bệnh viện Việt Tiệp Khái niệm chung về hoá sinh miễn dịch Dựa theo nguyên tắc của phản ứng miễn dịch Kháng nguyên + Kháng thể Phức hợp KN KT Tuy nhiên phức hợp này trong phân tích hoá sinh không thể x.
bệnh viện Việt Tiệp Khái niệm chung hoá sinh miễn dịch: Dựa theo nguyên tắc phản ứng miễn dịch: Kháng nguyên + Kháng thể Phức hợp KN-KT Tuy nhiên phức hợp phân tích hố sinh khơng thể xác định được, hàm lượng thàh phần cần xác định nhỏ bé Muốn xác định được, cần phải thông qua chất gắn đặc biệt, tuỳ theo loại phương pháp phân tích : + Kỹ thuật ELISA ( Enzyme Liked Immunosorbent assay ): Chất ghi dấu enzym + Kỹ thuật miễn dịch phóng xạ (RIA: Radio Immuno Assay) Chất ghi dấu đồng vị phóng xạ + Kỹ thuật Miễn dịch huỳnh quang (FIA: Fluorescence Immuno Assay ) Chất ghi dấu huỳnh quang + Kỹ thuật hoá phát quang ( Luminescence immunoasay), chất ghi dấu hợp chất phát quang hoá học ( Chemiluminescence producing compounds) 1.Xác định tố ung thư Xác định Virus Xác định thành phần hormon ( Nội tiết) Xác định hàm lượng số loại thuốc I Hoá sinh tuyến giáp • Một số nét đại cương hormon tuyến giáp 1.1 Tổng hợp, dự trữ giải phóng hormon tuyến giáp Việc tổng hợp T3 T4 xảy nang tuyến giáp, hấp thu iod máu, dựa vào chênh lệch gradien nồng độ, thực bơm iod màng tế bào Thyroglobulin - glycoprotein khối lượng phân tử 600 000 Dalton , chứa tyrosin, hệ thống enzym peroxidase có chức iod hố tyrosin Q trình tổng hợp diễn nang tuyến vận chuyển đến đỉnh màng nơi enzym peroxidase hoạt hoá Sự oxi hố iod, gắn iod vào nhóm tyrosin ghép đơi nhóm iod tyrosin với phạm vi phân tử thyroglobulin để tạo iodthyronin xúc tác peroxidase tuyến giáp Nếu điều kiện đủ iod hầu hết phân tử hormon tuyến giáp đưược tổng hợp thành T4, thiếu iod tỉ lệ T3 tăng lên Thyroglobulin iod hoá gồm T3 T4, chúng dự trữ chất keo Dưới tác dụng hormon kích thích tuyến giáp TSH, chất keo hấp thu lại vào tế bào dạng giọt nhỏ làm tan lysosome, T3 T4 giải phóng Mono - diiodthyrosine tạo thành Những hợp chất sau khử iod phạm vi rộng giới hạn thyroid iod bảo tồn TSH kích thích hấp thu iod iod hoá thyrogloblin giải phóng hormon tuyến giáp Peroxidase tuyến giáp bị ức chế chất kháng giáp propythiouracil mercaptoimidazol (methimadazol, Quá nhiều iod ức chế adenylate cyclase đáp ứng với TSH ức chế iod hoá thyroglobulin Đây hiệu ứng Wolff- Chaikoff Sau vài ngày với mức iod cao, tuyến giáp hấp thu iod thấp Nồng độ iod tuyến giáp giảm xuống tổng hợp thyroglobulin lại bắt đầu Hiệu ứng thường ứng dụng cho chuẩn bị bệnh nhân cường giáp trước phẫu thuật 1.2 Vận chuyển hormon tuyến giáp máu: Khi enzym lysosome giải phóng