Hiệu quả kháng khuẩn của chitosan từ phụ phẩm tôm đối với vi khuẩn gây bệnh viêm vú trên bò sữa

Chitin là một polymer sinh học có nhiều trong đầu và vỏ tôm (chiếm 17% tính theo vật chất khô). Chitosan là một dẫn xuất của chitin với nhiều tính năng độc đáo và đa dạng ứng dụng. Chitosan không độc, có tính tương thích sinh học, thân thiện môi trường, có thể sử dụng trong nhiều ngành (dược, y sinh, thực phẩm, xử lý nước thải,…). Bài viết trình bày hiệu quả kháng khuẩn của chitosan từ phụ phẩm tôm đối với vi khuẩn gây bệnh viêm vú trên bò sữa.

CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC 36 Thocino A., Xiccato G., Carraro L and Jimenez G (2005) Effect of diet supplementation with Toyocerin (Bacillus cereus var toyoi) on performance and health of growingrabbits World Rabbit Sci., 13(1): 17-28 37 Ratcliffe B., Cole C.B., Fuller R and Newport M.J (1986) The effect of yogurt and milk fermented with a porcine intestinal strain of Lactobacillus reuteri on the performance and gastrointestinal flora of pigs weaned at days of age Food Microbiol., 3: 203-11 38 Reid G., Sander M.E., Gaskins H.R., Gibson G.R., Mercenier A., Rastall R., Roberfroid M., Rowland I., Cherbut C and Klaenhammer T.R (2003) New scientific paradigms for probiotics and prebiotics J Clin Gastroentrol., 37: 105-18 39 Russell J.B and Rychlik J.L (2001) Factors that alter rumen microbial ecology Sci., 292(5519): 1119-22 40 Xiaolu L., Hai Y., Le Lv., Xu Q., Yin Ch., Zhang K., Wang P and Hu J (2012) Growth Performance and Meat Quality of Broiler Chickens Supplemented with Bacillus licheniformis in Drinking Water Asian-Aust J Anim Sci., 25(5): 682-89 41 Yeo J and Kim K.I (1997) Effect of feeding diets containing an antibiotic, a probiotic, oryucca extract on growth and intestinal urease activity in broiler chicks Poul Sci., 76(2): 381-85 42 Yu H.F., Wang A.N., Li X.J and Qiao S.Y (2008) Effect of viable Lactobacillus fermentum  on the growth performance, nutrient digestibility and immunity of weaned pigs. J. Anim Feed Sci., 17: 61-69.  43 Zani J.L.,Weykamp da Cruz F., Freitas dos Santos A and Gil-Turnes C (1998) Effect of probiotic CenBiot on the control of diarrhea and feed efficiency in pigs J App Microbiol., 84(1): 68-71 44 Zhao P.Y and Kim I.H (2015) Effect of direct-fed microbial on growth performance, nutrient digestibility, fecal noxious gas emission, fecal microbial flora and diarrhea score in weanling pigs.  Anim Feed Sci Tech., 200: 86-92 45 Zimmermann J.A., Fusari M.L., Rossler E., Blajman J.E., Romero S.A and Astesana D.M (2016) Effects of probiotics in swines growth performance: a metaanalysis of randomized controlled trials. Anim Feed Sci Tech., 219: 280-93.  