LÊ ANH văn NGHIÊN cứu NÂNG cấp QUY mô TỔNG hợp TRUNG GIAN SULFONAMID TRONG QUY TRÌNH điều CHẾ PAZOPANIB KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - LÊ ANH VĂN NGHIÊN CỨU NÂNG CẤP QUY MÔ TỔNG HỢP TRUNG GIAN SULFONAMID TRONG QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ PAZOPANIB KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2022 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - LÊ ANH VĂN MÃ SINH VIÊN: 1701675 NGHIÊN CỨU NÂNG CẤP QUY MƠ TỔNG HỢP TRUNG GIAN SULFONAMID TRONG QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ PAZOPANIB KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Nguyễn Văn Giang NCS Bùi Thị Thanh Châm Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp Dược Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Để làm khóa luận này, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy TS Nguyễn Văn Giang, thầy PGS.TS Nguyễn Văn Hải chị NCS Bùi Thị Thanh Châm người thầy tận tình hướng dẫn, bảo tơi từ ngày đầu tiếp xúc với khoa học Sự hiểu biết, đam mê nhiệt huyết thầy động lực chỗ dựa vững cho để vượt qua khó khăn đường tìm kiếm ánh sáng khoa học Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu tồn thể thầy giáo Trường Đại Học Dược Hà Nội, cán viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam, khoa Hóa học - Trường Đại học Khoa học tự nhiên – Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho học tập hồn thành khố luận Tơi xin chân thành cảm ơn bạn, em thực khóa luận tham gia nghiên cứu khoa học phịng thí nghiệm Tổng hợp Hóa dược, Bộ Môn Công nghiệp Dược (đặc biệt bạn Nguyễn Vân Anh, em Nguyễn Mai Hương) đồng hành, động viên, chia sẻ với tơi suốt q trình thực khóa luận Cuối cùng, lời cảm ơn chân thành sâu sắc xin gửi tới bố mẹ, người thân gia đình tơi, bạn bè - người luôn động viên, chia sẻ chỗ dựa tinh thần vững cho đường Mặc dù cố gắng tạo điều kiện song kiến thức thân cịn hạn chế nên chắn khóa luận cịn nhiều thiếu sót Rất mong nhận đóng góp q báu thầy bạn để khóa luận hồn thiện Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 25 tháng 06 năm 2022 Sinh viên Lê Anh Văn MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ PAZOPANIB HYDROCLORID 1.1.1 Đặc điểm chung 1.1.2 Tính chất lí hóa 1.1.3 Biệt dược 1.1.4 Chỉ định, liều dùng 1.1.5 Sơ lược phương pháp tổng hợp pazopanib 1.2 TỔNG QUAN VỀ HỢP PHẦN SULFONAMID 1.2.1 Đặc điểm chung hợp phần sulfonamid 1.2.2 Tính chất lý hóa 1.2.3 Các phương pháp tổng hợp CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 NGUYÊN LIỆU VÀ THIẾT BỊ 13 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 14 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.3.1 Tổng hợp hóa học 15 2.3.2 Kiểm tra độ tinh khiết chất tổng hợp 15 2.3.3 Xác định cấu trúc chất tổng hợp 15 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 16 3.1 KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM 16 3.1.1 Khảo sát phản ứng tổng hợp 5-amino-2-methylbenzensulfonamid 16 3.1.2 Tổng hợp 5-amino-2-methylbenzensulfonamid quy mô 20 g/mẻ ……… 20 3.1.3 Tổng hợp 5-amino-2-methylbenzensulfonamid quy mô 100 g/mẻ ………22 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC CHẤT TỔNG HỢP ĐƯỢC BẰNG PHƯƠNG PHÁP PHỔ 25 3.2.1 Kết phân tích phổ hồng ngoại (IR) 25 3.2.2 Kết phân tích phổ khối lượng (MS) 25 3.2.3 Kết phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 26 3.3 BÀN LUẬN 28 3.3.1 Bàn luận phản ứng hóa học 28 3.3.2 Bàn luận kết phân tích phổ 33 3.3.3 Bàn luận q trình nâng