GÓP PHẦN TÌM HIẾU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE LÁ TRÂU CÓ FICUS PUMILA L

TỔNG LIÊN ĐOÀN Đ LA AO ĐỘNG G VIỆT NAM N TRƯ ƯỜNG ĐẠI Đ HỌC TÔN ĐỨ ỨC THẮN NG KHOA KHOA K HỌ ỌC ỨNG DỤNG KHÓ ÓA LUẬN TỐT NGHIỆP N P GĨP P PHẦ ẦN TÌÌM HIỂU THÀN T H PH HẦN HÓA A HỌC C CAO O ETHYL ACET A TATE E LÁ TRÂU U CỔ Ổ FICU US PU UMIL LA L Ngườ ời hướng g dẫn: TS S LÊ TIẾN DŨNG G Ngư ười thực hiện: NG GUYỄN THỊ T HOA A Lớp : 10060201 Khóa a: 20 010-2015 THÀ ÀNH PHỐ Ố HỒ CH HÍ MINH, NĂM 201 15 LỜI CẢM ƠN  -Khóa luận tốt nghiệp thực phịng Hố học hợp chất có hoạt tính sinh học - Viện Cơng Nghệ Hóa Học - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, Số Mạc Đỉnh Chi, phường Bến Nghé, quận 1, Tp Hồ Chí Minh Với lịng trân trọng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến : TS Lê Tiến Dũng tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức chuyên ngành kinh nghiệm nghiên cứu, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi giúp em hồn thành tốt khóa luận Thầy cịn gương nghiên cứu khoa học giúp cho em có hành trang cần thiết bước đường nghiên cứu học tập TS Mai Đình Trị trưởng phịng phịng Hố học hợp chất có hoạt tính sinh học - Viện Cơng Nghệ Hóa Học - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, TS Phạm Thị Nhật Trinh tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi đóng góp nhiều ý kiến q báo giúp cho em hồn thành tốt khóa luận suốt thời gian em nghiên cứu Các Thầy Cơ ngành Kỹ Thuật Hóa Học–Trường Đại Học Tơn Đức Thắng tận tình dạy bảo cho em nhiều kiến thức suốt thời gian học tập vừa qua Các anh chị cử nhân Nguyễn Hữu An, Phạm Ngọc Ẩn, Nguyễn Thị Thanh Phúc, Nguyễn Thị Tố Quỳnh bạn khóa nhiệt tình giúp đỡ, đóng góp cho em góp ý quý báu suốt q trình thực khóa luận Cuối xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Cha, Mẹ động viên hỗ trợ mặt suốt trình học tập, thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2015 Sinh Viên : Nguyễn Thị Hoa LỜI CAM ĐOAN CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI PHỊNG HĨA HỌC CÁC CHẤT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC – VIỆN CƠNG NGHỆ HĨA HỌC – VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng hướng dẫn TS Lê Tiến Dũng Các nội dung nghiên cứu, kết đề tài trung thực chưa công bố hình thức trước Những số liệu bảng biểu phục vụ cho việc phân tích, nhận xét, đánh giá tác giả thu thập từ nguồn khác có ghi rõ phần tài liệu tham khảo Ngồi ra, luận văn cịn sử dụng số nhận xét, đánh số liệu tác giả khác, quan tổ chức khác có trích dẫn thích nguồn gốc Nếu phát có gian lận tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm nội dung khố luận Phịng vật liệu hóa dược, viện khoa học vật liệu không liên quan đến vi phạm tác quyền, quyền gây q trình thực (nếu có) TP Hồ Chí Minh, ngày 17 tháng năm 2015 Nguyễn Thị Hoa TĨM TẮT Q TRÌNH