anh Thành phố Hồ Chí Minh - năm 2021 SỞ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THƠN TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2021 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu chế tạo β-glucan khối lượng phân tử thấp phương pháp chiếu xạ khảo sát hiệu ứng giải độc gan, bảo vệ xạ định hướng làm thực phẩm chức (Mã số: NN01/19-20) Thuộc chương trình: Hóa dược, Cơng nghệ thực phẩm - Công nghệ Vật liệu Công nghệ Sinh học theo Quyết định số 2953/QĐ-UBND Uỷ ban nhân dân Thành phố Hồ Chí minh ban hành ngày 07 tháng 06 năm 2016 Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Nguyễn Thị Ngọc Anh Ngày, tháng, năm sinh: 19/10/1991 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Thạc sỹ Công nghệ Sinh học Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên Chức vụ: Nhân viên P CNSH Vật liệu Nano Điện thoại: 028 37153792 E-mail: ntngocanh09@gmail.com Tên tổ chức công tác: Trung tâm CNSH TP.HCM Địa tổ chức: 2374 Quốc Lộ 1, P Trung Mỹ Tây, Q 12, Tp HCM Địa nhà riêng: Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Cơng nghệ Sinh học TP.HCM Điện thoại: 028 37153792 Fax: 028 38916997 E-mail: ttcnsh.snn@tphcm.gov.vn Website: hcmbiotech.com.vn Địa chỉ: 2374 Quốc Lộ 1, P Trung Mỹ Tây, Q 12, Tp HCM Họ tên thủ trưởng tổ chức: TS Nguyễn Đăng Quân Số tài khoản: 3713.0.1007645 Kho bạc: Nhà nước TP HCM Tên quan chủ quản đề tài: Sở Nông nghiệp Phát triển Nơng thơn II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết: 21 tháng từ tháng 4/2019 đến tháng 12/2020 - Thực tế thực hiện: từ tháng 4/2019 đến tháng 6/2021 - Được gia hạn (nếu có): tháng (từ tháng 01/2021 đến tháng 6/2021) Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 950 tr.đ, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 950 tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Số TT Theo kế hoạch Thời gian Kinh phí (Tháng, năm) (Tr.đ) 4/2019 300.00 01/2020 460.00 6/2021 190.00 Thực tế đạt Thời gian Kinh phí (Tháng, năm) (Tr.đ) 12/2019 150.00 5/2020 150.00 12/2020 460.00 Ghi (Số đề nghị toán) c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đối với đề tài: Đơn vị tính: Triệu đồng Thực tế đạt Theo kế hoạch Số Nội dung TT khoản chi Nguồn khác NSKH Nguồn khác 0,00 280,84 280,84 0,00 0,00 535,71 534,88 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 133,45 0,00 102,57 102,57 0,00 950,00 0,00 918,29 918,29 0,00 Tổng NSKH 280,84 280,84 535,71 535,71 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 133,45 950,00 Tổng Trả công lao động (khoa học, phổ thông) Nguyên, vật liệu, lượng Thiết bị, máy móc Xây dựng, sửa chữa nhỏ Chi khác Tổng cộng - Lý thay đổi (nếu có): Theo kế hoạch, phần thử nghiệm khả bảo vệ xạ, chuột chiếu xạ Viện Nghiên cứu Hạt nhân Đà Lạt Tuy nhiên, nguồn xạ Trung tâm thời điểm thí nghiệm đáp ứng việc chiếu xạ chuột với liều xạ thấp (3 - 9Gy) nên phần kinh phí khơng sử dụng Giảm kinh phí phân tích mẫu giảm số lượng người tham dự Hội nghị Khoa học công nghệ hạt nhân cán trẻ ngành lượng nguyên tử lần thứ VI tổ chức Hà Nội, tháng 