Khảo sát ảnh hưởng của chitosan đến sự sinh trưởng của cây lan endrobitim queen pink nuôi cấy in vitro

LỜI CẢM ƠN Người xưa có câu: “ Khơng thầy đố mày làm nên”, “Một chữ thầy, chữ thầy”, câu nói chưa phai mờ lòng người học trò dù thời gian không ngừng xoay chuyển Đối với riêng thân em, quãng thời gian tiếp tục ngồi ghế nhà trường thầy cơ, bạn bè khơng cịn nhiều, cịn chút để nhớ…em xin gửi tới người thầy, người cô người bạn lời cảm ơn sâu đậm sau năm tháng giảng đường đại học Lời đầu tiên, em xin cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Tôn Đức Thắng, Ban chủ nhiệm Khoa Khoa học ứng dụng môn Công nghệ sinh học, thầy cô truyền đạt kiến thức, kĩ chuyên ngành để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp chuẩn bị tốt cho công việc sau Em xin chân thành cảm ơn hướng dẫn tận tình Cô Trần Thị Dung, giảng viên Khoa Khoa học ứng dụng trường đại học Tôn Đức Thắng Dù cơng việc bận rộn suốt q trình em thực khóa luận tốt nghiệp, ln dành nhiều thời gian tâm huyết việc hướng dẫn.Với chia sẻ chuyên môn phương pháp nghiên cứu khoa học, ln góp ý, sửa chữa định hướng cho đề tài em thực Cảm ơn quan tâm, nhắc nhở, đơn đốc giúp em có thêm niềm tin cố gắng để hồn thành đề tài lựa chọn gặp khó khăn Em xin gửi lời cảm ơn đến Ông Phạm Đức Dũng, Trưởng trạm huấn luyện thực tập nông nghiệp, anh chị trạm tạo điều kiện tốt nhất, thuận lợi thời gian trang thiết bị cần thiết cho việc nghiên cứu em Với khóa luận tốt nghiệp này, em ln mong muốn đóng góp phần nhỏ sức việc ứng dụng Công nghệ sinh học vào nuôi cấy in vitro lan Tuy nhiên, cơng trình khó tránh khỏi thiếu xót non nớt thực tiễn ni trồng Kính mong thầy góp ý cảm thông! Em xin chân thành cảm ơn! Phan Huy Huy i TÓM TẮT y Đề tài “Khảo sát ảnh hưởng chitosan đến sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro” y Giáo viên hướng dẫn: Tiến sĩ Trần Thị Dung Đề tài tiến hành Phịng ni cấy mơ – Trạm huấn luyện thực tập nông nghiệp – Trung tâm khuyến nông Thành phố Hồ Chí Minh y Nội dung đề tài thực gồm thí nghiệm: * Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng chitosan, BA NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro * Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng chitosan - BA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro * Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng chitosan - NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink ni cấy in vitro * Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng chitosan – BA - NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro y Trong suốt trình nguyên cứu thu kết sau: - Thí nghiệm 1: chitosan nồng độ 20 ppm có hiệu cao việc kích thích sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro với chiều cao (2,46 cm), số (6,2 lá/cây) số lượng rễ (6,2 rễ/cây) - Thí nghiệm 2: NT B9 (Chitosan 100 ppm + BA 0,5 mg/l) giúp cho sinh trưởng tốt nuôi cấy NT khác thí nghiệm với chiều cao (2,06 cm), số (5,4 lá/cây), số rễ (3,4 rễ/cây) - Thí nghiệm 3: NT C5 (chitosan 60 ppp + NAA 0,5 mg/l) thích hợp cho phát triển chiều cao (2,36 cm), số (6,0 lá/cây) số rễ (4,4 rễ/cây) - Thí nghiệm 4: lan hai NT D4 (chitosan: 20 ppm + BA: 1.0 mg/l + NAA: 1.0 mg/l) B17 (chitosan: 100 ppm + BA 0.5 mg/l + NAA: 0.5 mg/l) sinh trưởng tốt có khác biệt có ý nghĩa với ni cấy nghiệm thức khác ii MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn i Tóm tắt ii Mục lục iii Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách hình vii Danh sách bảng viii Chương 1: MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC ĐÍCH – Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu Chương 2: TỔNG QUAN 2.1 SƠ LƯỢC VỀ CHITIN VÀ CHITOSAN 2.1.1 Giới thiệu chung chitin chitosan 2.1.2 Tính chất đặc điểm 2.1.3 Nguồn cung cấp chitin – chitosan 2.1.4 Phương pháp chế tạo chitin chitosan 2.1.5 Ứng dụng chitin chitosan 2.2 GIỚI THIỆU SƠ LƯỢC VỀ DENDROBIUM sp 12 2.2.1 Vị trí phân loại 12 2.2.2 Nguồn gốc – phân bố 13 2.2.3 Đặc điểm hình thái 14 2.2.4 Công dụng lan 18 2.2.5 Tình hình sản xuất lan nước 19 iii 2.3 SƠ LƯỢC VỀ KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO 20 2.3.1 Giới thiệu 20 2.3.2 Lịch sử phát triển kỹ thuật nhân giống in vitro 20 2.3.3 Mục đích ứng dụng 23 2.3.4 Tầm quan trọng nuôi cấy mô thực vật 25 2.3.5 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 26 Chương 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 30 3.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM 30 3.1.1 Thời gian 30 3.1.2 Địa điểm 30 3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 30 3.3 VẬT LIỆU THÍ NGHIỆM 31 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu 31 3.3.2 Trang thiết bị thí nghiệm 32 3.3.3 Hố chất mơi trường thí nghiệm 32 3.3.4 Điều kiện nuôi cấy 32 3.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 3.4.1 Bố trí thí nghiệm 33 3.4.2 Phương pháp xử lý số liệu 39 Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 40 4.1 THÍ NGHIỆM 1: Khảo sát ảnh hưởng chitosan, BA NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro 40 4.2 THÍ NGHIỆM 2: Khảo sát ảnh hưởng chitosan - BA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro 43 4.3 THÍ NGHIỆM 3: Khảo sát ảnh hưởng chitosan - NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro 46 4.4 THÍ NGHIỆM 4: Khảo sát ảnh hưởng chitosan - BA - NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink nuôi cấy in vitro 49 iv Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 54 5.1 KẾT LUẬN 54 5.2 ĐỀ NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 PHỤ LỤC 57 v DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BA : Benzyl – - aminopurin NAA : α – napthlen acetic acid EDTA : Ethylene diamin tetra acetic acid 2,4 D : Acid 2,4 – dichlorophenoxy acetic MS : Murashige Skoog (1962) Mw : Molecular weight KDa : Kilo Dalton NT : Nghiệm thức ĐC : Đối chứng vi DANH SÁCH CÁC HÌNH Trang Hình 2.1 Cấu trúc phân tử chitin Hình 2.2 Cấu trúc phân tử chitosan Hình 2.3 Dendrobium queen pink 12 Hình 2.4 Một vài loại hoa Dendrobium sp phổ biến 15 Hình 3.1 Phịng nuôi cấy mô 30 Hình 3.2 Mẫu lan dung để nuôi cấy in vitro 31 Hình 3.3 Mẫu chitosan dùng nguyên cứu 32 Hình 4.1a Ảnh hưởng chitosan, BA NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 42 Hình 4.1b Ảnh hưởng chitosan, BA NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 43 Hình 4.2 Ảnh hưởng chitosan – BA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 45 Hình 4.3 Ảnh hưởng chitosan – NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 48 Hình 4.4a Ảnh hưởng chitosan – BA – NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 51 Hình 4.4b Ảnh hưởng chitosan – BA – NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 52 Hình 4.4c Ảnh hưởng chitosan – BA – NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 53 vii DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 3.1 Thành phần môi trường MS 33 Bảng 3.2 Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng chitosan, BA NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink 34 Bảng 3.3 Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng chitosan - BA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink 36 Bảng 3.4 Các nghiệm khảo sát ảnh hưởng chitosan - NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink 37 Bảng 3.5 Các nghiệm khảo sát ảnh hưởng chitosan – BA - NAA lên sinh trưởng lan Dendrobium queen pink 39 Bảng 4.1 Ảnh hưởng mơi trường có bổ sung chitosan, BA NAA đến sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 40 Bảng 4.2 Ảnh hưởng mơi trường có bổ sung chitosan – BA đến sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 44 Bảng 4.3 Ảnh hưởng mơi trường có bổ sung chitosan – NAA đến sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 46 Bảng 4.4 Ảnh hưởng mơi trường có bổ sung chitosan – BA – NAA đến sinh trưởng lan Dendrobium queen pink sau 45 ngày nuôi cấy 50 viii Chương 1: MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong giới muôn màu lồi hoa, thật khơng q lời nói hoa lan “nữ hồng” Khơng có vẻ đẹp kiêu kỳ hoa hồng, không mang hương thơm nồng đượm, tao hoa sen, hoa nhài v.v… hoa lan… có tất Cùng với đa dạng giống loài đa dạng đến vơ màu sắc, hình dạng cánh hoa, kích thước hoa, hình dáng cây…của lồi hoa lan, điều mang đến cho người yêu hoa nhiều cảm giác thi vị nhìn ngắm chúng Trong loại lan Dendrobium loại có giá trị thương phẩm cao, với nhiều ưu điểm phong phú lồi, phân bố rộng rãi nên có đặc diểm hình thái đa dạng, dể trồng Là giống hoa cắt cành có giá trị kinh tế cao khả siêng hoa, cho nhiều cành, số lượng hoa cành nhiều Hơn nửa giống lan có phổ khí hậu sống rộng, thích hợp khu vực nhiệt đới, có Việt Nam Ngày nay, việc nhân giống trồng in vitro khơng cịn xa lạ nửa, với đóng góp vào nhiều thành tựu to lớn lĩnh vực nhân giống trồng, nói phương pháp tốt nhất, hiệu để nhân giống thực vật Bằng phương pháp tạo nhiều giống với thời gian ngắn, đa phần giống lan thương phẩm nhân giống phương pháp nuôi cấy mô Trước đây, người ta thường dùng mơi trường dinh dưỡng có bổ sung chất điều hịa tăng trưởng để ni cấy in vitro tế bào thực vật, nhiên chất điều hòa tăng trưởng đắt tiền làm tăng chi phí nên việc nguyên cứu bổ sung chất thay phần chất điều hòa tăng trưởng, giảm chi phí, thời gian ni cấy vấn đề đáng quan tâm Từ lâu chitosan biết đến nhiều ứng dụng nhiều lĩnh vực khác nông nghiệp, lâm nghiệp, công nghiệp, y học v.v…Một ứng dụng nghiên cứu gần khả kích sinh trưởng phát triển mô thực vật Nhiều nghiên cứu chứng minh chitosan đóng vai trị chất có khả kích thích hấp thu chất dinh dưỡng mơ thực vật, đồng thời cịn có tác dụng gia tăng hiệu ứng phytoalexin mô giúp cho khơng tăng trưởng nhanh mà cịn kháng lại số loại bệnh vi sinh vật gây nên Hơn nửa, nguồn nguyên liệu để chế biến chitosan dể tìm rẻ tiền phế liệu ngành thuỷ sản Được cho phép Bộ môn Công nghệ sinh học – Khoa Khoa học ứng dụng – Trường Đại học Tôn Đức Thắng, tiến hành thực đề tài: “Khảo sát ảnh hưởng chitosan đến sinh trưởng lan Dendrobium queen pink ni cấy in vitro” 1.2 MỤC ĐÍCH – Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI 1.2.1 Mục đích Xác định nồng độ chitosan thích hợp cho sinh trưởng lan Dendrobium queen pink, tiến tới thay giảm nồng độ chất tăng trưởng thực vật (BA, NAA v.v…) dùng nuôi cấy in vitro 1.2.2 Ý nghĩa Khảo sát ảnh hưởng chitosan ni cấy in vitro lan Dendrobium queen pink nhằm tìm chất