cấp quy mơ 34 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT δ νmax 13 C-NMR H-NMR Độ chuyển dịch hóa học Số sóng tương ứng với cực đại hấp thụ xạ hồng ngoại dao động hóa trị Cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13 (Carbon 13 nuclear magnetic resonance) Cộng hưởng từ hạt nhân proton (Proton nuclear magnetic resonance) AcOH Ac2O Acid acetic Anhydrid acetic AUC BCRP Cmax CTCT CTPT CYP1A2 Diện tích đường cong Breast cancer resistance protein Nồng độ thuốc tối đa huyết tương Công thức cấu tạo Công thức phân tử Cytochrome P450 1A2 tham gia vào q trình chuyển hóa CYP3A4 xenobiotic thể người Cytochrome P450 3A4 tham gia vào trình chuyển hóa CYP2C8 DMA DCM dd DMF đvC EGFR EMA eq FDA g xenobiotic thể người Cytochrome P450 2C8 tham gia vào q trình chuyển hóa xenobiotic thể người Dimethylamin Dicloromethan Dung dịch N,N-Dimethylformamid Đơn vị carbon Thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (Epidermal growth factor receptor) Cơ quan Quản lí Dược phẩm châu Âu (European Medicines Agency) Equivalent (đương lượng) Cục quản lý Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ (Food and Drug Administration) Gam hn Giờ IR Bức xạ hồng ngoại (Infrared) IC50 Nồng độ ức chế tối đa nửa KLPT MHRA Khối lượng phân tử Cơ quan Quản lý thuốc sản phẩm chăm sóc sức khỏe Anh m/z (Medicine and Healthcare product Regulatory Agency) Tỷ số khối lượng điện tích ion MS One-pot RCC Phổ khối lượng (Mass spectrometry) Các phản ứng liên tiếp thực bình Ung thư biểu mơ tế bào thận tiến triển (Renal Cell Carcinoma) Rfn rt Hệ số lưu giữ (Retention factor) Nhiệt độ phòng SKLM STT STS Tmax TGA Sắc ký lớp mỏng Số thứ tự Sarcoma mô mềm tiến triển (Soft Tissue Sarcoma) Thời gian thuốc đạt nồng độ tối đa huyết tương Cơ quan quản lý dược phẩm Úc (Therapeutic Goods Administration) THF TKI Tetrahydrofuran Chất ức chế tyrosin-kinase (tyrosine-kinase inhibitor) TMSCl to tonc VEGFR Trimethylsilyl clorid Nhiệt độ Nhiệt độ nóng chảy Thụ thể yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (vascular endothelial growth factor receptor) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần phần trăm theo khối lượng nguyên tố pazopanib hydroclorid……………………………………………………………………… Bảng 1.2 Thành phần phần trăm theo khối lượng nguyên tố hợp phần sulfonamid………………………………………………………………… ……….5 Bảng 2.1 Danh mục dung môi, hóa chất………… ……………………… 13 Bảng 2.2 Danh mục dụng cụ, thiết bị…………………………………… .14 Bảng 3.1 Ảnh hưởng kim loại đến hiệu suất phản ứng tổng hợp chất 3… 16 Bảng 3.2 Ảnh hưởng tỷ lệ Ac2O/AcOH tới phản ứng tổng hợp chất 3… … 17 Bảng 3.3 Ảnh hưởng dung môi đến hiệu suất phản ứng tổng hợp chất .`18 Bảng 3.4 Ảnh hưởng pH khối phản ứng sau trung hòa đến hiệu suất phản ứng tổng hợp chất 3…………………………………………………… ……………….19 Bảng 3.5 Ảnh hưởng phương pháp xử lý nước đến hiệu suất phản ứng tổng hợp N-(p-tolyl)acetamid ………………………………………………………… 21 Bảng 3.6 Kết phân tích phổ IR…………………………………………… ….25 Bảng 3.7 Kết phân tích phổ khối lượng MS …………… …………… 25 Bảng 3.8 Kết phân tích phổ 1H-NMR…… ………………………… …… 26 Bảng 3.9 Kết phân tích phổ 13C-NMR……………………………… ……….26 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo pazopanib hydroclorid…………………………… Hình 1.2 Các hợp phần pazopanib ……………… ……………… ……………4 Hình 1.3 Phương pháp tổng hợp pazopanib từ hợp phần indazol, pyrimidin sulfonamid ………………………………………………………………… …….4 Hình 1.4 Cơng thức cấu tạo hợp phần sulfonamid pazopanib………………… Hình 1.5 Sơ đồ tổng hợp 