10/2020 Các văn hành trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ cơng đoạn xét duyệt, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì nhiệm vụ (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) Số TT Số, thời gian ban hành văn Tên văn Văn số 3669/SNN-KHCN ngày 26 tháng 12 năm 2018 Văn Sở Nông nghiệp Phát triển nông thôn việc phê duyệt đề tài nghiên cứu khoa học cấp sở năm 2019 Trung tâm Công nghệ Sinh học Văn số Văn Ủy ban nhân dân Thành phố 218/UBND-KT ngày việc chủ trương phê duyệt nhiệm vụ 18 tháng năm 2019 nghiên cứu khoa học cấp sở năm 2019 Trung tâm Công nghệ Sinh học Quyết định số Quyết định Sở Nông nghiệp Phát 352/QĐ-SNN ngày 29 triển nông thôn việc phê duyệt danh tháng 10 năm 2019 mục giao thực nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở năm 2019 cho Trung tâm Công nghệ sinh học Quyết định số Quyết định Sở Nông nghiệp Phát 356/QĐ-SNN ngày 31 triển nông thôn việc phê duyệt thuyết tháng 10 năm 2019 minh tổng dự tốn kinh phí nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở giai đoạn 2019 - 2021 cho Trung tâm Công nghệ sinh học Hợp đồng số 15/2019/ Hợp đồng Sở Nông nghiệp Phát triển HĐ-SNN ngày 31 nông thôn việc thực nhiệm vụ tháng 10 năm 2019 khoa học công nghệ cấp sở “Nghiên cứu chế tạo β-glucan khối lượng phân tử thấp phương pháp chiếu xạ khảo sát hiệu ứng giải độc gan, bảo vệ xạ định hướng làm thực phẩm chức năng” Quyết định số Quyết định Sở Nông nghiệp Phát 383/QĐ-SNN ngày 12 triển nông thôn việc gia hạn thời gian tháng 10 năm 2020 thực nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở Ghi Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo Thuyết minh Tên tổ chức tham gia thực Nội dung tham gia chủ yếu Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, không 10 người kể chủ nhiệm) Tên cá Tên cá nhân Số đăng ký nhân tham theo TT gia thực Thuyết minh Nội dung tham gia ThS Nguyễn Thị Ngọc Anh ThS Nguyễn Thị Ngọc Anh Chủ nhiệm nhiệm vụ PGS.TS Lê Quang Luân PGS.TS Lê Quang Luân - Xây dựng đề cương chi tiết nhiệm vụ - Chế tạo β-glucan nguyên liệu từ nấm men bia - Chế tạo β-glucan Mw thấp tan nước phương pháp chiếu xạ kết hợp xử lý hóa học - Xác định đặc trưng chế phẩm β-glucan chế tạo phương Xây dựng kế hoạch tổ chức thực hiện, phân tích kết thực nghiệm, báo cáo tổng kết kết nghiên cứu Sản phẩm chủ yếu đạt Báo cáo đề cương chi tiết, giám định báo cáo tổng hợp kết nghiên cứu nhiệm vụ - Đề cương hoàn chỉnh - Nguyên liệu β-glucan (10 kg) từ bã men bia phục vụ thí nghiệm - Mẫu β-glucan Mw thấp tan nước thu cách chiếu xạ kết hợp xử ly hóa học với nồng độ H2O2 pH tối ưu Ghi chú* pháp chiếu xạ - Xác định khả làm giảm tác hại xạ β-glucan Mw thấp tan nước chuột nhắt trắng - Xây dựng quy trình chế β-glucan Mw thấp tan nước có khả làm giảm tác hại xạ phương pháp chiếu xạ quy mơ lít/mẻ - Tham gia viết báo cáo tổng hợp kết ThS Nguyễn Thanh Vũ ThS Nguyễn Thanh Vũ - Chế tạo - Các thông số đặc trưng cấu trúc mẫu β-glucan Mw thấp tan nước chế tạo - Mw nồng độ β-glucan Mw thấp tan nước cho khả làm giảm