Bài viết Hiệu quả ức chế ốc bươu vàng (Pomacea canaliculata) của dịch trích hạt cây thầu dầu (Ricinus communis) được thực hiện nhằm đánh giá hiệu quả tiêu diệt nhuyễn thể của dịch trích Ethanol hạt cây thầu dầu trên ốc bươu vàng.
HIỆU QUẢ ỨC CHẾ ỐC BƯƠU VÀNG (POMACEA CANALICULATA) CỦA DỊCH TRÍCH HẠT CÂY THẦU DẦU (RICINUS COMMUNIS) Nguyễn Phạm Tuấn1, Nguyễn Thị Ái Lan2 Trung tâm Công nghệ Sinh học tỉnh An Giang Trường Đại học Trà Vinh Tóm tắt Nghiên cứu thực nhằm đánh giá hiệu tiêu diệt nhuyễn thể dịch trích Ethanol hạt Thâu dầu ốc bươu vàng Cao chiết hạt Thầu dầu chiết xuất theo phương pháp ngâm dầm với dung môi Ethanol kết hợp với sóng siêu âm Hiệu tiêu diệt nhuyễn thể đánh giá phương pháp mồi ngâm Tỷ lệ tử vong phân tích mơ hình hồi quy Probit Các hoạt chất sinh học cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu sàng lọc phương pháp hóa học Hàm lượng Phenolic Flavonoid xác định phương pháp quang phổ Kết nghiên cứu cho thấy, độ ẩm hạt Thầu dầu đạt 70,38 % hiệu suất trích cao hạt Thầu dầu đạt 5,21 % Sau 24 giờ, giá trị LC50 LC90 dịch trích Ethanol hạt Thầu dầu với ốc bươu vàng phương pháp ngâm 278,81 ppm 2148,77 ppm Giá trị LC50 LC90 dịch trích Ethanol hạt Thầu dầu với ốc bươu vàng phương pháp mồi 157,52 ppm 538,74 ppm Cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu có diện hợp chất sinh học Alkaloid, Flavonoid, Terpenoid, Saponin, Tannin Phenol Hàm lượng Phenolic Flavonoid, cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu 91,27 mg Gallic acid/g; 54,71 mg Quercetin/g cao Từ khóa: Cây Thầu dầu; Ốc bươu vàng; Tiêu diệt nhuyễn thể; LC50; LC90 Abstract Molluscicidal effect of Castor oil plant seeds (Ricinus communis) extract against golden apple snail (Pomacea canaliculata) This study aimed to evaluate the molluscicidal effect of castor plant seeds (Ricinus communis) Ethanolic extract against golden apple snail (Pomacea canaliculata) Castor plant seed (Ricinus communis) extract was extracted by combining the immersion method use solvent Ethanol and ultrasound Effectiveness of the molluscicidal was determined by bait and immersion methods Mortality data were analyzed using Probit regression model Phytochemical screening of Ricinus communis seed was analyzed using chemical methods The content of Phenolic and Flavonoid were determined by the spectrophotometer method The results showed that the moisture content was 70.38 % and extraction efficiency of Ricinus communis seeds 5.21 % After 24 h, Ricinus communis seed has molluscicidal with LC50 and LC90 value of immersion method 278.81 ppm and 2148.77 ppm, respectively Ricinus communis seed has molluscicidal with LC50 and LC90 value of bait method 157.52 ppm and 538.74 ppm, respectively The aqueous extract of Ricinus communis seed contained biological compounds such as Alkaloids, Saponin, Flavonoids, Terpenoid, Tannins and Phenols The Phenolic and Flavonoid of Ricinus communis seeds per g of dry weight were 91.27 mg Gallic acid/g; 54.71 mg Quercetin/g Keywords: Pomacea canaliculata; Ricinus communis; Molluscicidal; LC50; LC90 Giới thiệu Cây Thầu dầu (Ricinus communis) loại thảo mộc thuộc họ Đại kích (Euphorbiaceae), thường mọc hoang nơi, như: ven đường; đất hoang; gần hàng rào; Theo kinh nghiệm dân Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 111 gian, Thầu dầu dùng để điều trị số bệnh bệnh da, chảy máu sau sinh băng vết thương,… [1] Hơn nữa, Thầu dầu không gây độc tính động vật có vú, kháng oxy hóa chống viêm diện Saponin, Alkaloid Oleanolic aicd, diệt ấu trùng muỗi vằn, chống sinh sản nhanh động vật chất diệt tinh trùng [2 - 5] Ốc bươu vàng (Pomacea canaliculata) loài ốc nước xem 100 loài ngoại lai xâm hại phá hoại giới [6] Ốc bươu vàng cơng phá hủy thân non lúa ốc bươu vàng ăn khoảng - 24 lúa ngày [7] Việc áp dụng thuốc diệt nhuyễn thể tổng hợp (Niclosamide Metaldehyde) để kiểm soát ốc bươu vàng cách hiệu sử dụng rộng rãi Niclosamide trở thành loại thuốc sử dụng để kiểm soát diệt trừ ốc bươu vàng phổ biến tiêu diệt nhanh ốc [8] Tuy nhiên, thuốc diệt nhuyễn thể gây tác động tiêu cực mơi trường có chi phí sản xuất cao Xuất phát từ thực tế đó, nhà khoa học quan tâm nghiên cứu tìm kiếm loại thuốc diệt nhuyễn thể có nguồn gốc từ thực vật Thuốc diệt nhuyễn thể từ thực vật loại thuốc đặc trị mục tiêu, an tồn với mơi trường đảm bảo an toàn độc tố [9] Thuốc diệt nhuyễn thể từ thực vật từ lâu khám phá lựa chọn thay hiệu cho chất hóa học tổng hợp độc tính thấp sinh vật mục tiêu, có khả phân hủy sinh học chúng tốn dạng thơ Ngồi ra, cịn ngăn ngừa phát triển tình kháng thuốc chống lại hỗn hợp hợp chất có hoạt tính sinh học thực vật [10] Hơn nữa, thuốc diệt nhuyễn thể từ thực vật dễ kiếm sử dụng thuốc diệt nhuyễn thể tổng hợp nhập Với đặc điểm thuận lợi nguồn nguyên liệu tiềm thực vật làm thuốc diệt nhuyễn thể Từ đó, nghiên cứu thực nhằm đánh giá hiệu tiêu diệt nhuyễn thể đối tượng ốc bươu vàng, góp phần giảm thải nhiễm mơi trường gia tăng giá trị nguồn thảo dược Vật liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Nguyên vật liệu Nguyên liệu hạt Thầu dầu thu từ nhà lưới Trung tâm Công nghệ Sinh học tỉnh An Giang (Tỉnh lộ 941, ấp Vĩnh Phước, xã Vĩnh Bình, huyện Châu Thành, tỉnh An Giang) Hóa chất thiết bị gồm: máy đo quang phổ (Human, Hàn Quốc); máy đông khô chân không (Christ, Đức); máy ly tâm (Orto alresa, Tây Ban Nha); máy cô quay chân không (Eyala, Nhật Bản); Quercetin; Gallic acid; Folin-Ciocalteu (Merck, Mỹ); máy đo pH (Mettelo, Thụy Sĩ);… hóa chất thiết bị cần thiết khác 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp tạo cao chiết từ hạt Thầu dầu Hạt Thầu dầu thu từ Thầu dầu đông khô máy đông khô 96 nghiền thành bột mịn 300 g mẫu bột ngâm dầm với dung môi Ethanol với tỷ lệ nguyên liệu dung môi 1:10 (w/v), nhiệt độ phòng kết hợp sóng siêu âm 12 giờ, ngâm 72 để tối để tránh trình oxy hóa Sau đó, hỗn hợp ly tâm 5.000 vịng/phút 20 phút, thu phần dịch bỏ phần cặn Phần dịch lọc qua giấy lọc Whatman 0,45 µm, thu dịch lọc, phần dịch lọc sau tiến hành cô quay chân không để đuổi dung môi Dịch lọc sau cô quay đuổi dung môi tiến hành đông khô máy đông khô để thu cao chiết hạt Thầu dầu Cao chiết hạt Thầu dầu sau đông khô bảo quản điều kiện nhiệt độ -20 0C thực nghiên cứu 112 Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 2.2.2 Chuẩn bị ốc bươu vàng thí nghiệm Tiến hành thu thập ốc bươu vàng trưởng thành ruộng lúa Trung tâm Công nghệ sinh học tỉnh An Giang Ốc bươu vàng vận chuyển xơ nhựa có chứa nước từ mơi trường thu thập phịng thí nghiệm Ốc cho ăn bột hạt diếp cá cách rải khoảng 0,25 g bột vào xô 24 giờ, nuôi nhiệt độ phòng, thời gian chiếu sáng 12 12 tối với tần suất thay nước 03 ngày/lần (Hình 1) Hình 1: (a) Thu thập ốc thí nghiệm đồng ruộng, (b) ốc thu thập vận chuyển phòng thí nghiệm, (c) chuẩn bị đo kích thước ốc, (d) tiến hành thí nghiệm ngâm 2.2.3 Đánh giá hiệu diệt nhuyễn thể phương pháp ngâm Hiệu diệt nhuyễn thể phương pháp ngâm theo Salama cộng [11] có điều chỉnh cho phù hợp với điều kiện thí nghiệm Chuẩn bị dịch trích thực vật hạt Thầu dầu nồng độ khác nước cất Đặt thí nghiệm 10 ốc bươu vàng trưởng thành có đường kính từ 14 - 17 mm, ngâm cao chiết có nồng độ khác 24 điều kiện nhiệt độ phịng khơng có bổ sung thức ăn Niclosamide nồng độ 20 ppm nước cất sử dụng mẫu đối chứng dương âm Sau 24 thí nghiệm, ốc nghiệm thức rửa nước cất, chuyển qua môi trường nước cất ốc bươu vàng cho ăn bột rau diếp cá 24 Kiểm tra sống chết ốc thí nghiệm, dấu hiệu tử vong ốc bươu vàng thể qua khả di chuyển thiếu cử động môi trường nước 2.2.4 Đánh