bổ sung vào môi trường nuôi cấy in vitro để giảm hàm lượng chất điều hòa tăng trưởng mang lại hiệu cao vi nhân giống, tăng tính khích thích sinh trưởng giảm thời gian nuôi cấy in vitro Data file: TN - So la Title: TN – So la Function: ANOVA-1 Data case no to 55 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 11 Variable (SL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10 28.509 2.851 2.877 0.2375 Within 44 43.600 0.991 Total 54 72.109 Coefficient of Variation = 13.00% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 19.000 3.800 0.84 0.45 5.00 19.000 3.800 0.84 0.45 5.00 24.000 4.800 0.84 0.45 5.00 22.000 4.400 1.34 0.45 5.00 20.000 4.000 0.71 0.45 5.00 20.000 4.000 1.41 0.45 5.00 22.000 4.400 1.14 0.45 5.00 20.000 4.000 0.71 0.45 5.00 21.000 4.200 1.30 0.45 10 5.00 32.000 6.400 0.55 0.45 11 5.00 19.000 3.800 0.84 0.45 -Total 55.00 238.000 4.327 1.16 0.16 Within 1.00 Bartlett's test Chi-square = 6.756 Number of Degrees of Freedom = 10 Approximate significance = 0.748 Data file: TN - So re Title: TN - So re Function: ANOVA-1 Data case no to 55 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 11 Variable (SR) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10 15.527 1.553 1.708 0.0191 Within 44 40.000 0.909 Total 54 55.527 Coefficient of Variation = 15.13% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 11.000 2.200 1.10 0.43 5.00 11.000 2.200 0.84 0.43 5.00 12.000 2.400 0.71 0.43 5.00 16.000 3.200 0.45 0.43 5.00 12.000 2.400 1.14 0.43 5.00 12.000 2.400 0.89 0.43 5.00 12.000 2.400 0.71 0.43 5.00 11.000 2.200 0.84 0.43 5.00 14.000 2.800 1.10 0.43 10 5.00 19.000 3.800 1.30 0.43 11 5.00 11.000 2.200 1.10 0.43 -Total 55.00 141.000 2.564 1.01 0.14 Within 0.95 Bartlett's test Chi-square = 5.661 Number of Degrees of Freedom = 10 Approximate significance = 0.843 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.9090 Error Degrees of Freedom = 44 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.215 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 2.200 2.200 2.400 3.200 2.400 2.400 2.400 2.200 2.800 3.400 2.200 Ranked Order C C BC AB BC BC BC C B A C Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 3.400 3.200 2.800 2.400 2.400 2.400 2.400 2.200 2.200 2.200 2.200 A AB B BC BC BC BC C C C C Data file: TN - Trong luong Title: TN - Trong luong Function: ANOVA-1 Data case no to 55 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 11 Variable (TL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10 0.057 0.006 1.231 0.0198 Within 44 0.203 0.005 Total 54 0.260 Coefficient of Variation = 19.43% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 0.438 0.087 0.03 0.03 5.00 1.009 0.202 0.19 0.03 5.00 0.531 0.106 0.03 0.03 5.00 0.583 0.117 0.03 0.03 5.00 0.577 0.115 0.05 0.03 5.00 0.615 0.123 0.03 0.03 5.00 0.614 0.123 0.02 0.03 5.00 0.695 0.139 0.06 0.03 5.00 0.905 0.180 0.05 0.03 10 5.00 0.875 0.175 0.04 0.03 11 5.00 0.563 0.113 0.02 0.03 -Total 55.00 7.405 0.134 0.07 0.01 Within 0.07 Bartlett's test Chi-square = 45.017 Number of Degrees of Freedom = 10 Approximate significance = 0.000 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.005000 Error Degrees of Freedom = 44 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.09013 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 0.0870 0.2000 0.1100 0.1200 0.1200 0.1200 0.1200 0.1400 0.1800 0.1800 0.1100 Ranked Order C A BC BC BC BC BC BC AB AB BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 0.2000 0.1800 0.1800 0.1400 0.1200 0.1200 0.1200 0.1200 0.1100 0.1100 0.0900 A AB AB BC BC BC BC BC BC BC C Data file: TN - Chieu cao cay Title: Tn - Chieu cao cay Function: ANOVA-1 Data case no to 55 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 11 Variable (CC) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10 3.347 0.335 4.563 0.0002 Within 44 3.228 0.073 Total 54 6.575 Coefficient of Variation = 15.78% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 7.000 1.400 0.34 0.12 5.00 7.800 1.600 0.11 0.12 5.00 8.300 1.660 0.34 0.12 5.00 8.700 1.740 0.23 0.12 5.00 10.200 2.040 0.39 0.12 5.00 11.800 2.360 0.29 0.12 5.00 9.400 1.880 0.13 0.12 5.00 9.100 1.820 0.16 0.12 5.00 8.600 1.720 0.37 0.12 10 5.00 8.300 1.660 0.11 0.12 11 5.00 8.000 1.600 0.29 0.12 -Total 55.00 97.200 1.778 0.35 0.05 Within 0.27 Bartlett's test Chi-square = 13.764 Number of Degrees of Freedom = 10 Approximate significance = 0.184 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.07300 Error Degrees of Freedom = 44 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.3444 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 1.400 1.600 1.660 1.740 2.040 2.360 1.880 1.820 1.720 1.660 1.600 Ranked Order C C BC BC AB A B BC BC BC BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 8 10 11 = = = = = = = = = = = 2.360 2.040 1.880 1.820 1.740 1.720 1.660 1.660 1.600 1.600 1.400 A AB B BC BC BC C BC BC BC C Data file: TN - So la Title: TN - So la Function: ANOVA-1 Data case no to 55 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 11 Variable (SL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10 17.600 1.760 2.333 0.0264 Within 44 33.200 0.755 Total 54 50.800 Coefficient of Variation = 10.68% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 19.000 3.800 0.84 0.39 5.00 22.000 4.400 1.22 0.39 5.00 28.000 5.600 0.84 0.39 5.00 26.500 5.300 0.71 0.39 5.00 26.500 5.300 0.89 0.39 5.00 30.000 6.000 0.89 0.39 5.00 27.500 5.500 1.00 0.39 5.00 24.000 4.800 0.45 0.39 5.00 24.000 4.400 0.71 0.39 10 5.00 24.000 4.400 0.55 0.39 11 5.00 22.000 4.400 1.14 0.39 -Total 55.00 272.000 4.900 0.97 0.13 Within 0.87 Bartlett's test Chi-square = 5.843 Number of Degrees of Freedom = 10 Approximate significance = 0.828 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.7550 Error Degrees of Freedom = 44 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.108 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 3.800 4.400 5.600 5.300 5.300 6.000 5.500 4.800 4.400 4.400 4.400 Ranked Order C BC AB B B A AB BC BC BC BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 6.000 5.600 5.500 5.300 5.300 4.800 4.400 4.400 4.400 4.400 3.800 A AB AB B B BC BC BC BC BC C Data file: TN - So re Title: TN - So re Function: ANOVA-1 Data case no to 55 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 11 Variable (SR) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10 25.527 2.553 2.674 0.0120 Within 44 42.000 0.955 Total 54 67.527 Coefficient of Variation = 18.11% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 11.000 2.200 1.10 0.44 5.00 14.000 2.800 1.48 0.44 5.00 14.000 2.800 0.84 0.44 5.00 14.000 2.800 0.84 0.44 5.00 16.000 3.200 1.10 0.44 5.00 22.000 4.400 0.55 0.44 5.00 13.000 2.600 0.55 0.44 5.00 12.000 2.400 1.10 0.44 5.00 14.000 2.800 0.84 0.44 10 5.00 12.000 2.400 1.14 0.44 11 5.00 12.000 2.400 0.84 0.44 -Total 55.00 154.000 2.800 1.12 0.15 Within 0.98 Bartlett's test Chi-square = 6.326 Number of Degrees of Freedom = 10 Approximate significance = 0.787 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.9550 Error Degrees of Freedom = 44 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.246 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 2.200 2.800 2.800 2.800 3.200 4.400 2.600 2.400 2.800 2.400 2.400 Ranked Order C BC BC BC AB A BC BC BC BC BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 4.400 3.200 2.800 2.800 2.800 2.800 2.600 2.400 2.400 2.400 2.200 A AB BC BC BC BC BC BC BC BC C Data file: TN - Trong luong Title: Tn - Trong luong Function: ANOVA-1 Data case no to 55 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 11 Variable (TL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10 0.052 0.005 1.513 0.0470 Within 44 0.150 0.003 Total 54 0.202 Coefficient of Variation = 16.43% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 0.438 0.087 0.03 0.03 5.00 0.727 0.145 0.05 0.03 5.00 0.654 0.131 0.04 0.03 5.00 0.749 0.150 0.05 0.03 5.00 0.863 0.173 0.12 0.03 5.00 1.036 0.207 0.02 0.03 5.00 0.593 0.119 0.04 0.03 5.00 0.576 0.115 0.04 0.03 5.00 0.693 0.139 0.08 0.03 10 5.00 0.685 0.137 0.07 0.03 11 5.00 0.561 0.112 0.04 0.03 -Total 55.00 7.575 0.138 0.06 0.01 Within 0.06 Bartlett's test Chi-square = 16.860 Number of Degrees of Freedom = 10 Approximate significance = 0.078 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.003000 Error Degrees of Freedom = 44 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.06981 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 0.0870 0.1500 0.1300 0.1500 0.1700 0.2100 0.1200 0.1200 0.1400 0.1400 0.1100 Ranked Order C ABC BC ABC AB A BC BC BC BC BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 = = = = = = = = = = = 0.2100 0.1700 0.1500 0.1500 0.1400 0.1400 0.1300 0.1200 0.1200 0.1100 0.09000 A AB ABC ABC BC BC BC BC BC BC C Data file: TN - Chieu cao cay Title: TN - Chieu cao cay Function: ANOVA-1 Data case no to 105 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 21 Variable (CC) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 20 3.317 0.166 5.114 0.0000 Within 84 2.724 0.032 Total 104 6.041 Coefficient of Variation = 10.76% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 7.000 1.400 0.07 0.08 5.00 8.400 1.680 0.33 0.08 5.00 9.000 1.800 0.37 0.08 5.00 8.600 1.720 0.16 0.08 5.00 10.000 2.000 0.22 0.08 5.00 7.400 1.480 0.08 0.08 5.00 8.000 1.600 0.10 0.08 5.00 7.500 1.500 0.10 0.08 5.00 7.600 1.520 0.11 0.08 10 5.00 8.800 1.760 0.15 0.08 11 5.00 8.400 1.680 0.08 0.08 12 5.00 9.200 1.840 0.28 0.08 13 5.00 8.800 1.760 0.15 0.08 14 5.00 7.800 1.560 0.11 0.08 15 5.00 7.500 1.500 0.12 0.08 16 5.00 7.100 1.420 0.11 0.08 17 5.00 8.700 1.740 0.11 0.08 18 5.00 10.500 2.100 0.19 0.08 19 5.00 9.100 1.820 0.19 0.08 20 5.00 7.900 1.580 0.08 0.08 21 5.00 8.500 1.700 0.22 0.08 -Total 105.00 175.800 1.674 0.24 0.02 Within 0.18 Bartlett's test Chi-square = 35.545 Number of Degrees of Freedom = 20 Approximate significance = 0.017 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.03200 Error Degrees of Freedom = 84 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.2250 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 1.400 1.680 1.800 1.720 2.000 1.480 1.600 1.500 1.520 1.760 1.680 1.840 1.760 1.560 1.500 1.420 1.740 2.100 1.820 1.580 1.700 J CDEFGHI BCDE CDEFGH