HIỆU QUẢ KHÁNG KHUẨN CỦA CHITOSAN TỪ PHỤ PHẨM TÔM ĐỐI VỚI VI KHUẨN GÂY BỆNH VIÊM VÚ TRÊN BỊ SỮA Ngơ Hồng Phượng1*, Nguyễn Quỳnh Thương2 Trần Vân Ty2 Ngày nhận báo: 11/11/2021 - Ngày nhận phản biện: 01/12/2021 Ngày báo chấp nhận đăng: 16/12/2021 TÓM TẮT Chitin polymer sinh học có nhiều đầu vỏ tơm (chiếm 17% tính theo vật chất khơ) Chitosan dẫn xuất chitin với nhiều tính độc đáo đa dạng ứng dụng Chitosan không độc, có tính tương thích sinh học, thân thiện mơi trường, sử dụng nhiều ngành (dược, y sinh, thực phẩm, xử lý nước thải, …) Chitosan nghiên cứu nhiều với vai trò chất phụ gia thay kháng sinh nhờ đặc tính kháng khuẩn, kháng viêm, chống oxy hố, kích thích miễn dịch, hỗ trợ cầm máu Trong chăn ni bị sữa, việc sử dụng kháng sinh để điều trị bệnh viêm vú điều bắt buộc, điều gây nên số hậu đề kháng kháng sinh, tồn dư kháng sinh sữa, loại bỏ sữa giai đoạn điều trị, gây ảnh hưởng lớn đến kinh tế Việc tìm kiếm nguồn nguyên liệu thay kháng sinh điều cần thiết chăn ni bị sữa chitosan xem giải pháp tiềm Thí nghiệm bước đầu khảo sát tính kháng khuẩn chitosan phịng thí nghiệm thực nhằm dị tìm nồng độ liều dùng tối ưu chitosan, gồm thí nghiệm riêng biệt Kết cho thấy chitosan/oligochitosan kết hợp tinh dầu cam chanh cho hiệu kháng khuẩn tốt nhóm vi khuẩn gây viêm vú Khi điều chỉnh mức pH chitosan mức lớn cho kết kháng khuẩn cao Như vậy, chitosan giải pháp tiềm cho việc thay kháng sinh sử dụng điều trị bệnh viêm vú bò sữa Hiệu chitosan chứng minh phịng thí nghiệm, cân nhắc sử dụng thực tế chăn nuôi trang trại bị sữa tương lai Từ khóa: Chitosan, thay kháng sinh, viêm vú, bò sữa Trường Đại học Nơng lâm Thành phố Hồ Chí Minh Cơng ty cổ phần Việt Nam Food *Tác giả liên hệ: TS Ngô Hồng Phượng, Đại học Nông Lâm TP HCM Điện thoại: 0946721010; Email: phuong.ngohong@ hcmuaf.edu.vn KHKT Chăn nuôi số 274 - tháng năm 2022 51 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC ABSTRACT Antibacterial effects of chitosan from shimp waste on Bacteria strains causing bovine mastitis Chitin is a biopolymer abundant in shrimp heads and shells (17% dry matter) Chitosan is a derivative of chitin with many unique features and diverse applications Chitosan is non-toxic, biocompatible, environmentally friendly, and it can be used in many industries (pharmaceutical, biomedical, food, wastewater treatment, ) Chitosan has been extensively studied as an alternative for antibiotics thanks to its antibacterial, anti-inflammatory, antioxidant, immune-stimulating, and hemostatic properties In dairy farming, using antibiotics for treating bovine mastitis leads to antibiotic resistance, antibiotic residues in milk, rejection of milk during treatment, causing great economic loss Finding alternative solution for antibiotics is essential in dairy farming and chitosan is proven as a potential option The initial experiment - to investigate the antibacterial activity of chitosan in the laboratory - was carried out to evaluate the optimal concentration and dosage of chitosan, including different experiments The results showed that chitosan/oligochitosan combined with citrus essential oil showed the best antibacterial effect against the bacteria strains causing mastitis When adjusting pH of chitosan to higher than 5, antibacterial results were improved It, thềoreconclusion, chitosan is a very potential solution to replace antibiotics used in the treatment of mastitis in dairy cows The effectiveness of chitosan has been proven in the laboratory, which can be considered for practical use in dairy farms in the future Keywords: Chitosan, alternative antibiotic, mastitis, dairy cows ĐẶT