giá hiệu diệt nhuyễn thể phương pháp mồi Hiệu quả diệt nhuyễn thể phương pháp mồi theo Singh cộng [12] Chuẩn bị dịch trích thực vật hạt Thầu dầu nồng độ khác nước cất Pha loãng 10 mL nước cất phối trộn vào g hỗn hợp thức ăn gồm hèm rượu cám gạo để đạt trọng lượng viên 15 g Chuẩn bị thí nghiệm 10 ốc bươu vàng có đường kính từ 14 - 17 mm Mỗi ốc cho lên đĩa Petri với 1,5 g thức ăn ướt để đảm bảo nhu cầu ẩm độ ốc 24 Đối chứng dương (niclosamide nồng độ 20 ppm) đối chứng âm thực tương tự Sau 24 thử nghiệm, ốc chuyển sang môi trường nước để kiểm tra sống chết Độc tính cao chiết ốc bươu vàng phản ánh việc tiết chất nhầy từ ốc thử nghiệm Các dấu hiệu tử vong ốc coi cứng thiếu cử động Tiến hành xác định giá trị LC50 LC90 2.2.5 Định tính số hợp chất sinh học có cao chiết hạt Thầu dầu Xác định hợp chất có hoạt tính sinh học cao chiết theo Yadav cộng [13] Bảng Định tính hợp chất sinh học có cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu Hợp chất Alkaloid (Dragendorff) Flavonoid Saponin (Foam) Thực nghiệm mL dịch trích + TT Dragendorff mL dịch trích + mL Pb(OAc)4 10 % mL dịch trích + mL H2O→ đun nóng Hiện tượng Xuất màu đỏ cam Xuất màu vàng Xuất bọt Xuất vòng đỏ nâu Steroid (Salkowski) mL dịch trích + mL CHCl3 + mL H2SO4 đậm đặc lớp Tannin phenol (Braymer) 0,5 mL dịch trích + 10 mL H2O + 2-3 giọt FeCl3 0,1 % Kết tủa xanh dương đen mL dịch trích + mL (CH3CO)2O + 2-3 giọt H2SO4 Xuất màu đỏ đậm Terpenoid đậm đặc Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 113 2.2.6 Phân tích hàm lượng Phenolic Flavonoid cao chiết Thầu dầu Hàm lượng Flavonoid tổng theo Pieme cộng [14]: Hút 0,1 mL Quercetin, thêm vào 0,3 mL nước cất, 0,03 mL NaNO2 % Ủ phút 25 0C, thêm 0,03 mL AlCl3 10 % Ủ thêm phút, sau cho thêm 0,2 mL NaOH mM Thêm nước cất để tổng thể tích mL Đo bước sóng 510 nm Hàm lượng Flavonoid tổng xác định theo công thức: C = c x V/m đó: C: Hàm lượng Flavonoid tổng (mg Quercetin/g chiết xuất); c: Giá trị x từ đường chuẩn Quercetin (mg/mL); V: Thể tích dịch chiết (mL); m: Khối lượng cao chiết V (g) Hàm lượng Phenolic tổng xác định theo Yadav Agarwala [15]: Lần lượt cho 01 mL dung dịch Gallic acid vào 2,5 mL thuốc thử Folin-Ciocalteu 10 % để phản ứng phút Sau đó, thêm tiếp vào mL dung dịch Na2CO3 2% Sau 45 phút phản ứng nhiệt độ phòng, độ hấp thụ λ = 765 nm Hàm lượng Phenolic tổng tính theo cơng thức: P = a x V/m Trong đó: P: Hàm lượng Phenolic tổng (mg gallic acid/g cao chiết); a: Giá trị x từ đường chuẩn (mg/mL); V: Thể tích dung dịch cao chiết (mL); m: Khối lượng cao chiết thể tích V (g) 2.3 Phương pháp thống kê Số liệu xử lý phần mềm Excel thống kê phần mềm Statgraphics plus 16.0 Tính giá trị LC50 LC90 phần mềm Probit phần mềm SPSS 22 Kết thảo luận 3.1 Phương pháp tạo cao chiết nước từ hạt Thầu dầu Để đánh giá hiệu phương pháp trích cao, người ta thường dựa hiệu suất trích cao Hiệu suất trích cao phản ánh tối ưu việc kết hợp điều kiện khác phương pháp ly trích Độ ẩm hạt Thầu dầu 68,79 % Thầu dầu chiết xuất với dung môi khác 300 g (khô) hiệu suất trích cao đạt 5,83 % (Bảng 2) Bảng Độ ẩm, hiệu suất cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu Chỉ tiêu theo dõi Khối lượng mẫu tươi (g) Độ ẩm (%) Khối lượng mẫu khô (g) Khối lượng cao khô (g) Hiệu suất chiết (%) Cao chiết Ethanol 3.000 68,79 ± 0,13 300 17,05 ± 0,22 5,83 ± 0,09 Bảng Tỷ lệ chết nhuyễn thể (%) cao chiết phương pháp ngâm 114 Nồng độ (ppm) Số lượng (con) 25 50 100 200 400 600 800 1000 Niclosamide 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 Sau 24 thí nghiệm Sống Chết 30 29 26 23 19 11 14 16 22 27 30 30 Giá trị LC50 Giá trị LC90 278,81 ppm 2148,77 ppm Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 3.2 Hiệu diệt nhuyễn thể cao chiết phương pháp ngâm Hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu phương pháp ngâm có khác biệt nồng độ thí nghiệm (Bảng 3) Sau 24 thí nghiệm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng tăng tuyến tính theo nồng độ thí nghiệm Cụ thể, nồng độ cao chiết 1000 ppm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng đạt 100 % (số lượng chết 30/30) Kế đến, nồng độ cao chiết 800 ppm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng đạt 90 % (số lượng chết 27/30) thấp nồng độ cao chiết ppm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng đạt % (số lượng chết 0/30) Tiến hành xác định giá trị LC50 LC90 sau 24 tiến hành thí nghiệm cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu đạt LC50 = 278,81 ppm LC90 = 2148,77 ppm (Hình 2) Đối chứng dương Niclosamide cho hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng 100 % với nồng độ 20 ppm Hình 2: Hình dạng diệt nhuyễn thể cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu chất đối chứng dương niclosamide sau 24 thử nghiệm phương pháp ngâm Ghi chú: (a) nghiệm thức đối chứng âm; (b) dối chứng dương; (c) cao chiết 25 ppm; (d) cao chiết 50 ppm; (e) cao chiết 100 ppm; (f) cao chiết 200 ppm; (g) cao chiết 400 ppm; (h) cao chiết 600 ppm; (k) cao chiết 800 pmm (l) cao chiết 1.000 ppm Hình 3: Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu chất đối chứng dương niclosamide phương pháp mồi Ghi chú: (a) chuẩn bị nồng độ thí nghiệm; (b) chuẩn bị ốc thí nghiệm; (c) ốc cho nghiệm thức khác nhau; (d) chuẩn bị thức ăn thí nghiệm Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 115 3.3 Hiệu diệt nhuyễn thể cao chiết phương pháp mồi Hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu phương pháp mồi có khác biệt nồng độ thí nghiệm (Bảng 4) Sau 24 thí nghiệm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng tăng tuyến tính theo nồng độ thí nghiệm Cụ thể, nồng độ cao chiết 500 ppm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng đạt 100 % (số lượng chết 30/30) Kế đến, nồng độ cao chiết 400 ppm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng đạt 76,66 % (số lượng chết 23/30) thấp nồng độ cao chiết ppm, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng đạt % (số lượng chết 0/30) Tiến hành xác định giá trị LC50 LC90 sau 24 tiến hành thí nghiệm cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu đạt LC50 = 157,52 ppm LC90 = 538,74 ppm (Hình 3) Đối chứng dương Niclosamide cho hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng 100 % với nồng độ 20 ppm Bảng Tỷ lệ chết nhuyễn thể (%) cao chiết phương mồi Nồng độ (ppm) Số lượng (con) 25 50 100 200 300 400 500 Niclosamide 30 30 30 30 30 30 30 30 30 40 Sau 24 thí nghiệm Sống Chết 30 27 25 22 18 12 14 16 23 30 30 Giá trị LC50 Giá trị LC90 157,52 ppm 538,74 ppm Số lượng ốc bươu 30 30 30 500 Đối chứng 23 20 16 12 10 0 25 50 100 200 300 Nồng độ (ppm) 400 Hình 4: Biểu đồ thể hiệu diệt ốc bươu vàng hạt Thầu dầu Niclosamide phương pháp mồi 3.4 Định tính số hợp chất sinh học có cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu Cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu từ dung mơi khác có diện hợp chất Alkaloid, Saponin, Flavonoid, Terpenoid, Tanin Phenol (Bảng 4) Kết tương tự 116 Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững nghiên cứu Constantine cộng [16] cho rằng, dịch trích vỏ trái lựu có diện hợp chất Saponin, Flavonoid, Alkaloid, Terpenoids, Steroid, Tanin Phenol Bảng Định tính số hợp chất có hoạt tính sinh học cao chiết hạt Thầu dầu Chỉ tiêu theo dõi Saponin Flavonoid Terpenoids Alkaloid Tanin phenol Steroid Cao chiết Ethanol (+) (+) (-) (+) (+) (+) Ghi chú: ‘+’: dương tính ‘-‘: âm tính 3.5 Hàm lượng Phenolic Flavonoid cao chiết Thầu dầu Hàm lượng Flavonoid tổng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu phân tích phương