tác hại xạ tốt - Quy trình cơng nghệ chế tạo chế phẩm βglucan Mw thấp tan nước phương pháp chiếu xạ quy mơ lít/mẻ - Báo cáo tổng hợp kết hoàn thiện β-glucan - Nguyên liệu β-glucan nguyên liệu từ nấm men (10 kg) từ bã men bia bia phục vụ thí - Chế tạo β-glucan Mw nghiệm thấp tan nước - Mẫu β-glucan Mw phương pháp chiếu thấp tan nước xạ kết hợp xử lý hóa học thu cách - Xác định đặc trưng chiếu xạ kết hợp xử lý chế phẩm β-glucan hóa học với nồng độ chế tạo phương H2O2 pH tối ưu pháp chiếu xạ - Các thông số đặc - Xác định hoạt tính trưng cấu trúc kháng oxi hóa in vitro mẫu β-glucan Mw thấp tan nước β-glucan Mw thấp chế tạo tan nước - Hoạt tính bắt gốc tự - Xác định hoạt tính bảo β-glucan Mw vệ, giải độc gan β- thấp tan nước glucan Mw thấp tan chế tạo nước mơ hình - Mw nồng độ chuột tổn thương gan β-glucan Mw thấp - Xác định khả làm tan nước cho khả giảm tác hại xạ bảo vệ giải β-glucan Mw thấp tan độc gan tốt nước chuột - Mw nồng độ nhắt trắng - Xây dựng quy trình chế β-glucan Mw thấp tan nước có khả làm giảm tác hại xạ phương pháp chiếu xạ quy mơ lít/mẻ β-glucan Mw thấp tan nước cho khả làm giảm tác hại xạ tốt - Quy trình cơng nghệ chế tạo chế phẩm βglucan Mw thấp tan nước phương pháp chiếu xạ quy mơ lít/mẻ ThS Nguyễn Trọng Nghĩa ThS Nguyễn Trọng Nghĩa - Xác định đặc trưng - Các thông số đặc chế phẩm β-glucan trưng cấu trúc chế tạo phương mẫu pháp chiếu xạ β-glucan Mw thấp tan nước chế tạo - Xác định hoạt tính - Hoạt tính bắt gốc tự kháng oxi hóa in vitro β-glucan Mw β-glucan Mw thấp thấp tan nước chế tạo tan nước - Mw nồng độ - Xác định hoạt tính bảo β-glucan Mw thấp vệ, giải độc gan β- tan nước cho khả glucan Mw thấp tan bảo vệ giải nước mơ hình độc gan tốt chuột tổn thương gan ThS Nguyễn Xuân Tuấn ThS Nguyễn Xuân Tuấn Chế tạo β-glucan nguyên - Nguyên liệu β-glucan liệu từ nấm men bia (10 kg) từ bã men bia - Chế tạo β-glucan Mw phục vụ thấp tan nước nghiệm thí phương pháp chiếu - Mẫu β-glucan Mw xạ kết hợp xử lý hóa học thấp tan nước - Xác định đặc trưng thu cách chế phẩm β-glucan chiếu xạ kết hợp xử ly chế tạo phương hóa học với nồng độ H2O2 pH tối ưu pháp chiếu xạ - Xác định hoạt tính bảo - Các thông số đặc vệ, giải độc gan β- trưng cấu trúc glucan Mw thấp tan mẫu β-glucan Mw nước mơ hình thấp tan nước chuột tổn thương gan chế tạo - Xác định khả làm - Mw nồng độ giảm tác hại xạ β-glucan Mw thấp β-glucan Mw thấp tan tan nước cho khả nước chuột bảo vệ giải nhắt trắng độc gan tốt - Mw nồng độ β-glucan Mw thấp tan nước cho khả làm giảm tác hại xạ tốt CSL28 CSU28 ĐCSH ĐCCX TN25 TN11 Total ĐCSH ĐCCX TN25 TN11 2 2 2 2 4900 3410 5665 4258 4558 3380 1980 3250 2480 18809 05798 20153 10013 14362 19799 09334 03677 05374 13300 04100 14250 07080 05078 14000 06600 02600 03800 -1.1999 -.1800 -1.2441 -.4738 3358 -1.4409 -.6406 -.0054 -.2348 2.1799 8620 2.3771 1.3254 5759 2.1169 1.0366 6554 7308 36 30 42 36 30 20 13 30 21 62 38 71 50 71 48 26 35 29 Total 2773 10581 03741 1888 3657 13 48 ANOVA Sum of Squares df CSL3 CSU3 CSL7 CSU7 CSL10 CSU10 CSL14 CSU14 CSL21 Mean