5-amino-2-methylbenzensulfonamid từ N-(p-tolyl) acetamid 2-methyl-5-nitrobenzensulfonamid……………………………………………… Hình 1.6 Sơ đồ tổng hợp amid theo Mohammad Ghaffarzadeh Pegah Akhavan……………………………………………………………………………… Hình 1.7 Sơ đồ tổng hợp amid theo Watanabe cộng sự………………………… Hình 1.8 Sơ đồ tổng hợp amid theo Xu cộng chế phản ứng đề xuất ……………………………………………………………………………… … …8 Hình 1.9 Sơ đồ tổng hợp amid theo Ma cộng (cũ)……………… ……………8 Hình 1.10 Sơ đồ tổng hợp amid theo Hu cộng sự………………………………… Hình 1.11 Sơ đồ tổng hợp amid theo Ma cộng năm 2019………………… ….8 Hình 1.12 Sơ đồ tổng hợp amid theo Zeng cộng sự…………………………….… Hình 1.13 Sơ đồ tổng hợp amid theo Vishwakarma cộng sự………………………9 Hình 1.14 Sơ đồ tổng hợp amid theo Hu cộng năm 2017 có xúc tác Niken…….9 Hình 1.15 Sơ đồ tổng hợp amid theo Hu cộng năm 2017 khơng có xúc tác Niken…………………………………………………………………………………10 Hình 1.16 Sơ đồ tổng hợp amid theo Kim cộng sự………………………………10 Hình 1.17 Sơ đồ tổng hợp amid theo Maleczka Jr cộng sự…………………… 10 Hình 1.18 Sơ đồ tổng hợp amid theo Hamann cộng sự………………………… 11 Hình 1.19 Sơ đồ tổng hợp amid theo Benaglia cộng sự………………….……… 11 Hình 1.20 Cơ chế phản ứng sulfocloro hóa parafin…………………………… 11 Hình 1.21 Các giai đoạn phản ứng sulfocloro hóa Aren……………………12 Hình 1.22 Con đường lựa chọn tổng hợp 5-amino-2-methylbenzensulfonamid…… 12 Hình 2.1 Sơ đồ tổng hợp 5-amino-2-methylbenzensulfonamid………………….….14 Hình 3.1 Cơ chế phản ứng trình khử nitro………………………………………28 Hình 3.2 Các sản phẩm trung gian trình khử nitro………………………….29 Hình 3.3 Cơ chế phản ứng q trình amid hóa……………………………………….29 Hình 3.4 Cơ chế phản ứng q trình clorosulfo hóa…………………………………30 Hình 3.5 Cơ chế phản ứng q trình sulfonamid hóa……………………………… 31 Hình 3.6 Cơ chế phản ứng trình thủy phân amid……………………………… 32 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư bệnh nguy hiểm ngày phổ biến Đã có nhiều phương pháp sử dụng để điều trị ung thư gồm: phẫu thuật, xạ trị, hoá trị liệu, liệu pháp hormon điều trị đích, hướng điều trị nhắm tới phân tử đích đường đầy triển vọng cho nhà khoa học từ cuối kỷ 20 đến Trong số đích tác dụng biết tyrosin-kinase enzym quan trọng, liên quan trực tiếp đến hình thành mạch máu ni dưỡng tế bào ung thư [17] Pazopanib hydroclorid (biệt dược: Votrient) thuốc ức chế đa thụ thể tyrosinkinase qua việc ức chế cạnh tranh với adenosin triphosphat (ATP) gắn kết vào phần bên tế bào thụ thể Pazopanib FDA phê duyệt năm 2009, sau Cơ quan Quản lý Dược phẩm châu Âu (EMA), Cơ quan Quản lý thuốc sản phẩm chăm sóc sức khỏe Anh (MHRA) Cơ quan quản lý Dược phẩm Úc (TGA) chấp nhận tháng năm 2010 để điều trị ung thư biểu mô tế bào thận tiến triển (RCC) sarcoma mô mềm tiến triển (STS) dùng hóa trị để điều trị di trước [3], [4] Theo phương pháp công bố, pazopanib hydroclorid tổng hợp từ hợp phần vòng thơm (indazol, pyrimidin, benzensulfonamid) hợp phần methyl, pyrimidin hợp phần cầu nối với hợp phần lại.[2], [3], [4] Trong nghiên cứu trước, tác giả cải tiến quy trình để tổng hợp nguyên liệu quan trọng sulfonamid Tuy nhiên, quy trình cịn số hạn chế như: q trình khử - acyl hóa phức tạp, amin bị oxy hóa khơng khí làm giảm hiệu suất phản ứng; giai đoạn sử dụng dung mơi methanol an tồn, đắt tiền; q trình nạp liệu giai đoạn sulfonamid hóa chưa thuận lợi, phải dùng lượng lớn aceton để trợ tan Để góp phần hướng tới tự chủ nguyên liệu thuốc phục vụ cho công nghiệp dược Việt Nam thuốc hết hạn độc quyền, thực đề tài “Nghiên cứu nâng cấp quy mô tổng hợp trung gian sulfonamid