hormon tuyến giáp từ thyroglobulin,T3 T4 vận chuyển qua màng tế bào nang tuyến màng đáy nang vào máu, nơi chúng liên kết với protein huyết tương, protein giữ chức này, để giảm lực iodothyronin, thyroxine binding globulin (TBG), thyroxine binding prealbumin transthyretin (TBPA) albumin T4 gắn chặt chẽ T3 với loại protein Chỉ 0,015% T4 0,33% T3 không liên kết hay dạng tự huyết tương người bình thường, nên dù nồng độ T4 toàn phần gấp khoảng 50 lần T3 nồng độ T4 tự gấp lần T3 tự Thời gian bán huỷ T4 5-7 ngày, T3 1-2 ngày Trong đó, T3 T4 khỏi tuyến giáp vận chuyển huyết tương kết hợp với protein khác nhau, khoảng 60% kết hợp với Globulin ( TBG= Thyroxin Binding globulin ), 30% kết hợp với Pre albumin ( Tiền albumin), 10% kết hợp không đặc hiệu với albumin Như T3,T4 có lực theo thứ tự nhiều globulin, prealbumin albumin Phần hormon tự ít, khoảng 0,4% T3 0,02% T4 Tuy nhiên có hormon tự có tác dụng sinh học đến tế bào đích 1.3 Khái niệm hormon tự do: Có khác biệt định lượng nồng độ hormon tuyến giáp Tuy nhiên, tác dụng horrmon tuyến giáp xuất có liên quan với nồng độ hormon tự nồng độ hormon liên kết Người ta cho có hormon tự hấp thu vào mô,chức protein liên kết dự trữ hay ngăn ngừa thay đổi lớn nồng độ hormon tự T4 cho tiền hormon hầu hết T3, hoạt động sinh học hormon TG gián tiếp qua T3, thông qua gắn với receptor đặc hiệu Hầu hết T3 lưu hành máu tạo khử iod T4, phần lớn gan thận Trị số bình thường hormon tuyến giáp sau: T.T3 : (1,65 ± 0,73 ) nmol/l T.T4 : ( 88,12 ± 13,20) nmol/l FT3 : ( 4,89 ± 0,67 ) pmol/ml FT4 : ( 11,58 ± 2,06 )pmol/ml Hormon tuyến yên: Kích tố tuyến giáp –TSH Việc xác định TSH huyết nhằm xác định chế điều hoà vùng đồi, tuyến yên tuyến giáp TSH thông số việc chẩn đoán chức tuyến giáp, tăng tuyến giáp, bình giáp thiểu tuyến giáp Thơng số xét nghiệm kỹ thuật siêu nhậy phương pháp miễn dịch phóng xạ, miễn dịch huỳnh quang, hoá phát quang gần áp dụng rộng rãi Việt Nam Trị số bình thường TSH huyết 0,25 – 5,0 µUI/ml Trong trường hợp tăng tuyến giáp TSH < 0,15 µUI/ml Trường hợp thiểu tuyến giáp TSH >7µUI/ml TSH huyết giúp phân biệt thiểu tiên phát ( TSH tăng ) với thiểu thứ phát nguồn gốc tuyến yên ( TSH giảm ) Nồng độ TSH trở lại bình thường chứng tỏ việc điều trị bệnh tuyến giáp có hiệu * Chẩn đốn sinh học chức tuyến giáp Bệnh lý tuyến giáp hình thái học ( bướu giáp, basedow, viêm tuyến giáp, ung thư tuyến giáp ) chức phận tăng tuyến giáp, thiểu tuyến giáp, bình giáp Trong phần lớn trường hợp xét nghiệm hormon tuyến giáp hormon tuyến yên có giá trị xác định chức tuyến giáp Tăng tuyến giáp: Tăng tuyến giáp tăng tiết liên tục