NGUYỄN MẠNH đức XÂY DỰNG QUI TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG NHANH SILDENAFIL CITRAT TRONG VIÊN NÉN tự TẠO BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ HỒNG NGOẠI KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dƣợc sĩ

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN MẠNH ĐỨC Mã sinh viên: 1701094 XÂY DỰNG QUI TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG NHANH SILDENAFIL CITRAT TRONG VIÊN NÉN TỰ TẠO BẰNG PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ HỒNG NGOẠI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Lê Đình Chi ThS Bùi Văn Trung Nơi thực hiện: Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ƣơng HÀ NỘI – 2022 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực đề tài “Xây dựng qui trình định lượng nhanh Sildenafil citrat viên nén tự tạo quang phổ hồng ngoại”, làm việc nghiêm túc, cố gắng, nỗ lực thân, em nhận nhiều động viên, khích lệ từ phía gia đình, thầy cô, bạn bè nhà trường Trước hết, em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới PGS.TS Lê Đình Chi – người thầy tận tình dìu dắt, bảo em suốt trình học tập thực đề tài Đồng thời, em xin gửi lời cảm ơn tới ThS Bùi Văn Trung – người thầy tận tình bảo đóng góp nhiều ý kiến giúp em hồn thành khố luận Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến anh chị khoa Vật lý – Đo lường Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương, hỗ trợ, tạo điều kiện cho em trình nghiên cứu Từ đáy lịng mình, em xin bày tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới gia đình thân u, cảm ơn người bạn thân thiết khích lệ, giúp đỡ em trình nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên Nguyễn Mạnh Đức MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT i DANH MỤC CÁC HÌNH ii DANH MỤC CÁC BẢNG iv ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Sildenafil citrat .2 1.1.1 Công thức cấu tạo: 1.1.2 Tính chất lý hố .2 1.1.3 Dược động học: .2 1.1.4 Cơ chế tác dụng dược lý 1.1.5 Chỉ định 1.1.6 Dạng bào chế 1.2 Phƣơng pháp định lƣợng Sildenafil citrat sắc ký lỏng hiệu cao 1.3 Một số kỹ thuật phân tích nhanh ứng dụng quang phổ hồng ngoại .4 1.3.1 Kỹ thuật đo phản xạ toàn phần suy giảm 1.3.2 Kỹ thuật đo phản xạ khuếch tán 1.3.3 Ưu điểm quang phổ hồng ngoại 1.3.4 Nhược điểm kỹ thuật đo phổ hồng ngoại 1.3.5 Khả ứng dụng phổ hồng ngoại phân tích định lượng 1.4 Một số phƣơng pháp tốn hóa (Chemometrics) thƣờng đƣợc sử dụng phân tích quang phổ 1.4.1 Phương pháp bình phương tối thiểu thơng thường (classical least square - CLS) .10 1.4.2 Phương pháp bình phương tối thiểu nghịch đảo (inverse least squares - ILS) 11 1.4.3 Phương pháp bình phương tối thiểu phần (partial least square-PLS) 11 1.4.4 Phương pháp hồi quy cấu tử (principal component regression -PCR) 11 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Nguyên liệu, thiết bị 13 2.1.1 Nguyên liệu 13 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ 13 2.2 Nội dung nghiên cứu 13 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 13 2.3.1 Xác định hàm lượng sidenafil citrat nguyên liệu Sildenafil citrat .13 2.3.2 Xây dựng qui trình định lượng Sildenafil citrat viên nén tự tạo quang phổ cận hồng ngoại 14 2.3.3 Xây dựng qui trình định lượng Sildenafil citrat viên nén tự tạo quang phổ hồng ngoại 14 2.4 Thẩm định phƣơng pháp phân tích xây dựng 14 2.