quy trình điều chế pazopanib” với mục tiêu: Tổng hợp trung gian 5-amino-2-methylbenzensulfonamid quy mô 100 g/mẻ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Đình Luyện (2014), "Kỹ Thuật Hoá Dược Tập 1", NXB Y Học, Hà Nội, pp 50-51 Nguyễn Gia Anh Tuấn (2018), "Nghiên cứu tổng hợp thuốc chống ung thư pazopanib hydroclorid Phần I: Tổng hợp hợp phần indazol sulfonamid", Tạp chí nghiên cứu dược thông tin thuốc, pp 33-37 Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Văn Hải, et al (2018), "Nghiên cứu tổng hợp thuốc chống ung thư pazopanib hydroclorid Phần I: Tổng hợp hợp phần indazol sulfonamid", Tạp chí Nghiên cứu dược & Thông tin thuốc,, pp 33-37 Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Văn Hải, et al (2018), "Nghiên cứu tổng hợp thuốc chống ung thư pazopanib hydroclorid Phần II: Tổng hợp pazopanib hydroclorid từ 2,3-dimethyl-lH-indazol-6-amin quy mô phịng thí nghiệm," Tạp chí dược học, pp 56 - 58 Tiếng Anh Baruah R N (2000 (39)), " Indian J Chem - Sect B Org Med Chem," pp 300–303 Cheung, C W, et al (2018), "Manganese-Mediated Reductive Transamidation of Tertiary Amides with Nitroarenes", Journal of the American Chemical Society, pp 6789–6792 Cheung, C W, et al (2019), "Manganese-mediated reductive amidation of esters with nitroarenes", Organic Chemistry Frontiers, pp 756–761 Cheung, C W., et al (2017), "Nickel-Catalyzed Reductive Transamidation of Secondary Amides with Nitroarenes", ACS Catalysis, pp 7092–7096 D Cella, Beaumont J.L (2016), "Pazopanib in the treatment of advanced renal cell carcinoma", Ther Adv Urol, pp 61–69 10 de Wit D, van Erp NP, et al (2014), "Therapeutic drug monitoring to individualize the dosing of pazopanib: a pharmacokinetic feasibility study", Ther Drug Monit,, pp 37-331 11 Department of Helth and Ageing Therapeutic Goods Administration (2010), "Australian public assessment report for pazopanib hydrochloride," Australia, pp 12 Ghaffarzadeh M., Akhavan P (2014), "Reductive Acylation of Nitroarenes to Anilides by Sodium Sulfite in Carboxylic Acids," Chemistry Letters, 43(9),, pp 1417-1419 13 Haofei Q.I, et al (2011), "Synthesis of Pazopanib Hydrochloride", Chin JMAP, pp 58-66 14 Jaffari G.A., Nunn A.J (1973), "Methylation of indazoles and related reactions", J Chem Soc [Perkin 1], pp 2371-2374 15 Jain S K., Aravinda Kumar, et al (2014), "Facile access to amides and hydroxamic acids directly from nitroarenes.", Org Biomol Chem., 12(33),, pp 6465-6469 16 Keisner S.V, Shah S.R (2011), "Pazopanib: The Newest Tyrosine Kinase Inhibitor for the Treatment of Advanced or Metastatic Renal Cell Carcinoma", Drugs, pp 17 Kerbel R.S (2008), "Tumor angiogenesis", N Engl J Med, pp 2039-2049 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Kim B H., Han, R., Piao, F., Jun, Y M., Baik, W., & Lee, B M., (2003), " Indium-mediated one-pot reductive conversion of nitroarenes to Narylacetamides.", Tetrahedron Letters, 44(1), pp 77-79 Ling L., Chen, et al (2019), "Chromium-Catalyzed Activation of Acyl C–O Bonds with Magnesium for Amidation of Esters with Nitroarenes," Organic Letters,pp 1912–1916 Maleczka R., & Rahaim, R (2006), "Palladium-Catalyzed Silane/Siloxane Reductions in the One-Pot Conversion of Nitro Compounds into Their Amines, Hydroxylamines, Amides, Sulfon-amides, and Carbamates.", Synthesis, 2006(19),, pp 3316-3340 Maltha A (1994), "Manganese Oxides as Catalysts for the Selective Reduction of Nitrobenzene to Nitrosobenzene", Journal of Catalysis, 149(2), pp 364-374 Pérez R, et al (1997), "Synthesis of Aminotoluenesulfonamide Derivatives Using Conventional Heating or Microwave-Assisted Methods", Org Prep Proced Int, pp 671-677 Wahba A E., Peng J., et al (2009), "Reductive amidation of nitroarenes: a practical approach for the amidation of natural products", Tetrahedron Letters,, pp 3901–3904 Wang, S.