NGHIÊN CỨU  -Trong khố luận này, chúng tơi tiến hành nghiên cứu trâu cổ (Ficus pumila L.) thu hái thành phố Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng vào tháng năm 2013 Lá phơi khơ, xay nhỏ trích kiệt ethanol theo phương pháp ngâm dầm nhiệt độ phịng, quay thu hồi dung mơi, thu cao ethanol Sử dụng phương pháp trích pha rắn cao ethanol, giải ly đơn dung mơi có độ phân cực tăng dần: n-hexane, chloroform, ethyl acetate methanol Kết thu loại cao SKC cao ethyl acetate silica gel với hệ dung mơi giải ly n-hexane: ethyl acetate có độ phân cực tăng dần thu phân đoạn Trong phạm vi đề tài khảo sát phân đoạn Thực SKC silica gel, SKC silica gel pha đảo Rp-18 SKC gel sephadex LH-20 nhiều lần, cô lập hợp chất FPE4, FPE5 FPE6 Dựa vào kết phổ nghiệm, nhận danh hợp chất là: Rutin Hỗn hợp ba đồng phân -fructopyranose, -fructofuranose, -fructofuranose Bergapten Trong hợp chất trên, hỗn hợp ba đồng phân -fructopyranose, fructofuranose, -fructofuranose lần cô lập từ trâu cổ MỤC LỤC  -MỞ ĐẦU CHƯƠNG 01: TỔNG QUAN 1.1 ĐẶC ĐIỂM CỦA CÂY TRÂU CỔ 1.1.1 Khái quát 1.1.2 Mô tả thực vật 1.1.3 Phân bố, sinh thái 1.1.4 Cách trồng 1.2 CÔNG DỤNG CỦA CÂY TRÂU CỔ 1.2.1 Theo y học cổ truyền 1.2.2 Bài thuốc có trâu cổ 1.3 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.4 HOẠT TÍNH SINH HỌC 17 CHƯƠNG 02: THỰC NGHIỆM 19 2.1 ĐIỀU KIỆN THỰC NGHIỆM 19 2.1.1 Hóa chất 19 2.1.2 Dụng cụ 19 2.1.3 Thiết bị phân tích 19 2.2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.2.1 Nguyên liệu 20 2.2.2 Phương pháp tiến hành 20 2.3 ĐIỀU CHẾ CÁC LOẠI CAO 20 2.3.1 Điều chế cao ethanol 20 2.3.2 Điều chế loại cao 21 2.4 Q TRÌNH CƠ LẬP 21 2.5 SỐ LIỆU PHỔ NGHIỆM CÁC HỢP CHẤT PHÂN LẶP 25 2.5.1 Hợp chất FPE4 25 2.5.2 Hợp chất FPE5 26 2.5.3 Hợp chất FPE6 26 CHƯƠNG 03: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 GIỚI THIỆU CHUNG 27 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT CÔ LẬP 27 3.2.1 Xác định cấu trúc hợp chất FPE4 27 3.2.2 Xác định cấu trúc hợp chất FPE5 34 3.2.3 Xác định cấu trúc hợp chất FPE6 38 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 DANH MỤC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 PHỤ LỤC 46 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng Anh H Hexane C Chloroform EA Ethyl acetate EtOH Ethanol M Methanol MeOD Methanol Đơteri hóa SKLM Sắc ký lớp mỏng SKC Sắc ký cột 13 Tiếng Việt Rp18 Reversed Phase 18 Pha đảo C-18 NMR Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Carbon (13) Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance carbon (13) Hydro (1) Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance proton (1) C-NMR H-NMR DEPT HMBC HSQC Distortionless Enhancement by Polarization Transfer Phổ DEPT Heteronuclear Multiple Bond Phổ tương tác dị hạt nhân qua Coherence nhiều liên kết Heteronuclear Single Quantum Phổ tương tác