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 14 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .15 3.1 Định lƣợng nguyên liệu Sildenafil citrat 15 3.1.1 Điều kiện phân tích 15 3.1.2 Kết 15 3.2 Chuẩn bị mẫu 16 3.2.1 Xây dựng công thức bào chế cho viên nén Sildenafil citrat 16 3.2.2 Xây dựng tỉ lệ phối trộn hoạt chất hỗn hợp tá dược 16 3.2.3 Lựa chọn mơ hình Chemometrics: 17 3.3 Xây dựng phƣơng pháp định lƣợng Sildenafil citrat viên nén tự tạo phƣơng pháp đo phổ cận hồng ngoại NIR 17 3.3.1 Lựa chọn kỹ thuật đo 18 3.3.2 Lựa chọn điều kiện đo phổ: 18 3.3.3 Xây dựng mơ hình định lượng phần mềm TQ Analyst 18 3.3.4 Kết mơ hình định lượng mẫu viên xây dựng .18 3.3.5 Định lượng sildenafil citrat mẫu viên nén mơ hình mơ hình xây dựng 19 3.4 Xây dựng phƣơng pháp định lƣợng Sildenafil citrat viên nén tự tạo phƣơng pháp đo phổ hồng ngoại MIR 20 3.4.1 Lựa chọn kỹ thuật đo 20 3.4.2 Lựa chọn điều kiện đo phổ 20 3.4.3 Lựa chọn mơ hình định lượng phần mềm TQ Analyst 20 3.4.4 Định lượng Sildenafil citrat hỗn hợp bột viên mơ hình xây dựng 22 3.5 Thẩm định mơ hình xây dựng 24 3.5.1 Độ đặc hiệu 24 3.5.2 Độ tuyến tính .24 3.5.3 Độ .25 3.5.4 Khoảng xác định 31 3.5.5 Độ xác trung gian 31 3.6 Bàn luận .36 CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN 39 PHỤ LỤC PL - PL - Phổ hồng ngoại mẫu thử, mẫu chuẩn, placebo PL - PL - Phổ cận hồng ngoại mẫu chuẩn, placebo mẫu thử PL - 11 PL - Sắc ký đồ PL - 14 PL – Các bƣớc sử dụng phần mềm TQ Analyst để xây dựng phƣơng pháp PL-16 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Tiếng Anh Tiếng Việt SIL Sildenafil citrate Sildenafil citrat HPLC High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao IR Infrared Hồng ngoại NIR Near Infrared Hồng ngoại gần MIR Mid Infrared Hồng ngoại FIR Far Infrared Hồng ngoại xa ATR Attenuated Total Reflectance Phản xạ tồn phần suy giảm i DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1.Cơng thức cấu tạo Sildenafil citrat [11] Hình 1.2 Kỹ thuật đo phản xạ toàn phần suy giảm Hình 1.3 Kỹ thuật đo phản xạ khuếch tán Hình 3.1 Hình ảnh phổ Sildenafil citrat chuẩn placebo 18 Hình 3.2 Mơ hình định lượng Sildenafil citrat phương pháp quang phổ cận hồng ngoại (Đồ thị hồi quy giá trị thực giá trị tính tốn từ mơ hình) 19 Hình 3.3.Kết định lượng Sildenafil citrat viên nén mơ hình 19 Hình 3.11 Mơ hình định lượng Sildenafil citrat phương pháp quang phổ hồng ngoại Normalize điểm 939,7 cm-1 21 Hình 3.12 Mơ hình định lượng Sildenafil citrat phương pháp quang phổ hồng ngoại Normalize điểm 1357,7 cm-1 22 Hình 3.13 Mơ hình định lượng Sildenafil citrat phương pháp quang phổ hồng ngoại Normalize điểm 1697,6 cm-1 22 Hình 3.14.: Kết định lượng Sildenafil citrat mơ hình Nomalize số sóng 939,7 cm-1 22 Hình 3.15 Kết định lượng Sildenafil citrat mơ hình Nomalize số sóng 1357,7 cm-1 23 Hình 3.16 Kết định lượng Sildenafil citrat mơ hình Nomalize số sóng 1697,6 cm-1 23 Hình PL - 1 Phổ hồng ngoại Sildenafil chuẩn PL - Hình PL - Phổ hồng ngoại placebo PL - Hình PL - Phổ hồng ngoại viên nén mơ hình Sildenafil placebo với hàm lượng Sildenafil 25 % PL - Hình PL - Phổ MIR lần đo bột Sildenafil citrat α = 25 % trước Normalize PL - Hình PL - Phổ MIR Sildenafil citrat α = 25 % sau Normalize số sóng 939,7 cm-1 PL - Hình PL - Phổ MIR Sildenafil citrat α = 25 % sau Normalize số sóng 1357,7 cm-1 PL - Hình PL - Phổ MIR Sildenafil citrat α = 25 % sau Normalize số sóng 1697,6 cm-1 PL - Hình PL - Phổ hỗn hợp bột Sildenafil với