pháp quang phổ đường chuẩn: y = 0,0054x + 0,0185 với hệ số R2 = 0,9992 Hàm lượng Flavonoid tổng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu đạt 73,72 mg Quercetin/g cao chiết Hàm lượng Phenolic tổng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu phân tích phương pháp quang phổ đường chuẩn: y = 0,0049x + 0,0127 với hệ số R2 = 0,9985 Hàm lượng Phenolic tổng cao chiết ethanol hạt Thầu dầu 210,91 mg gallic acid/g cao chiết Thảo luận chung Trong trình tạo cao chiết từ hạt Thầu dầu, dung mơi Ethanol sử dụng cho q trình ly trích, làm dung mơi tạo mơi trường tối ưu cho việc ly trích, tăng tiếp xúc mẫu dung mơi, tăng hiệu suất trích ly cuối bảo quản mẫu khỏi loại vi sinh vật [17] Trong đó, sử dụng nước làm loại dung mơi để ly trích dẫn đến mẫu trích nhiễm nhiều tạp chất Acid hữu cơ, đường loại Protein tan nước ảnh hưởng tới q trình định tính hay định lượng hợp chất thiên nhiên Ngoài ra, sử dụng cồn tuyệt đối giảm hiệu suất chiết cao Ethanol khó thấm vào mẫu Phân tích định tính cho thấy, cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu có diện hợp chất có hoạt tính sinh học Saponin, Favonoid, Alkaloid, Terpenoid, Tannin Phenol Theo Hammami cộng [18], Pereira cộng [19], đặc tính diệt nhuyễn thể thực vật diện hợp chất có hoạt tính sinh học phận chúng Saponin hợp chất diệt nhuyễn thể quan trọng giúp phá vỡ tính thấm tế bào chức điều hòa thẩm thấu cách tương tác với Sterol màng tế bào [20] Alkaloid Terpenoide chủ yếu hoạt động chất ức chế Acetylcholinesterase dẫn đến nhiễm độc thần kinh ốc [21, 22] Sự khác biệt hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng các nồng độ thí nghiệm hàm lượng hoạt chất sinh học có cao chiết nhiều hay nên hiệu diệt nhuyễn thể cao Đồng thời, Niclosamide thuốc diệt nhuyễn thể thương mại có tính chuyên dụng nên hiệu cao sử dụng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu hỗn hợp cao chiết lẫn nhiều tạp chất Kết nghiên cứu cho thấy, cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu có khả tiêu diệt nhuyễn thể phương pháp ngầm phương pháp mồi Hiệu tiêu diệt nhuyễn thể cao chiết phụ thuộc vào nồng độ (Bảng 5) Tuy nhiên, hai phương pháp mồi ngâm cho kết khác nhau, giá trị LC50 phương pháp mồi thấp so với phương pháp ngâm Điều cho thấy, thực vật hiệu nhiễm bệnh sử dụng làm mồi nhử dạng ngâm [23] Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 117 Bảng Giá trị LC50 LC90 cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu nhuyễn thể ốc bươu vàng phương pháp ngâm phương pháp mồi Phương pháp Phương pháp ngâm Phương pháp mồi Giá trị LC50 = 278,81 ppm LC90 = 2148,77 ppm LC50 = 157,52 ppm LC90 = 538,74 ppm Giới hạn độ tin cậy 124,38 - 661,68 837,31 - 29694,94 128,04 - 191,78 407,87 - 808,73 Χ2 (95 % CL) Slope 21,39 1,44 6,99 2,4 Hiệu tiêu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu có khác biệt hai phương pháp đánh giá so sánh giá trị LC50 LC90 Trong nghiên cứu tại, hiệu diệt nhuyễn thể ốc bươu vàng cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu phương pháp ngâm (LC50 = 278,81 ppm LC90 = 2148,77 ppm) cao so với phương pháp mồi (LC50 = 157,52 ppm LC90 = 538,74 ppm) Gần đây, nghiên cứu đánh giá chế tiêu diệt nhuyễn thể từ thực vật nghiên cứu đánh giá Dịch trích Ginkgo biloba L ức chế biểu gen bốn enzyme ty thể gây rối loạn chức ty thể [9] Hơn nữa, dịch trích Nerium indicum làm giảm hoạt động enzyme Acetylcholinesterase giảm hàm lượng Glycogen [24] Bên cạnh đó, dịch trích Sapindus mukorossi Terminalia chebula ức chế hoạt động enzyme Acetylcholinesterase, Phosphatase acid Phosphatase kiềm mô thần kinh [25] Nói chung, phần lớn chế diệt nhuyễn thể chất độc từ thực vật xác định phân tích sinh hóa hoạt động enzyme, hàm lượng Protein Glycogen dựa trên: (i) enzyme Acetylcholinesterase