-P., et al (2019), "Direct Amidation of Carboxylic Acids with Nitroarenes", The Journal of Organic Chemistry Watanabe, Y Tsuji, et al (1984), "Platinum complex catalyzed reductive Nacylation of nitro compounds", The Journal of Organic Chemistry, pp 4451– 4455 Wienhöfer G., Sorribes, I., Boddien, A., Westerhaus, F., Junge, K., Junge, H., … Beller, M (2011), " General and Selective Iron-Catalyzed Transfer Hydrogenation of Nitroarenes without Base," Journal of the American Chemical Society, 133(32),, pp 12875–12879 Xu Z., Du, X., Zheng, M., & Chen, S, (2006), "A Novel Synthesis of NArylamides from Nitroarenes via Reductive N-Acylation with Red Phosphorus and Iodine," Synlett,, pp 1953–1955 https://drugbank.vn/thuoc/Votrient-200-mg&VN-2028017?fbclid=IwAR1OvAZMdUvEAhun2IV0QzHey3dyZrrR6mkOEUi5vrAvRIOLrkiZhn5fGg, pp PHỤ LỤC Phụ lục Phổ MS hợp chất N-(p-tolyl) acetamid Phụ lục Phổ MS hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl) acetamid Phụ lục Phổ MS hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất N-(p-tolyl)acetamid Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl) acetamid Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất N-(p-tolyl)acetamid Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl) acetamid Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid Phụ lục 10 Phổ IR hợp chất N-(p-tolyl)acetamid Phụ lục 11 Phổ IR hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl) acetamid Phụ lục 12 Phổ IR hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid Phụ lục 1: Phổ MS hợp chất N-(p-tolyl)acetamid Phụ lục 2: Phổ MS hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl)acetamid Phụ lục 3: Phổ MS hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid Phụ lục 4: Phổ 1H-NMR hợp chất N-(p-tolyl)acetamid Phụ lục 5: Phổ 1H-NMR hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl)acetamid Phụ lục 6: Phổ 1H-NMR hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid Phụ lục 7: Phổ 13C-NMR hợp chất N-(p-tolyl) acetamid Phụ lục 8: Phổ 13C-NMR hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl)acetamid Phụ lục 9: Phổ 13C-NMR hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid Phụ lục 10: Phổ IR hợp chất N-(p-tolyl)acetamid Phụ lục 11: Phổ IR hợp chất N-(4-methyl-3-sulfamoylphenyl)acetamid Phụ lục 12: Phổ IR hợp chất 5-amino-2-methylbenzensulfonamid ... ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - LÊ ANH VĂN MÃ SINH VIÊN: 1701675 NGHIÊN CỨU NÂNG CẤP QUY MÔ TỔNG HỢP TRUNG GIAN SULFONAMID TRONG QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ PAZOPANIB KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người... cho công nghiệp dược Việt Nam thuốc hết hạn độc quy? ??n, thực đề tài ? ?Nghiên cứu nâng cấp quy mô tổng hợp trung gian sulfonamid quy trình điều chế pazopanib? ?? với mục tiêu: Tổng hợp trung gian 5-amino-2-methylbenzensulfonamid... hóa quy trình tổng hợp Tiến hành nâng cấp quy mô tổng hợp chất 3, 4, quy mô 20 g đến 100g nguyên liệu 14 2.2.3 Kiểm tra độ tinh khiết khẳng định cấu trúc hợp chất trung gian sản phẩm cuối tổng hợp