VẤN ĐỀ Các bệnh viêm nhiễm đường sinh sản viêm vú viêm tử cung thường gặp bò sữa dẫn đến thiệt hại cho ngành giảm sản lượng (đối với bệnh viêm vú, sản lượng sữa giảm 30% thất thoát); chất lượng sữa giảm khả sinh sản Theo khảo sát Ba Vì, Hà Nội cho thấy 22% bò sữa bị viêm vú lâm sàng 40% bò sữa trại bị viêm vú cận lâm sàng (Nguyen ctv, 2015) Bệnh viêm vú thường dòng vi khuẩn tụ cầu (Staphylococcus spp.) xử lý cách sử dụng kháng sinh Tuy nhiên, việc điều trị kháng sinh có nhược điểm việc phải đổ bỏ sữa thời gian điều trị (3-5 ngày), nguy tồn dư kháng sinh sữa gây lo ngại cho người tiêu dùng Đồng thời, việc điều trị kháng sinh thể hiệu tình trạng kháng kháng sinh xảy đưa đến nguy kháng kháng sinh vật nuôi, sau truyền sang người Việc tìm kiếm chất thay cho kháng sinh phòng điều trị bệnh chăn nuôi xu hướng quan tâm giới Chitosan, polymer sinh học điều chế từ chitin thành phần lớp 52 vỏ giáp xác, trùng nấm, với đặc tính khơng độc, tương thích sinh học, thân thiện mơi trường, nghiên cứu ứng dụng nhiều ngành (dược, y sinh, thực phẩm, xử lý nước thải, …) Chitosan xem giải pháp tiềm nhằm thay kháng sinh chăn ni nhờ đặc tính kháng khuẩn, kích thích miễn dịch kích thích tăng trưởng; chitosan sử dụng thuốc thú y để phòng điều trị bệnh thú chất phụ gia kích thích tăng trưởng, tăng khả tiêu hoá, giảm viêm giảm stress oxy hố, kích hoạt miễn dịch Các nghiên cứu cho thấy, chitosan có khả ức chế nhiều loại vi khuẩn gây bệnh bị sữa, ví dụ vi khuẩn tụ cầu (Staphylococcus spp., S aureus S xylosus) (Felipe ctv, 2019), Pseudomonas sp (Aguayo ctv, 2020) gây bệnh viêm vú, vi khuẩn Intrauterine pathogenic E.coli (IUPEC) (Jeon ctv, 2016) gây bệnh viêm tử cung bò sữa; vi khuẩn E.coli, Samonella gây bệnh tiêu chảy bê (Alam ctv, 2012) Đối với bệnh viêm vú bò sữa, chitosan báo cáo có tiềm việc kiểm sốt bệnh viêm vú bò sữa (Cheng Han, 2020), thể khả kiểm sốt KHKT Chăn ni số 274 - tháng năm 2022 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC phát triển vi khuẩn S aureus khả kích thích miễn dịch vật nuôi bị nhiễm bệnh (Moon ctv, 2007) Khả tạo màng sinh học chủng vi khuẩn gây viêm vú lý dẫn đến thất bại việc điều trị viêm vú kháng sinh Asli ctv, 2017; Felipe ctv, 2019; Orellano ctv, 2019; (Aguayo ctv, 2020) Các nghiên cứu tác giả cho thấy, chitosan có khả ức chế việc hình thành màng sinh học vi khuẩn phá hủy màng sinh học vi khuẩn hình thành chủng vi khuẩn gây bệnh viêm vú có khả kháng kháng sinh methicillin: MRSA 1158c chủng vi khuẩn 2117 siêu tạo màng (Asli ctv, 2017) Ngoài ra, bổ sung chitosan vào loại kháng sinh Tilmicosin, cloxacillin (là loại kháng sinh thường dùng điều trị viêm vú) giúp tăng cường hiệu diệt khuẩn kháng sinh (Breser ctv, 2018) Như vậy, chitosan thể tiềm điều trị viêm vú sử dụng độc lập kết hợp với kháng sinh liều thấp Các nghiên cứu khác khẳng định khả tác động chitosan lên vi khuẩn gây bệnh viêm vú có khả tạo màng sinh học Staphylococcus spp (S aureus S xylosus) (Felipe ctv, 2019; Orellano ctv, 2019), Pseudomonas sp (Aguayo ctv, 2020) bệnh viêm vú lưu hành tại trang trại bò sữa tỉnh Tây Ninh Nghiên cứu thực phịng thí nghiệm để xác định khả kháng khuẩn chitosan chủng vi khuẩn gây Các mẫu