enzyme quan trọng nhuyễn thể bị ảnh hưởng thành phần diệt khuẩn khác thực vật Acetogenin, Azadirachtin; (ii) Phân tích hàm lượng Glycogen để đo mức độ căng thẳng chất gây nhiễm sử dụng làm số căng thẳng [26]; (ii) Tổng hàm lượng Protein mơ sử dụng để xác định thay đổi sinh lý sinh vật [27] Trong phương pháp ngâm nước, tác dụng diệt nhuyễn thể chủ yếu ngộ độc tiếp xúc mô biểu mô vùng đầu - chân Các nghiên cứu khác báo cáo nang nỗn đóng lại, tăng tiết chất nhầy rút vào vỏ trình ngâm [28] Những hành vi bảo vệ ngăn chặn xâm nhập tự hợp chất diệt khuẩn vào khoang bên thể Trong đó, phương pháp mồi diệt nhuyễn thể dựa chế hoạt động chất độc cho dày [29] Do tổn thương biểu mơ dày chế hoạt động [30 - 32] Sự gia tăng tính hiệu việc sử dụng phương pháp mồi diệt nhuyễn thể liên quan đến yếu tố liên quan khác Nếu ốc bươu vàng thèm ăn hợp chất hoạt tính sinh học thức ăn, chúng tích tụ ruột với nồng độ cao tạm thời trước tiết Khi nồng độ cục tăng lên, thiệt hại chắn mong đợi Mặt khác, dày biểu mô cung cấp khu vực tiếp xúc chất độc lớn bề mặt Cephalopodal Phương pháp mồi tạo điều kiện cho hợp chất phân tán đến mô gan quan quan trọng khác Phương pháp mồi đánh giá tiêu diệt nhuyễn thể có khả kiểm sốt ốc nước nên có thêm ưu điểm Phương pháp mồi ngăn chặn hóa chất phát tán trực tiếp vào môi trường nước Chất hấp dẫn mồi nhử ốc sên mục tiêu để chúng ăn chất diệt nhuyễn thể cách chủ động Mặt khác, mồi áp dụng cho khu vực bị nhiễm ốc môi trường sống nước nên có tính kinh tế nhắm mục tiêu cụ thể [33, 34] Bên cạnh khả diệt ốc bươu vàng từ Thầu dầu, cao chiết từ dược liệu tự nhiên cịn có khả tiêu diệt nhuyễn thể khác Cao chiết nước cỏ xước có khả diệt nhuyễn thể ốc Biomphalaria pfeiferi với giá trị LC50 LC90 72,4 ppm 96,5 ppm [35] Hơn 118 Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững nữa, cao chiết Ethanol cỏ xước có khả diệt nhuyễn thể ốc Biomphalaria pfeiferi sử dụng đánh giá dựa vào phương pháp mồi so với phương pháp ngâm thông thường Kết nghiên cứu Mandefro cộng [23] cho rằng, giá trị LC50 LC90 cao chiết cỏ xước với ốc Biomphalaria pfeiferi phương pháp ngâm đạt 20,37 ppm 46,84 ppm sau 24 thử nghiệm Trong đó, giá trị LC50 LC90 cao chiết cỏ xước với ốc Biomphalaria pfeiferi phương pháp mồi đạt 3,10 ppm 11,08 ppm Giá trị LC50 LC90 phương pháp mồi thấp 6,57 4,23 lần so với phương pháp ngâm Điều cho thấy, hiệu phương pháp mồi tốt so với phương pháp ngâm điều giải thích sử dụng thuốc diệt nhuyễn thể với nồng độ cao làm thay đổi hương vị tự nhiên tính hấp dẫn thức ăn cho ốc Ốc dự ăn nhiều, làm giảm độ ngon hiệu thuốc Kết luận Hạt Thầu dầu có khả tiêu diệt nhuyễn thể, đặc biệt ốc bươu vàng Dịch trích Ethanol hạt Thầu dầu có khả tiêu diệt nhuyễn thể với giá trị LC50 LC90 278,81 ppm 2148,77 ppm (phương pháp ngâm); 157,52 ppm 538,74 ppm (phương pháp mồi) sau 24 thí nghiệm Nghiên cứu đánh giá hiệu sản phẩm dịch trích hạt Thầu dầu điều kiện canh tác đồng ruộng nghiên cứu phân tách hợp chất có hoạt tính sinh học Lời cảm ơn: Xin chân thành cảm ơn Trung tâm Công nghệ sinh học tỉnh An Giang Trường Đại học Trà Vinh tạo điều kiện hỗ trợ để thực nghiên cứu TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Tadesse B., G Mulugeta, G Fikadu, and A Sultan (2014) Survey on ethno-veterinary medicinal plants in selected Woredas of east Wollega zone, western Ethiopia Journal of Biology, Agriculture and Healthcare, (17): 97 - 105 [2] Habtamu, A., and Y Mekonnen (2017) Evaluation of the antibacterial activities of leaf extracts of Achyranthus aspera African Journal of Bacteriology Research, (2): - 14 [3] Kothavade, P.S., V.D Bulani, D.M Nagmoti, P.S Deshpande, N.B Gawali, and A.R Juvekar (2015) Terapeutic efect of saponin rich fraction of Achyranthes aspera Linn on adjuvant-induced arthritis in