dị hạt nhân qua Correlation liên kết  Chemical shift Độ chuyển dịch hóa học ppm Part per million Một phần triệu mp Melting point Điểm nóng chảy s Singlet Mũi đơn d Doublet Mũi đôi dd Double of doublet Mũi đôi đôi t Triplet Mũi ba m Multiplet Mũi đa J Coupling constant Hằng số ghép spin (M)Hz (Mega) Hertz g Gram mg Milligram kg Kilogram mL Mililit Glc Glucose Rha Rhamnose TLTK Tài liệu tham khảo DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 : Cây Trâu Cổ Hình 1.2 : Lá Trâu Cổ Hình 1.2 : Lá Trâu Cổ Hình 1.4 : Cây trâu cổ mọc bám bờ tường Hình 3.1 : Khung flavone 29 Hình 3.2: Tương quan HMBC vòng A FPE4 30 Hình 3.3: Tương quan HMBC vịng B FPE4 31 Hình 3.4: So sánh phổ HSQC tài liệu tham khảo hợp chất FPE6 35 Hình 3.5: Tương quan HMBC fructose 36 Hình 3.6: Khung coumarin 39 Hình 3.7: Tương quan HMBC hợp chất FPE6 39 DANH MỤC BẢNG BIỂU VÀ SƠ ĐỒ Bảng biểu Bảng 2.1: Kết sắc ký cột cao ethyl acetate 22 Bảng 2.2: Kết khảo sát phân đoạn E5 22 Bảng 2.3: Kết khảo sát phân đoạn E53 23 Bảng 2.4: Kết khảo sát phân đoạn E2 24 Bảng 2.5: Kết khảo sát phân đoạn E23 24 Bảng 3.1: Bảng so sánh số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR FPE4 với số liệu phổ H-NMR 13C-NMR rutin 32 Bảng 3.2: Bảng so sánh số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR FPE5 với số liệu phổ H-NMR 13C-NMR fructose 36 Bảng 3.3: Bảng so sánh số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR FPE6 với số liệu phổ H-NMR 13C-NMR bergapten 40 Sơ đồ Sơ đồ 2.1: Quy trình điều chế loại cao từ trâu cổ 21 Sơ đồ 2.2: Quy trình lập hai hợp chất FPE4 FPE5 từ cao ethyl acetate 23 Sơ đồ 2.3: Quy trình lập hợp chất FPE6 từ cao ethyl acetate 25 MỞ ĐẦU  Phụ lục 1.3 : Phổ DEPT FPE4 500 Phụ lục 1.4 : Phổ HMBC FPE4 511 Phụ lục 1.5 : Phổ HSQC FPE4 522 53 PHỤ LỤC PHỔ CỦA HỢP CHẤT FPE5 -fructopyranose  -fructofuranose  -fructofuranose Phụ ụ lục ụ 2.1 : Phổ 1H-NMR FPE5 544 Phụ lục 2.2 : Phổ 13C-NMR FPE5 555 Phụ lục 2.3 : Phổ DEPT FPE5 Phụ lục 2.4 : Phổ HMBC FPE5 566 Phụ lục 2.5 : Phổ HSQC FPE5 577 58 PHỤ LỤC PHỔ CỦA HỢP CHẤT FPE6   Bergapten Phụ lục 3.1 : Phổ 1H-NMR FPE6 599 Phụ lục 3.2 : Phổ 13C-NMR FPE6 600 Ph lục l 33.33 : Phổ DEPT ủ FPE6 Phụ 611 Phụ lục 3.4 : Phổ HMBC FPE6 622 Phụ lục 3.5 : Phổ HSQC FPE6 633 64 ... trường Do đó, hóa học hợp chất thi? ?n nhiên ngày quan tâm Bằng cách tiến hành tách chiết, cô lập, bán tổng hợp hợp chất có hoạt tính sinh học để tạo sản phẩm hữu ích từ cỏ thi? ?n nhiên có tác dụng thuốc... ĐIỀU KIỆN THỰC NGHIỆM 19 2.1.1 Hóa chất 19 2.1.2 Dụng cụ 19 2.1.3 Thi? ??t bị phân tích 19 2.2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.2.1 Nguyên liệu... 26 2.5.3 Hợp chất FPE6 26 CHƯƠNG 03: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 GIỚI THI? ??U CHUNG 27 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT CÔ LẬP 27 3.2.1 Xác định cấu trúc