hormon tuyến giáp Sự tăng hormon không chịu điều hồ định nội mơi bình thường khơng thể kìm hãm Dạng tăng tuyến giáp tự nhiên thường hay gặp phụ nữ tuổi 30 – 50 ( mắc bệnh basedow) Nguyên nhân sinh bệnh bệnh basedow, bệnh tự miễn Rối loạn miễn dịch gây thương tổn tế bào tuyến giáp Rối loạn miễn dịch tế bào có vai trị chủ yếu ban đầu Rối loạn miễn dịch dịch thể biết thấy có mặt kháng thể kháng tuyến giáp máu lưu thơng Hai loại tự kháng thể có 80 – 90 % bệnh nhân bị basedow kháng thể kháng globulin tuyến giáp kháng thể kháng microsom Sự tăng tuyến giáp bệnh basedow kích thích chất thụ thể TSH globulin miễn dịch Bệnh Basedow gọi danh từ “ Tăng tuyến giáp tự miễn “ Các số hoá sinh tuyến giáp chẩn đoán tăng tuyến giáp Thiểu tuyến giáp: Thiểu tuyến giáp giảm tiết hormon tuyến giáp, gắn liền với giảm chức tuyến giáp, dẫn đến giảm chuyển hoá nguồn gốc thiểu tuyến giáp Cần phân biệt thiểu tuyến giáp tiên phát tuyến giáp với thiểu tuyến giáp thứ phát Sự khác chủ yếu : Về lâm sàng, thiểu tuyến giáp tiên phát thứ phát khác chỗ, dạng thứ phát khơng có phù niêm( ngược lại dạng tiên phát có chứng phù niêm ) Về mặt xét nghiệm hoá sinh, dạng tiên phát TSH huyết tăng, dạng thứ phát TSH giảm Về nguyên nhân sinh bệnh thiêủ tuyến giáp tiên phát: ( có nhiều nguyên nhân ): -Nguyên nhân tự miễn, dạng gặp chủ yếu phụ nữ sau thời kỳ mạn kinh Chứng phù niêm người trẻ dẫn đến viêm tuyến giáp tự miễn dạng teo -Nguyên nhân sau phẫu thuật cắt bỏ toàn phần tuyến giáp ( ung thư), cắt bỏ bán phần tuyến giáp ( basedow) phần tuyến giáp ( bướu giáp nhân ) -Nguyên nhân dùng thuốc kháng giáp trạng tổng hợp Bệnh giảm giảm liều dùng thuốc ngừng thuốc -Nguyên nhân thiếu iod Về nguyên nhân thiểu tuyến giáp thứ phát: Gắn liền với thiếu hụt điều hoà vùng đồi tuyến yên, với thiếu hụt kích tố TSH cần thiết để kích thích phát triển tế bào tuyến giáp Thiểu tuyến giáp thứ phát riêng biệt kết hợp với thiếu hụt khác, đặc biệt kích tố sinh dục kích tố thượng thận Phần lớn triệu chứng lâm sàng xét nghiệm , gắn liền trực tiếp đến thiếu hụt hormon tuyến giáp II.Những xét nghiệm chẩn đoán ung thư - Chỉ tố ung thư (CTUT) CTUT phân tử mà biến đổi nồng độ xuất phản ánh rối loạn chuyển hoá tế bào, liên quan đến bệnh sinh phát triển ung thư Có loại CTUT: * CTUT tế bào * CTUT thể dịch Đặc điểm tố ung thư: * Đặc hiệu * Nhậy * Chẩn đoán sớm * Đặc hiệu với quan * Xác định giai đoạn ung thư * Tiên lượng mức độ ung thư * Đánh giá hiệu điều trị Trên thực tế: -Không phải CTUT có giá trị chẩn đốn sớm Vì thực tế phải làm xét nghiệm sàng lọc hàng loạt Điều chưa thực Riêng PSA coi chẩn đoán sớm ung thư tiền