placebo tỉ lệ khác sau Normalize số sóng 939,7 cm-1 PL - Hình PL - Phổ hỗn hợp bột Sildenafil với placebo tỉ lệ khác sau Normalize số sóng 1357,7 cm-1 PL - Hình PL - 10 Phổ hỗn hợp bột Sildenafil với placebo tỉ lệ khác sau Normalize số sóng 1697,6 cm-1 PL - 10 Hình PL - Phổ cận hồng ngoại Sildenafil chuẩn PL - 11 Hình PL - 2 Phổ cận hồng ngoại placebo PL - 12 Hình PL - Phổ cận hồng ngoại Sildenafil hàm lượng 25% viên nén mơ hìnhPL -13 Hình PL - Sắc ký đồ dung dịch chuẩn PL - 14 Hình PL - Sắc ký đồ dung dịch thử PL - 15 Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Description PL - 16 ii Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Pathlength PL - 17 Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Components PL - 19 Hình PL - 4 Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Standards PL - 19 Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Spectra PL - 20 Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Regions PL - 20 iii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Độ thích hợp hệ thống định lượng Sildenafil citrat HPLC 15 Bảng 3.2 Kết xác định hàm lượng nguyên liệu Sildenafil citrat 16 Bảng 3.3 Công thức bào chế viên nén Sildenafil citrat 16 Bảng 3.4.Giá trị α sử dụng để xây dựng mơ hình định lượng Sildenafil citrat .17 Bảng 3.5 Kết đánh giá độ tuyến tính mơ hình định lượng Sildenafil citrat .24 Bảng 3.6 Kết đánh giá nội mơ hình .25 Bảng 3.7 Kết độ phương pháp đo cận hồng ngoại 27 Bảng 3.8 Độ phương pháp đo hồng ngoại nomalize bước sóng 939,7 cm-1 28 Bảng 3.9 Độ phương pháp đo hồng ngoại nomalize bước sóng 1357,7 cm-1 28 Bảng 3.10 Độ phương pháp đo hồng ngoại nomalize bước sóng 1697,6 cm-1 30 Bảng 3.11 Kết độ xác trung gian phương pháp đo cận hồng ngoại 32 Bảng 3.12 Kết độ xác trung gian phương pháp đo hồng ngoại normalize điểm 939,7 33 Bảng 3.13 Kết độ xác trung gian phương pháp đo hồng ngoại normalize điểm 1357,7 34 Bảng 3.14 Kết độ xác trung gian phương pháp đo hồng ngoại normalize điểm 1697,6 34 iv ĐẶT VẤN ĐỀ Sildenafil thuốc ức chế chọn lọc phosphodiesterase typ (PDE-5 d ng để điều trị loạn chức cương dương vật tăng huyết áp động mạch phổi [1] Sildenafil biết đến với biệt dược gốc tiếng Viagra, Việt Nam có khoảng 107 chế phẩm viên nén chưa sildenafil (dưới dạng sildenafil citrat đăng ký lưu hành thị trường Thuốc chứa sildenafil citrat (SIL thuộc danh mục thuốc phải kê đơn phải kiểm soát chất lượng chặt chẽ lưu hành Định lượng hàm lượng dược chất chế phẩm thuốc tiêu quan trọng để đảm bảo chất lượng Đối với sildenafil citrat, hàm lượng dược chất nguyên liệu thành phẩm xác định chủ yếu phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC (Dược điển Anh, Dược điển Châu Âu, Dược điển Mỹ [3,5,6] Phương pháp có độ xác cao gặp phải số nhược điểm tốn nhiều thời gian, chí phí để phân tích tránh khỏi phải sử dụng dung mơi hóa chất độc hại, ảnh hưởng đến môi trường sức khỏe kiểm nghiệm viên Phương pháp quang phổ hồng ngoại gần phát triển kết hợp với phương pháp phân tích liệu giúp phân tích thuốc nhanh, phương pháp phân tích xanh, thân thiện với môi trường người Hai kỹ thuật phân tích phổ hồng ngoại nhanh, trực tiếp ứng dụng nhiều kỹ thuật đo phản xạ khuếch tán với v ng đo cận hồng ngoại (NIR kỹ thuật đo phản xạ toàn phần suy giảm sử dụng v ng hồng ngoại (MIR Đề tài giới thiệu thêm ứng dụng kỹ thuật đo trực tiếp đối tượng nghiên cứu mẫu viên nén sildenafil tự tạo với mục