chitosan, oligochitosan sử dụng cho nghiên cứu trình bày Bảng VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng Thí nghiệm tiến hành chủng vi khuẩn gây bệnh viêm vú bò sữa bao gồm Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus uberis, Streptococcus agalactiae, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli Các chủng vi khuẩn phân lập từ bò bị viêm vú trang trại bò sữa Vinamilk thuộc tỉnh Tây Ninh Hình Các chủng vi khuẩn K pneumoniae, E coli, S aureus, S epidermidic S.agalactiae phân lập từ trại bò sử dụng cho thử nghiệm Bảng Thông tin mẫu chitosan, oligochitosan sử dụng cho nghiên cứu Tên sản phẩm Chitosan phân tử lượng thấp Chitosan phân tử lượng TB Chitosan phân tử lượng TB Chitosan Oligochitosan Mã sản phẩm CTO-LV01 CTO-MV01 CTO-MV02 CTIC15 COSL-02 Độ nhớt, cPs 111,5 185,3 843,6 < 10 Thành phần Trạng thái Chitosan từ vỏ tôm Chitosan từ vỏ tôm Chitosan từ vỏ tôm Chitosan từ vỏ tôm, tinh dầu cam Oligochitosan từ vỏ tôm Dạng vảy Dạng vảy Dạng vảy Dạng lỏng Dạng lỏng Axít acetic 99,5%, sản xuất XiLong Scientific Co., Ltd., Trung Quốc Môi trường nuôi cấy vi khuẩn Muller Hinton Agar (MHA) dạng bột, sản xuất HiMedia Laboratories Pvt Ltd., Ấn Độ Chitosan sản xuất Công ty Cổ phần Việt Nam Food, Việt Nam KHKT Chăn nuôi số 274 - tháng năm 2022 53 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC 2.2 Phương pháp Các chủng vi khuẩn gây bệnh viêm vú phân lập từ trại giữ đĩa thạch bảo quản tủ mát 40C, sử dụng vòng ngày Sử dụng phương pháp đục lỗ thạch (giếng kháng khuẩn) để xác định hoạt tính kháng khuẩn chitosan Hình Minh họa phương pháp đục lỗ thạch Chuẩn bị đĩa thạch ni cấy cách hịa tan 39g mơi trường MHA bột 1.000ml nước cất, sau hấp tiệt trùng 1210C 15 phút đổ thạch vào đĩa petri Chuẩn bị huyễn dịch vi khuẩn có nồng độ 108 cfu/ml cho chủng vi khuẩn cách so độ đục huyễn dịch vi khuẩn nước cất với độ đục chuẩn MacFarland 0,5 Sử dụng micropipet để hút 100ml huyễn dịch vi khuẩn trãi vào đĩa thạch MHA Tiến hành đục lỗ thạch đĩa trải vi khuẩn với đường kính lỗ 9mm, kí hiệu lỗ đục Nạp 120ml dung dịch chitosan tương ứng vào lỗ ký hiệu Các đĩa thạch sau ủ nhiệt độ 370C quan sát, đo đường kính vịng kháng khuẩn sau 24h Các chitosan dạng vảy CTO-LV01, CTO-MV01 CTO-MV02 hịa tan dung dịch axít acetic 1% với nồng độ khác để xác định nồng độ chitosan phù hợp Các chitosan dạng lỏng CTIC15, COSL02 OLIC25 sử dụng TN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Thực tổng số TN với mục đích tìm loại chitosan có tính kháng khuẩn tốt nồng độ chitosan kháng khuẩn tối đa Những TN dò tìm loại trừ, 54 bắt đầu nồng độ bản, sau TN chọn loại chitosan nồng độ chitosan phù hợp Các TN liệt kê trình tự theo thời gian thực 3.1 Thí nghiệm Khảo sát khả kháng khuẩn, diệt khuẩn loại chitosan khảo sát nồng độ kháng khuẩn phù hợp chủng vi khuẩn phân lập S.aureus, S.epidermidis, S.uberis, S.agalactiae, K.pneumoniae E.coli Chitosan dạng vảy CTO-LV01, CTOMV01 CTO-MV02 hòa tan dung dịch axít acetic 1% với nồng độ Bảng Chitosan CTIC15, oligochitosan COSL-02 dạng lỏng sử dụng trực tiếp Bảng Nồng độ, loại chitosan, oligochitosan TN1 Kí hiệu 1.1 1.2 1.3 1.4 2.1 2.2 2.3 2.4 3.1 3.2 3.3 3.4 4.1 5.1 Nồng độ dung KL chitosan, dịch, % oligochitosan/giếng, mg CTO-LV01 0,5 0,6 CTO-LV01 1,0 1,2 CTO-LV01 1,5 1,8 CTO-LV01 2,0 2,4 CTO-MV01 0,5 0,6 CTO-MV01 1,0 1,2 CTO-MV01 1,5 1,8 CTO-MV01 2,0 2,4 CTO-MV02 0,5 0,6 CTO-MV02 1,0 1,2 CTO-MV02 1,5 1,8 CTO-MV02 2,0 2,4 COSL-02 4,2 5,04 CTIC15 1,55 1,86 Mẫu Kết đường kính vịng kháng khuẩn thể Bảng Kết thử nghiệm cho thấy mẫu chitosan CTIC15 cho hiệu kháng khuẩn tương đối mạnh (đường kính vịng kháng khuẩn tạo thành 15-25mm) tạo vịng kháng khuẩn 5/6 chủng vi khuẩn thử nghiệm Oligochitosan COSL-02 tạo vòng kháng khuẩn S.epidemias (17mm) Các mẫu chitosan dạng vảy pha axít acetic 1% với nồng độ khác khơng tạo vịng kháng khuẩn Mẫu chitosan CTIC15 có nồng độ chitosan dung dịch 1,5% cho thấy hiệu kháng khuẩn cao, đó, tiếp tục KHKT Chăn ni số 274 - tháng năm 2022 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC tiến hành TN2 sử dụng ba loại chitosan CTOLV01, CTO-MV01, CTO-MV02 với nồng độ 1,5% dung dịch axít acetic Mục đích TN1 dị tìm loại chitosan có tính chất kháng khuẩn tốt nồng độ kháng khuẩn phù hợp, thế, TN2 tập trung loại chitosan cho kết từ TN1 3.2 Thí nghiệm Lặp lại TN đánh giá khả kháng khuẩn loại chitosan CTO-LV01, CTOMV01 CTO-MV02 để xác định nồng độ phù hợp ảnh hưởng dung dịch axít acetic 1% (dung dịch hòa tan chitosan dạng vảy) đến khả kháng khuẩn chitosan Thí nghiệm tiến hành chủng vi Bảng Đường kính vịng kháng khuẩn khuẩn tương tự TN1 Ba mẫu chitosan TN1 dạng vảy CTO-LV01, CTO-MV01 CTOE K S S S S Mẫu coli pneumoniaeagalactiaeuberisepidermidis aureus MV02 hòa tan với tỷ lệ 1,5% dung CTO-LV01 K K K K K K dịch axít acetic 1% Sau đó, sử dụng trực CTO-LV01 K K K K K K tiếp pha loãng với nước cất trước test CTO-LV01 K K K K K K kháng khuẩn Bố trí mẫu TN2 thể CTO-LV01 K K K K K K Bảng CTO-MV01 K K K K K K Kết thử nghiệm cho thấy, dung dịch CTO-MV01 K K K K K K 1,5% chitosan khơng có hiệu CTO-MV01 K K K K K K kháng khuẩn pha loãng 10 lần Điều CTO-MV01 K K K K K K giải thích mẫu pha lỗng 10 lần, CTO-MV02 K K K K K K hàm lượng chitosan ít, khơng đủ để ức chế CTO-MV02 K K K K K K CTO-MV02 K K K K K K loại vi khuẩn thử nghiệm Mẫu dung CTO-MV02 K K K K K K dịch axít acetic 1% khơng có tác dụng kháng COSL-02 K K K K 17mm K khuẩn sáu loại vi khuẩn Kết CTIC15 15mm 16mm 18mm K 25mm 24mm đường kính vịng kháng khuẩn thể Ghi chú: K kháng bảng Bảng Bố trí mẫu thí nghiệm Chitosan Pha loảng 10 lần Khơng pha loảng CTO-LV01 LV01-11 LV01-21 CTO-MV01 MV01-11 MV01-21 Bảng Đường kính vịng kháng khuẩn TN2 Mẫu LV01-11 LV01-21 MV01-11 MV01-21 MV02-11 MV02-21 A1 E K S S S coli pneumoniae agalactiae uberis epidermidis K K K K K K K K K K K K K K K K K K K 18mm K K K K K K K K K 15mm K K K K K S aureus K 18mm K 18mm K 17mm K Ba mẫu chitosan CTO-LV01, CTOMV01 CTO-MV02 khơng pha lỗng tạo vòng kháng khuẩn với S.aureus, vi khuẩn S.epidemidis có CTO-MV01 CTO-MV02 khơng pha lỗng tạo vịng kháng khuẩn Cả loại chitosan khơng pha lỗng khơng tạo vịng kháng khuẩn với loại KHKT Chăn nuôi số 274 - tháng năm 2022 CTO-MV02 MV02-11 MV02-21 Axít acetic 1% A1 vi khuẩn E.coli, K.pneumoniae, S.agalactiae S.uberis TN Nồng độ dung dịch chitosan ảnh hưởng nhiều đến khả kháng khuẩn chitosan Ở