liệt tuyến, AFP chẩn đoán sớm ung thư gan Chẩn đoán ung thư phổi : Cyfra 21-1 (Cytokeratin-19 fragment 21-1) *Bản chất mảnh Cytokeratin 19, chủ yếu mô phổi, nên đặc hiệu với mô Cytokeratin protein làm giá đđ́ không tan tế bào Nhưng mảnh Cytokeratin Cyfra 21-1 tan huyết * Giá trị Cyfra21-1: Khi tăng huyết thanh, có vai trị chẩn đốn ung thư phổi tế bào nhỏ * Độ đặc hiệu Cyfra 21-1 ung thư TB nhỏ phổi 95%-100% Độ đặc hiệu tăng xét nghiệm phối hợp với XN CEA ( Một CTUT đa dòng, thường hay dùng xét nghiệm để chẩn đoán ung thư dầy ) Nồng độ bình thường huyết 0-4ng/ml Chẩn đoán ung thư hệ thống tiêu hoá CA 72-4 ( Carbonhydrate antigen 72-4: Kháng nguyên hyđratcarbon 72-4) CA72-4 gọi TAG72 (Tumor associated glycoprotein 72) * Bản chất glycoprotein liên kết ung thư, tìm thấy Adenocarcinom đường tiêu hoá chủ yếu dầy, buồng trứng, phế quản * Giá trị xét nghiệm: CA72-4 đặc hiệu 100% với ung thư dầy,hơn hẳn CEA CA19-9 Nếu phói hợp với xét nghiệm CEA, CA19-9 làm tăng giá trị chẩn đốn Nịng độ bình thường CA72-4 huyết là: 2,26 ± 0,75 U/ml Chẩn đoán ung thư hệ thống tiêu hoá CEA ( Carcino-Embryonic Antigen : Khámg nguyên carcinom phôi) * Bản chất CEA glycoprotein gồm thành phần hyđrat carbon chuỗi polypeptit CEA sản xuất thời gian phơi thai, mã hố 14 gen Sau sinh ra, sản xuất bị kìm hãm nên xuất huyết người Trong trường hợp ung thư, ung thư đường tiêu hố, giải kìm hãm u, nên CEA tăng cường sản xuất, tăng lên máu * Giá trị cuả CEA chẩn đoán ung thư: Nó loại CTUT đa dịng, khơng đặc hiệu cho quan định Tuy nhiên CEA tố quan trọng adenocarcinom đại tràng trực tràng CEA cịn có vai trị chẩn đoán ung thư dầy, tuỵ, phổi, buồng trứng, cổ tử cung phối hợp xét nghiệm với số CTUT khác Nồng độ bình thường CEA huyết : 0,78-4,26 ng/ml Chẩn đoán ung thư hệ thống tiêu hoá CA19-9 ( Carbonhydrate Antigen19-9: Kháng nguyên hydrat carbon 19-9): *Bản chất: Là Glycolipid có biểu mô phôi thai, máu, nước tiểu, nước bọt, dịch dầy, dịch tuỵ, dịch mật, dịch tá tràng, dịch ối, tinh dịch * Giá trị CA 19-9: Có giá trị chẩn đốn ung thư tuỵ Nếu phối hợp xét nghiệm CA72-4 CEA có giá trị chẩn đốn ung thư dầy CA19-9 có giá trị theo dõi tiến triển điều trị ung thư tuỵ Nồng độ bình thường huyết là: ≤ 29,56 U/ml Chẩn đoán ung thư gan: AFP (Alpha- Fetoprotein) * Bản chất Glycoprotein có chuỗi polypeptid, thuộc nhóm protein phơi thai AFP tổng hợp gan phơi thai túi nỗn hoàng, đổ vào dịch ối, qua rau thai vào máu mẹ AFP cao vào tuần thứ 13, sau giảm dần máu mẹ * Giá trị AFP: Có giá trị để chẩn đốn theo dõi điều trị Hepatom, độ đặc hiệu 95-100%, độ nhậy 90-95% -Trong ung thư gan, AFP tăng