sprague-dawley rats Autoimmune Diseases, 2015: - 10 [4] Sharma, A., S Kumar, and P Tripathi (2015) Impact of Achyranthes aspera leaf and stem extracts on the survival, morphology and behaviour of an Indian strain of dengue vector, Aedes aegypti l (diptera: culicidae) Journal of Mosquito Research, (7): - [5] Reddy, C., and A Kamble (2014) Toxicity study of Achyranthus aspera International letters of natural sciences, 4: 85 - 96 [6] Maria F.Q, G Lara, C Riera-Ruiz, A D Barragán-Lucas, M Miranda and P Manzano (2016) Field evaluation of plants molluscicide against Pomacea canaliculata Emirates Journal of Food and Agriculture, 28 (3), 224 - 226 [7] Abdullah, N.S., N.A Aziz and R Mailon (2017) Molluscicidal activity of Entada rheedii stem bark methanolic extract against paddy pest Pomacea canaliculata (golden apple snail) Malaysian Journal of Analytical Sciences, 21 (1): 46 - 51 [8] Plant Health Australia (2009) Contingency Plan: Golden Apple Snail Plant Health Australia: Deakin, Australia, p 15 [9] Li, X Deng, F Shan, X Pan, J Yu, P and Mao, Z (2012) Effects of the molluscicidal agent GA-C13:0, Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 119 a natural occurring ginkgolic acid, on snail mitochondria Pestic Biochem Physiol, 103: 115 - 120 [10] Pavela, R (2015) Essential oils for the development of eco-friendly mosquito larvicides: A review Ind Crops Prod, 76: 174 - 187 [12] Singh., V K Singh, and A K Srivastava (2013) Abiotic factors and anti-reproductive action of bait containing eugenol against Lymnaea acuminate The Journal of Biological Sciences, (4): 76 - 85 [13] Yadav, M., S Chatterji, Gupta, S.K and Watal, G (2014) Preliminary phytochemical screening of six medicinal plants used in traditional medicine International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, (5): 539 - 542 [14] Pieme, C A., Kumar, S.G., Dongmo, M.S., Moukette, B.M., Boyoum, F.F., Ngogang, J.Y and Saxena, A.K (2014) Antiproliferative activity and induction of apoptosis by Annona muricata (Annonaceae) extract on human cancer cells BMC complementary and alternative medicine, 14 (1): - 10 [15] Yadav, R.N.S and Agarwala, M (2011) Phytochemical analysis of some medicinal plants Journal of Phytology, 3, 10 - 14 [16] Constantine, K., Henry M and Margaret N (2020) In vitro anticancer, antimicrobial and antioxidant screening of compounds from Ricinus Communis Linn: A Review World Journal of Research and Review, 11 (5), - 11 [17] Bandar H, A Hijazi, H Rammal, A Hachem, Z Saad, B Badran (2013) Techniques for the extraction of bioactive compounds from Lebanese Urtica Dioica. American J of Phytomedicine and C Therapeutics, 6: 507 - 513 [18] Hammami H., R Mezghani-Jarraya, M Damak, and A Ayadi (2011) Molluscicidal activity of various solvent extractsfrom Solanum Nigrum Var Villosum L Aerial parts against Galba Truncatula Parasite, 18 (1): 63 - 70 [19] Pereira, A.A.F., C.R.C Franc, D.D.S Oliveira, R.J.D.A Mendes, J.D.R.S Goncalves, and I.G Rosa (2014) Evaluation of the molluscicidal potential of hydroalcoholic extracts of Jatropha gossypiifolia Linnaeus, 1753 on Biomphalaria glabrata (Say, 1818) Revista Instituto de Medicina Tropical de Sao Paulo, 56 (6): 505 - 510 [20] Sherbini, G.E., R Zayed, and E.E Sherbini (2011) Molluscicidal Activity of Some Solanum Species Extracts against the Snail Biomphalaria alexandrina Planta Medica, 77 (12): - [21] Singh, S.K., R.P Yadav, and A Singh (2010) Molluscicides from some common medicinal plants of eastern Uttar Pradesh, India Journal of Applied Toxicology, 30 (1): - [22] Salama M.M., E E Taher, and M M El-Bahy (2012) Molluscicidal and mosquitocidal activities of the essential oils of thymus capitatus Hof ET link and marrubium vulgare L Revista