nồng độ chitosan cao, độ nhớt cao làm giảm độ linh động chitosan, từ giảm hoạt tính kháng khuẩn (Jovanovic ctv, 2016) Tuy nhiên, nồng độ chitosan thấp (các mẫu pha loãng 10 lần), hàm lượng chitosan ít, khơng đủ để ức chế vi khuẩn Từ kết suy luận trên, tiếp tục tiến hành TN hòa tan 1,5% chitosan axít acetic 1% 3.3 Thí nghiệm Đánh giá khả kháng khuẩn mẫu chitosan CTO-LV01, CTO-MV01, CTO- 55 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC MV02, CTIC15 oligochitosan COSL-02, OLIC25 chủng vi khuẩn S epidermidis, S uberis, S agalactiae E coli Các mẫu CTO-LV01, CTO-MV01 CTOMV02 hịa tan 1,5% chitosan dung dịch axít acetic 1% trước tiến hành TN Các mẫu CTIC15, COSL-02 OLIC25 dạng lỏng nên sử dụng trực tiếp khơng cần pha lỗng Kết đường kính kháng khuẩn thí nghiệm thể bảng a Mẫu S.uberis S.agalatiae E.coli 17mm 22mm 11mm CTO-LV01 S.epidermidis 14mm CTO-MV01 CTO-MV02 CTIC15 12mm 15mm 24mm 20mm 20mm 30mm 22mm 22mm 27mm 12mm 15mm 20mm COSL-02 18mm 15mm 17mm 18mm OLIC25 17mm 25mm 27mm 18mm Hình ảnh vịng kháng khuẩn tạo thành thí nghiệm thể hình b c Hình Vịng kháng khuẩn Thí nghiệm a) S.epidermidis; b) S.uberis; c) S.agalactiae; d) E.coli Tất mẫu chitosan oligochitosan TN3 tạo vòng kháng khuẩn chủng vi khuẩn thử nghiệm, điều cho thấy chitosan oligochitosan có khả kháng khuẩn với chủng vi khuẩn Từ đường kính vịng kháng khuẩn nhận thấy việc sử dụng chitosan oligochitosan kết hợp với tinh dầu cam làm tăng hoạt tính kháng khuẩn chitosan oligochitosan bốn chủng vi khuẩn nghiên cứu Trong TN này, chitosan CTIC15 cho hiệu kháng khuẩn cao oligochitosan OLIC25 S.epidermidis, S.uberis E.coli Đối với vi khuẩn S.agalactiae, hiệu kháng khuẩn tương đương chitosan oligochitosan 3.4 Thí nghiệm Đánh giá khả kháng khuẩn chitosan CTIC15 oligochitosan OLIC25 điều kiện pH khác chủng vi khuẩn S epidermidis, S uberis, S agalactiae E coli Thí nghiệm tiến hành chủng vi khuẩn mẫu: CTIC15, OLIC25 (pH 3,32) OLIC25 (pH 5,12) Kết đường kính kháng khuẩn TN4 thể bảng 56 Bảng Đường kính vịng kháng khuẩn TN3 d Bảng Đường kính vịng kháng khuẩn TN4 Ký hiệu Mẫu CTIC15 OLIC25 pH 3,32 OLIC25 pH 5,12 S Giếng epidermidis 30mm 30mm 28mm 28mm 31mm 29mm S S E uberis agalatiae coli 25mm 25mm 18mm 27mm 25mm 18mm 27mm 30mm 16mm 30mm 30mm 16mm 26mm 30mm 14mm 26mm 30mm 13mm Như vậy, mẫu cho thấy khả kháng khuẩn rõ rệt, có đường kính lớn đáng kể chủng vi khuẩn thử nghiệm Đường kính vịng kháng khuẩn chitosan CTIC15 có hiệu OLIC25 chủng vi khuẩn S.epidermidis E.coli Đối với củng vi khuẩn S.uberic S.agalatiae chitosan OLIC25 cho hiệu cao CTIC15 Do đó, tùy thuộc chủng vi khuẩn lưu hành trang trại mà chọn loại chitosan phù hợp Hình ảnh vòng kháng khuẩn tạo thành TN thể Hình Đường kính vịng kháng khuẩn khơng khác biệt nhiều mẫu (OLIC25 pH 3,32) mẫu (OLIC25 pH 5,12), cho thấy việc thay đổi pH oligochitosan OLIC25 không ảnh hưởng đến khả kháng khuẩn KHKT Chăn nuôi số 274 - tháng năm 2022 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC loại chitosan Điều giải thích oligochitosan hịa tan nước pH trung tính, đó, việc nâng pH a c b d Hình Vịng kháng khuẩn Thí nghiệm a) S.epidermidis; b) S.uberis; c) S.agalactiae; d) E.coli Bảng Đường kính vịng kháng