AB IJ DEFGHIJ HIJ GHIJ CDEF CDEFGHI BC CDEF FGHIJ HIJ J CDEFG A BCD EFGHIJ CDEFGHI Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 18 12 19 13 10 17 21 11 20 14 15 16 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 2.100 2.000 1.840 1.820 1.800 1.760 1.760 1.740 1.720 1.700 1.680 1.680 1.600 1.580 1.560 1.520 1.500 1.500 1.480 1.420 1.400 A AB BC BCD BCDE CDEF CDEF CDEFG CDEFGH CDEFGHI CDEFGHI CDEFGHI DEFGHIJ EFGHIJ FGHIJ GHIJ HIJ HIJ IJ J J Data file: TN - So la Title: Tn - So la Function: ANOVA-1 Data case no to 105 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 21 Variable (SL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 20 77.333 3.867 5.927 0.0000 Within 84 54.800 0.652 Total 104 132.133 Coefficient of Variation = 16.60% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 19.000 3.800 0.84 0.36 5.00 27.000 5.400 1.14 0.36 5.00 28.000 5.600 0.55 0.36 5.00 23.000 4.600 1.14 0.36 5.00 32.000 6.400 0.89 0.36 5.00 21.000 4.200 0.84 0.36 5.00 20.000 4.000 0.71 0.36 5.00 19.000 3.800 0.45 0.36 5.00 18.000 3.600 0.55 0.36 10 5.00 23.000 4.600 0.55 0.36 11 5.00 26.000 5.200 0.45 0.36 12 5.00 25.000 5.000 1.00 0.36 13 5.00 21.000 4.200 0.45 0.36 14 5.00 24.000 4.800 0.45 0.36 15 5.00 24.000 4.800 0.45 0.36 16 5.00 25.000 5.000 0.71 0.36 17 5.00 25.000 5.000 0.71 0.36 18 5.00 35.000 7.000 0.71 0.36 19 5.00 29.000 5.800 1.30 0.36 20 5.00 27.000 5.400 1.14 0.36 21 5.00 20.000 4.000 1.00 0.36 -Total 105.00 511.000 4.867 1.13 0.11 Within 0.81 Bartlett's test Chi-square = 18.691 Number of Degrees of Freedom = 20 Approximate significance = 0.542 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.6520 Error Degrees of Freedom = 84 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.016 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 3.800 5.400 5.600 4.600 6.400 4.200 4.000 3.800 3.600 4.600 5.200 5.000 4.200 4.800 4.800 5.000 5.000 7.000 5.800 5.400 4.000 Ranked Order GH BCD BCD DEFGH AB EFGH FGH GH H DEFGH CDE CDEF EFGH CDEFG CDEFG CDEF CDEF A BC BCD FGH Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 18 19 20 11 17 16 12 14 15 10 13 21 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 7.000 6.400 5.800 5.600 5.400 5.400 5.200 5.000 5.000 5.000 4.800 4.800 4.600 4.600 4.200 4.200 4.000 4.000 3.800 3.800 3.600 A AB BC BCD BCD BCD CDE CDEF CDEF CDEF CDEFG CDEFG DEFGH DEFGH EFGH EFGH FGH FGH GH GH H Data file: TN - So re Title: TN - So re Function: ANOVA-1 Data case no to 105 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 21 Variable (SR) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 20 50.533 2.527 2.884 0.0004 Within 84 73.600 0.876 Total 104 124.133 Coefficient of Variation = 17.95% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 11.000 2.200 0.84 0.42 5.00 13.000 2.600 0.55 0.42 5.00 16.000 3.200 0.84 0.42 5.00 18.000 3.600 0.55 0.42 5.00 20.000 4.000 1.22 0.42 5.00 11.000 1.800 0.45 0.42 5.00 8.000 1.600 0.89 0.42 5.00 9.000 1.800 0.84 0.42 5.00 8.000 1.600 0.89 0.42 10 5.00 10.000 2.000 0.71 0.42 11 5.00 14.000 2.800 0.84 0.42 12 5.00 14.000 2.800 0.45 0.42 13 5.00 11.000 2.200 1.30 0.42 14 5.00 12.000 2.400 0.55 0.42 15 5.00 11.000 2.200 0.84 0.42 16 5.00 11.000 2.200 0.84 0.42 17 5.00 10.000 2.000 1.00 0.42 18 5.00 16.000 3.200 1.30 0.42 19 5.00 17.000 3.400 1.14 0.42 20 5.00 17.000 3.400 1.14 0.42 21 5.00 13.000 2.600 1.52 0.42 -Total 105.00 266.000 2.533 1.09 0.11 Within 0.94 