Square F Sig Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total 077 012 088 057 009 065 093 027 119 061 020 081 040 096 136 036 022 058 7 7 7 026 003 8.593 032 019 002 8.679 032 031 007 4.661 086 020 005 4.108 103 013 024 550 675 012 005 2.220 228 Between Groups Within Groups 064 085 021 021 999 479 Total Between Groups 149 027 009 2.259 224 Within Groups Total 016 043 004 Between Groups Within Groups 035 059 012 015 787 560 Total 093 CSU21 CSL28 CSU28 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total 015 036 051 055 089 144 026 052 078 7 CSL3 Duncan NT N Subset for alpha = 0.05 2 2 575 661 018 022 821 547 009 013 670 613 CSU3 ĐCCX TN11 TN25 ĐCSH Sig .005 009 Duncan NT N Subset for alpha = 0.05 1615 2085 2270 302 4180 1.000 ĐCCX TN11 TN25 ĐCSH Sig 0950 1355 1660 2 2 N CSU7 Subset for alpha = 0.05 ĐCCX TN11 TN25 ĐCSH 2 2 Duncan NT N 1150 2320 3155 073 2320 3155 4075 102 ĐCCX TN11 TN25 ĐCSH 2 2 ĐCCX TN11 ĐCSH TN25 Sig 2 2 0975 1555 2280 Sig .143 CSL10 N Subset for alpha = 0.05 Sig Duncan NT 3175 1.000 208 CSL7 Duncan NT 1555 2280 3315 070 CSU10 Subset for alpha = 0.05 2295 3675 3880 4100 314 Duncan NT ĐCCX TN11 TN25 ĐCSH Sig N 2 2 Subset for alpha = 0.05 1250 2195 2375 3135 067 CSL14 Duncan NT N ĐCCX ĐCSH TN25 TN11 Sig 2 2 CSU14 Subset for alpha = 0.05 3385 4860 5440 5690 195 Duncan NT N ĐCCX TN25 TN11 ĐCSH Sig 2 2 CSU21 CSL21 Duncan NT N ĐCCX TN11 ĐCSH TN25 Sig 2 2 Subset for alpha = 0.05 3825 4400 5130 5530 237 Duncan NT N ĐCCX TN11 TN25 ĐCSH Sig 2 2 CSL28 Duncan NT ĐCCX TN11 ĐCSH TN25 Sig N 2 2 Subset for alpha = 0.05 1665 2520 2605 3295 065 Subset for alpha = 0.05 2210 2625 2825 3425 272 CSU28 Subset for alpha = 0.05 3410 4258 4900 5665 211 Duncan NT N ĐCCX TN11 TN25 ĐCSH Sig 2 2 Subset for alpha = 0.05 1980 2480 3250 3380 292 Ảnh hưởng β-glucan Mw thấp và tan nước lên số lượng bạch cầu tổng số sau chiếu xạ Nghiệm thức ĐCSH ĐCCX 4,3 3,8 4,3 0,6 0,3 0,4 Thời gian sau chiếu xạ, ngày 10 14 21 3,9 6,6 0,9 0,7 0,5 5,1 4,9 6,1 1,1 0,8 0,3 4,3 6,7 3,1 1,42 2,22 1,43 5,7 2,76 3,51 1,2 1,19 1,01 28 5,84 3,27 3,15 1,25 1,34 1,21 0,6 0,7 0,6 0,8 0,84 0,35 TN25 TN11 1,1 1,6 0,6 0,61 0,64 0,97 0,8 1,2 2,5 0,9 0,85 0,97 5,2 6,4 3,5 3,11 4,8 3,36 2,13 3,86 4,26 1,89 2,69 3,39 2,47 3,92 6,36 3,54 2,98 2,64 Ảnh hưởng β-glucan Mw thấp tan nước lên lượng bạch cầu tổng số chuột sau chiếu xạ Số lượng bạch cầu tổng số, × 109/L Nghiệm thức NSCX NSCX 10 NSCX 14 NSCX 21 NSCX 28 NSCX ĐCSH 4,13a ± 0,17 4,5a ± 1,08 5,37a ± 0,37 4,7a ± 1,06 3,99a ± 0,88 4,09a ± 0,88 ĐCCX 0,43b ± 0,09 0,7b ± 0,12 0,73b ± 0,23 1,69b ± 0,27 1,13b ± 0,06 1,27b ± 0,04 TN25 0,63b ± 0,03 1,1b ± 0,29 1,5b ± 0,51 5,03a ± 0,84 3,42a ± 0,65 4,25a ± 1,14 TN11 0,66b ± 0,16 0,74b ± 0,12 0,91b ± 0,03 3,76ab ± 0,53 2,66ab ± 0,43 3,05ab ± 0,26 NSCX: Ngày sau chiếu xạ, ĐCSH: Nhóm Đối chứng sinh học, ĐCCX: Nhóm Đối chứng chiếu xạ, TN25: Nhóm cho uống β-glucan có Mw ~ 25 kDa, TN11: Nhóm cho uống β-glucan có Mw ~ 11 kDa Trong bảng, giá trị theo sau chữ giống khơng khác biệt có ý nghĩa thống kê (p