khuẩn TN9 3.5 Thí nghiệm Đánh giá khả kháng khuẩn chitosan CTIC15 điều kiện pH khác chủng vi khuẩn S epidermidis, S uberis, S agalactiae E coli Thí nghiệm tiến hành mẫu: Mẫu 5-CTIC15 (pH 4,02) Mẫu 6-CTIC115 (pH 5,43) Kết đường kính kháng khuẩn TN5 thể bảng a oligochitosan OLIC25 không làm ảnh hưởng đến độ linh động hoạt tính kháng khuẩn oligochitosan b Ký S S S E hiệu Mẫu Giếng epidermidis uberis agalatiae coli 18mm 28mm 25mm 18mm CTIC15 pH 4,02 18mm 27mm 25mm 18mm 13mm 25mm 23mm 13mm OLIC25 pH 5,43 13mm 25mm 23mm 13mm Hình ảnh vịng kháng khuẩn tạo thành TN thể hình c Hình Vịng kháng khuẩn Thí nghiệm a) S.epidermidis; b) S.uberis; c) S.agalactiae; d) E.coli Đường kính vịng kháng khuẩn mẫu (CTIC5 pH 5,43) giảm rõ rệt so với mẫu (CTIC15 pH 4,02) S.epidermidis E.coli Đường kính vịng kháng khuẩn giảm khơng đáng kể hai chủng vi khuẩn S.uberis S.agalactiae Điều giải thích CTIC15 dung dịch chitosan, pH tăng làm giảm mức độ hịa tan chitosan, đó, giảm độ linh động chitosan dẫn đến giảm khả kháng khuẩn mẫu CTIC15 pH 5,423 so với mẫu CTIC15 pH 4,02 d KẾT LUẬN khác nhau, cho thấy chitosan CTIC15 OLIC25 cho kết kháng khuẩn đạt mức độ cao chủng vi khuẩn gây bệnh viêm vú trang trại bị sữa Vinamilk Từ cho thấy chitosan nguồn nguyên liệu tiềm để thay kháng sinh điều trị bệnh viêm vú bị sữa Ngồi ra, với nguồn ngun liệu chitosan từ phụ phẩm tôm sản xuất nước thuận lợi lớn việc ổn định nguồn nguyên liệu cung cấp đồng thời giải vấn đề ô nhiễm môi trường chất thải ngành tôm Sau đợt khảo sát phịng TN để tìm mức độ kháng khuẩn dạng chitosan Cần thực nghiên cứu thực tế trang trại bò sữa để đánh giá khả KHKT Chăn nuôi số 274 - tháng năm 2022 57 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC kháng khuẩn loại chitosan nhằm chọn lựa giải pháp thay kháng sinh tối ưu điều trị bệnh viêm vú bò sữa TÀI LIỆU THAM KHẢO Aguayo P.R., Larenas T.B., Godoy C.A., Rivas B.C., Casanova J.G and Gomez D.T (2020) Antimicrobial and antibiofilm capacity of chitosan nanoparticles against wild type strain of pseudomonas sp Isolated from milk of cows diagnosed with bovine mastitis Antibiotics, 9(9): 1-15 Alam M.R., Kim W.I., Kim J.W., Na C.S and Kim N.S (2012) Effects of Chitosan-oligosaccharide on diarrhoea in Hanwoo calves Vet Med., 57(8): 385-93 Asli A., Brouillette E., Ster C., Ghinet M.G., Brzezinski R and Lacasse P (2017) Antibiofilm and antibacterial effects of specific chitosan molecules on Staphylococcus aureus  isolates associated with bovine mastitis PLoS ONE 12(5): e0176988 Breser M.L., Felipe V., Bohl L.P., Orellano M.S., Isaac P., Conesa A., Rivero V.E., Correa S.G., Bianco I.D and Porporatto C (2018) Chitosan and cloxacillin combination improve antibiotic efficacy against different lifestyle of coagulase-negative Staphylococcus isolates from chronic bovine mastitis Sci Rep., 8(1): 1-13 Cheng W.N and Han S.G (2020) Bovine mastitis: risk factors, therapeutic strategies, and alternative treatments - A review Asian-Aust J Anim Sci., 33(11): 1699-13 Felipe V., Breser M.L., Bohl L.P., Silva E.R., Morgant C.A., Correa S.G and Porporatto C (2019) Chitosan disrupts biofilm formation and promotes biofilm eradication in