Bartlett's test Chi-square = 16.593 Number of Degrees of Freedom = 20 Approximate significance = 0.679 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.8760 Error Degrees of Freedom = 84 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.177 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 1.800 2.600 3.200 3.600 4.000 1.800 1.600 1.800 1.600 2.000 2.800 2.800 2.200 2.400 2.200 2.200 2.000 3.200 3.400 3.400 2.600 Ranked Order EF BCDEF ABCD AB A EF F EF F EF BCDE BCDE DEF CDEF DEF DEF EF ABCD ABC ABC BCDEF Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 19 20 18 11 12 21 14 16 13 15 17 10 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 4.000 3.600 3.400 3.400 3.200 3.200 2.800 2.800 2.600 2.600 2.400 2.200 2.200 2.200 2.000 2.000 1.800 1.800 1.800 1.600 1.600 A AB ABC ABC ABCD ABCD BCDE BCDE BCDEF BCDEF CDEF DEF DEF DEF EF EF EF EF EF F F Data file: TN - Trong luong Title: TN - Trong luong Function: ANOVA-1 Data case no to 105 One way ANOVA grouped over variable (NT) with values from to 21 Variable (TL) A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 20 0.101 0.005 3.380 0.0000 Within 84 0.126 0.001 Total 104 0.227 Coefficient of Variation = 13.84% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 5.00 0.358 0.072 0.02 0.02 5.00 0.635 0.127 0.06 0.02 5.00 0.607 0.121 0.04 0.02 5.00 0.506 0.101 0.04 0.02 5.00 0.984 0.197 0.05 0.02 5.00 0.446 0.089 0.03 0.02 5.00 0.458 0.092 0.03 0.02 5.00 0.453 0.091 0.04 0.02 5.00 0.423 0.085 0.03 0.02 10 5.00 0.464 0.093 0.04 0.02 11 5.00 0.827 0.165 0.04 0.02 12 5.00 0.632 0.126 0.03 0.02 13 5.00 0.488 0.098 0.03 0.02 14 5.00 0.634 0.127 0.04 0.02 15 5.00 0.513 0.103 0.04 0.02 16 5.00 0.539 0.108 0.02 0.02 17 5.00 0.690 0.138 0.04 0.02 18 5.00 0.865 0.173 0.05 0.02 19 5.00 0.550 0.110 0.04 0.02 20 5.00 0.483 0.097 0.04 0.02 21 5.00 0.460 0.092 0.03 0.02 -Total 105.00 12.015 0.114 0.05 0.00 Within 0.04 Bartlett's test Chi-square = 8.843 Number of Degrees of Freedom = 20 Approximate significance = 0.985 Data File : Keyboard Function : RANGE Error Mean Square = 0.001000 Error Degrees of Freedom = 84 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.03977 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 0.07000 0.1300 0.1200 0.1000 0.2000 0.09000 0.09000 0.09000 0.09000 0.09000 0.1700 0.1300 0.1000 0.1300 0.1000 0.1100 0.1400 0.1700 0.1100 0.1000 0.09000 Ranked Order F CD CDE DEF A EF EF EF EF EF AB CD DEF CD DEF CDE BC AB CDE DEF EF Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 11 18 17 14 12 19 16 13 20 15 21 10 = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = 0.2000 0.1700 0.1700 0.1400 0.1300 0.1300 0.1300 0.1200 0.1100 0.1100 0.1000 0.1000 0.1000 0.1000 0.09000 0.09000 0.09000 0.09000 0.09000 0.09000 0.07000 A AB AB BC CD CD CD CDE CDE CDE DEF DEF DEF DEF EF EF EF EF EF EF F ... - β - 1,4 – D - glucosamine Hay gọi poly β - 1,4 – – amino – – desoxy – D - glucosamin Trong phân tử chitosan có chứa nhóm chức –OH, -NHCOCH3 mắt xích N – acetyl – D - glucosamine nhóm –OH, -NH2... nghiệm - Hóa chất: Cồn 70% để khử trùng - Môi trường nuôi cấy mô: môi trường MS (Murashige – Skoog, 1962) - Đường: 15 g/l - Agar: g/l - Nước dừa : 200 ml nước dừa/1l môi trường - pH 5,8 - Các... Phịng ni cấy mơ - Trung tâm cơng nghệ sinh học Tp Hồ Chí Minh Cây lan in vitro dùng làm mẫu cấy có đặc điểm chung sau - Chiều cao: 1,0 ± 0,2 cm - Số lá: - lá/cây - Số rễ: – rễ/cây - Trọng lượng