Instituto de Medicina Tropical de Sao Paulo 54 (5): 281 - 286 [23] Mandefro, B., S.T Mereta and A Ambelu (2018) Efficacy of Achyranthes aspera (L.) as a Molluscicidal Bait Formulation against Fresh Water Snail Biomphalaria pfeifferi Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, Article ID 2718585, - [24] Dai, L., Wang, W., and Dong, X (2011) Molluscicidal activity of cardiac glycosides from Nerium indicum against Pomacea canaliculata and its implications for the mechanisms of toxicity Environ Toxicol Pharmacol, 32, 226 - 232 [25] Upadhyay, A and Singh, K.D (2011) Inhibition kinetics of certain enzymes in the nervous tissue of vector snail Lymnaea acuminate by active molluscicidal components of Sapindus mukorossi and Terminalia chebula Chemosphere, 85 (6), 1095 - 1100 [26] Saravanan, M., Kumar, D and Malarvizhi, A (2010) Biosafety of Azadirachta indica (A Juss) leaves 120 Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững extracts on certain biochemical parameters of Labeo rohita J Biopest, 3, 227 - 231 [27] Suryavanshi, U., Sreepada, R.A and Ansari, Z.A (2011) A study on biochemical change in the penaeid shrimp, Metapenaeus monoceros (Fabricius) following exposure to sublethal doses of organochlorine pesticide (endosulfan) Chemosphere, 77, 1540 - 1550 [28] Kamble S and N Kamble (2013) Behavioural changes in freshwater snail Bellamya bengalensis due to acute toxicity of copper sulphate and Acacia sinuate International Journal of Environmental Science and Technology, (3): 1090 - 1104 [29] Salvio, C., A.J Faberi, A.N Lopez, P.L Manetti and N.L Clemente (2008) The efcacy of three metaldehyde pellets marketed in Argentina, on the control of Deroceras reticulatum (Măuller) Spanish Journal of Agricultural Research, (1): 70 - 77 [30] Ebenso, I.E (2004) Molluscicidal efects of neem (Azadirachta indica) extracts on edible tropical land snails Pest Management Science, (2): 178 - 182 [31] Gonzalez D.C and R.S Martın (2013) Molluscicidal efects of saponin-rich plant extracts on the grey feld slug Cienciae Investigacion Agraria, (2): 341 - 349 [32] Smith T.R., J White-Mciean, K Dickens, A.C Howe, and A Fox (2013) Efcacy of four molluscicides against the giant African Snail, Lissachatina fulica (Gastropoda: Pulmonata: Achitinidae) Florida Entomologist, 96 (2): 396 - 402 [33] Tiwari, F (2012) Bait formulation toxicity of plant derived molluscicides in attractant food pellets against vector snail, Lymnaea acuminate World Journal of Zoology, (1): 54 - 59 [34] Kumar, P., V.K Singh and D.K Singh (2012) Attractant food pellets containing molluscicides against the fresh water snail Indoplanorbis exustus Global Veterinaria, (2): 105 - 110 [35] Mandefro, B., S.T Mereta, Y Tariku, and A Ambelu (2017) Molluscicidal efect of Achyranthes aspera L (Amaranthaceae) aqueous extract on adult snails of Biomphalaria pfeiferi and Lymnaea natalensis Infectious Diseases of Poverty, (1): 133 - 138 Ngày chấp nhận đăng: 10/11/2021 Người phản biện: TS Lê Thanh Huyền Nghiên cứu chuyển giao, ứng dụng khoa học công nghệ sử dụng hợp lý tài nguyên, bảo vệ môi trường phát triển bền vững 121 ... 4: Biểu đồ thể hiệu diệt ốc bươu vàng hạt Thầu dầu Niclosamide phương pháp mồi 3.4 Định tính số hợp chất sinh học có cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu Cao chiết Ethanol hạt Thầu dầu từ dung môi... từ hạt Thầu dầu Để đánh giá hiệu phương pháp trích cao, người ta thường dựa hiệu suất trích cao Hiệu suất trích cao phản ánh tối ưu việc kết hợp điều kiện khác phương pháp ly trích Độ ẩm hạt Thầu. .. diệt tinh trùng [2 - 5] Ốc bươu vàng (Pomacea canaliculata) loài ốc nước xem 100 loài ngoại lai xâm hại phá hoại giới [6] Ốc bươu vàng cơng phá hủy thân non lúa ốc bươu vàng ăn khoảng - 24 lúa