Staphylococcus species isolated from bovine mastitis Int J Biol Macromol., 126: 60-67 Jeon S.J., Ma Z., Kang M., Galvão K.N and Jeong K.C (2016) Application of chitosan microparticles for treatment of metritis and in  vivo evaluation of broad spectrum antimicrobial activity in cow uteri Biomaterials, 110: 71-80 Jovanovic G.D., Klause A.S and Niksic M.P (2016) Antimicrobial activity of chitosan coatings and films against Listeria monocytogenes on black radish Rev Arg Microbiol., 48(2): 128-36 Nguyen V.T., Nguyen T.H., Nguyen N.S., Bui V.D and Atsushi M (2015) A study about mastitis infection characteristics in dairy cow of Bavi, Hanoi, Vietnam Asian J Pha Clin Res., 8(3): 165-68 10 Moon J.S., Kim H.K., Koo H.C., Joo Y.S., Nam H.M., Park Y.H and Kang M.I (2007) The antibacterial and immunostimulative effect of chitosan-oligosaccharides against infection by Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis Appl Microbiol BioTech., 75(5): 989-98 11 Orellano M.S., Isaac P., Breser M.L., Bohl L.P., Conesa A., Falcone R.D and Porporatto C (2018) Chitosan nanoparticles enhance the antibacterial activity of the native polymer against bovine mastitis pathogens Carbohydr Polym., 213: 1-9 PHƯƠNG THỨC NI THÍCH HỢP VỊT MINH HƯƠNG THƯƠNG PHẨM Ngô Thị Lệ Quyên1*, Nguyễn Công Định1, Phạm Hải Ninh1, Nguyễn Quyết Thắng1, Nguyễn Qúy Khiêm2 Đỗ Thị Liên3 Ngày nhận báo: 30/11/2021 - Ngày nhận phản biện: 20/12/2021 Ngày báo chấp nhận đăng: 30/12/2021 TĨM TẮT Thí nghiệm nhân tố ngẫu nhiên hồn tồn (phương thức ni) tiến hành 600 vịt Minh Hương thương phẩm nuôi Trung tâm nghiên cứu vịt Đại Xuyên, nhân tố thí nghiệm phương thức nuôi nhốt nuôi bán chăn thả để đưa phương thức nuôi phù hợp Bắt đầu theo dõi từ ngày tuổi đến 12 tuần tuổi Kết cho thấy tỷ lệ nuôi sống lơ thí nghiệm ni nhốt đạt 96,33%, lơ thí nghiệm ni bán chăn thả đạt 94,33% Kết nuôi từ phương thức cho thấy tuần tuổi khối lượng vịt 1.527,77-1.565,40 g/con, 12 tuần tuổi khối lượng 1.826,69– 1.875,33 g/con, tiêu tốn thức ăn/kg tăng khối lượng 3,01-3,07kg Hiệu kinh tế thu lơ thí nghiệm 10.890.000 đồng, lơ thí nghiệm 10.420.000 đồng Vịt Minh Hương ni thương phẩm ni theo phương thức tùy theo điều kiện thực tế Từ khóa: Phương thức nuôi, vịt Minh Hương, hiệu kinh tế Viện Chăn nuôi Trung tâm nghiên cứu gia cầm Thụy Phương Trung tâm nghiên cứu vịt Đại Xuyên * Tác giả liên hệ: KS Ngô Thị Lệ Quyên, Bộ môn Động vật quý Đa dạng sinh học, Viện Chăn nuôi; Điện thoại: 0367184265; Email: ngothilequyen.nias@gmail.com 58 KHKT Chăn nuôi số 274 - tháng năm 2022 ... 2016) gây bệnh vi? ?m tử cung bò sữa; vi khuẩn E.coli, Samonella gây bệnh tiêu chảy bê (Alam ctv, 2012) Đối với bệnh vi? ?m vú bò sữa, chitosan báo cáo có tiềm vi? ??c kiểm sốt bệnh vi? ?m vú bò sữa (Cheng... Các bệnh vi? ?m nhiễm đường sinh sản vi? ?m vú vi? ?m tử cung thường gặp bò sữa dẫn đến thiệt hại cho ngành giảm sản lượng (đối với bệnh vi? ?m vú, sản lượng sữa giảm 30% thất thoát); chất lượng sữa. .. bị sữa bị vi? ?m vú lâm sàng 40% bò sữa trại bị vi? ?m vú cận lâm sàng (Nguyen ctv, 2015) Bệnh vi? ?m vú thường dòng vi khuẩn tụ cầu (Staphylococcus spp.) xử lý cách sử dụng kháng sinh Tuy nhiên, vi? ??c