cao, chí tới 1000.000U/ml -Trong trường hợp ung thư nơi khác di vào gan, AFP tăng không vượt 400U/ml - AFP hay dùng để phát sớm ung thư gan người có nguy cao : nghiện rượu,Viêm gan B mạn tính,Viêm gan C mạn tính, Xơ gan Nồng độ AFP bình thường máu: ≤ 8,5 IU/ml Chẩn đoán Ung thư vú: CA 15-3 ( Carbonhydrate antigen 15-3: Kháng nguyên hydrat carbon 15-3) * Bản chất: Là glycoprotein, có biểu mơ tế bào tiết chất tiết người bình thường * Giá trị chẩn đoán ung thư vú, với độ đặc hiệu 95% Nó có tác dụng phát sớm kỹ thuật chụp vú 4-7 tháng Nếu kết hợp với CEA giá trị chẩn đốn tăng lên Nồng độ CA 15-3 bình thường 2,14-28,34 UI/ml Chẩn đoán ung thư buồng trứng: CA125 ( Carbonhydrate Antigen 125: Kháng nguyên hydrat carbon 125) * Bản chất: Là Glycoprotein, tìm thấy dẫn xuất biểu mô đại tràng phôi thai, biểu mô phế quản, quản phôi thai * Giá trị CA125 chẩn đoán theo dõi điều trị Carcinom buồng trứng Nồng độ tố tương quan với khối u, phản ánh diễn biến lâm sàng Có thể tăng gấp hàng trăm lần bình thường Tuy nhiên cần kết hợp với xét nghiệm CEA CA72-4 để tăng giá trị chẩn đốn Nồng độ bình thường CA125 máu là≤ 35UI/m Chẩn đoán ung thư tiền liệt tuyến PSA ( Prostate- Specifie Antigen: Kháng nguyên đặc hiệu tuyến tiền liệt) * Bản chất: Là glycoprotein, mô tuyến tiền liệt sản xuất * Giá trị PSA: đặc biệt quan trọng, tố hoi coi chẩn đoán sớm ung thư, đặc hiệu với tuyến tiền liệt Nó dùng làm xét nghiệm sàng lọc cho nam giơí tuổi 50 Thường người ta cần làm xét nghiệm PSA đủ để xác định ung thư tiền liệt tuyến Nhưng trường hợp cần phân biệt với viêm, phì đại tuyến tiền liệt, nên phối hợp với PAP Chẩn đoán ung thư tiền liệt tuyến Nồng độ bình thường PSA tăng dần theo tuổi: - 40-49 tuổi : 0-2,5ng/ml -50-59 tuổi : 0-3,5ng/ml -60-69 tuổi : 0-4,5ng/ml -Trên 70 tuổi: 0-6,5ng/ml PAP ( Prostatic Acid phosphatase) * Bản chất glycoprotein sản xuất từ biểu mơ tuyến tiền liệt * PAP có giá trị chẩn doán ung thư tuyến tiền liệt kết hợp với xét nghiệm PSA Nồng độ PAP bình thường 0-2ng/ml ... tràng CEA cịn có vai trị chẩn đốn ung thư dầy, tuỵ, phổi, buồng trứng, cổ tử cung phối hợp xét nghiệm với số CTUT khác Nồng độ bình thường CEA huyết : 0,78-4,26 ng/ml Chẩn đoán ung thư hệ thống... II.Những xét nghiệm chẩn đoán ung thư - Chỉ tố ung thư (CTUT) CTUT phân tử mà biến đổi nồng độ xuất phản ánh rối loạn chuyển hoá tế bào, liên quan đến bệnh sinh phát triển ung thư Có loại CTUT: * CTUT... CTUT tế bào * CTUT thể dịch Đặc điểm tố ung thư: * Đặc hiệu * Nhậy * Chẩn đoán sớm * Đặc hiệu với quan * Xác định giai đoạn ung thư * Tiên lượng mức độ ung thư * Đánh giá hiệu điều trị Trên thực