tiêu: Xây dự ng thẩ m đ ị nh qui trình đ ị nh lư ợ ng sildenafil citrat nề n mẫ u viên nén tự tạ o bằ ng phư ng pháp quang phổ cậ n hồ ng ngoạ i vớ i kỹ thuậ t đ o phả n xạ khuế ch tan Xây dự ng thẩ m đ ị nh qui trình đ ị nh lư ợ ng sildenafil citrat nề n mẫ u viên nén tự tạ o bằ ng phư ng pháp quang phổ hồ ng ngoạ i giữ a vớ i kỹ thuậ t đ o phả n xạ n phầ n suy giả m CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Sildenafil citrat 1.1.1 Cơng thức cấu tạo: Hình 1.1.Cơng thức cấu tạo Sildenafil citrat [11] + Công thức phân tử: C28H38N6O11S [11] + Khối lượng phân tử: 666,70 g/mol [11] Tên khoa học: 5-[2-Ethoxy-5-(4-methylpiperazin1-ylsulfonyl)phenyl]-1,6dihydro-1-methyl-3-propylpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-one citrat [11] Tên khác: 1-{[3-(6,7-Dihydro-1-methyl-7-oxo-3-propyl-1H-pyrazolo[4,3d]pyrimidin-5-yl)-4-ethoxyphenyl]sulfonyl}- 4-methylpiperazone citrat [11] 1.1.2 Tính chất lý hố Sildenafil citrat có màu trắng đến trắng ngà, tan DMF, acid acetic tan methanol Độ tan Sildenafil citrat phụ thuộc vào pH giảm tăng pH Sildenafil citrat tan tốt pH khoảng từ 3,7 – 3,8 [11] Sildenafil base yếu, pKa từ 8,2 – 9,6 [11] 1.1.3 Dược động học: Hấp thu: Thuốc uống hấp thu nhanh Bữa ăn có nhiều m làm chậm hấp thu Phân bố: Sildenafil phân bố mơ Vd tồn phần tr sơ sinh 22,4 lít, Vd trạng thái ổn định người lớn 105 lít [1] Tr sơ sinh: Sildenafil: 93,9 ± 2,5 ; chất chuyển hóa N-desmethyl: 92 ± % Người lớn: Sildenafil chất chuyển hóa N-desmethyl: Khoảng 96 % [1] Chuyển hóa: gan, thuốc chuyển hóa thơng qua isoenzym cytochrom P450 CYP3A4 (đường chủ yếu CYP2C9 (đường thứ yếu Chất chuyển hóa chủ yếu (desmethylsildenafil tạo thành qua q trình N-desmethyl hóa có hoạt tính 50 sildenafil [1] Hình PL - Phổ hỗn hợp bột Sildenafil với placebo tỉ lệ khác sau Normalize số sóng 939,7 cm-1 PL - Hình PL - Phổ hỗn hợp bột Sildenafil với placebo tỉ lệ khác sau Normalize số sóng 1357,7 cm-1 PL - Hình PL - 10 Phổ hỗn hợp bột Sildenafil với placebo tỉ lệ khác sau Normalize số sóng 1697,6 cm-1 PL - 10 PL - Phổ cận hồng ngoại mẫu chuẩn, placebo mẫu thử Hình PL - Phổ cận hồng ngoại Sildenafil chuẩn PL - 11 Hình PL - 2 Phổ cận hồng ngoại placebo PL - 12 Hình PL - Phổ cận hồng ngoại Sildenafil hàm lượng 25% viên nén mơ hình PL - 13 PL - Sắc ký đồ Hình PL - Sắc ký đồ dung dịch chuẩn PL - 14 Hình PL - Sắc ký đồ dung dịch thử PL - 15 PL – Các bƣớc sử dụng phần mềm TQ Analyst để xây dựng phƣơng pháp Các phần mềm MATLAB, Uscrambler giải thuật tốn hồi quy tuyến tính dự đốn nồng độ chất c ng hỗn hợp Ngồi sử dụng MINITAB, SPSS STATGRAPHICS để xây dựng phương trình hồi quy tuyến tính Nhược điểm phần mềm người sử dụng phải có kiến thức lập trình Hiện nay, để thuận tiện cho người sử dụng, nhiều hãng thiết bị xây dựng phần mềm Phần mềm TQ Analyst phát triển hãng Thermo Fischer Scientific phần mềm phân tích liệu gồm nhiều tính riêng phục vụ cho phân tích quang phổ, cho phép liệu phổ thao tác thể trực quan hơn, dễ dàng để phát triển phương pháp vận hành kỹ thuật viên công ty Dược mà khơng cần phải có kiến thức sâu lập trình Một số chức phần mềm phục vụ cho việc thực khóa luận mơ tả sau: a)Thẻ Description Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Description Trong th này, có chức để: Đặt tên phương pháp đề mục “Method Title” Tại th Analysis type (loại phân tích , để định lượng chọn mục “Quantative analysis” PL - 16 Trong mục này, có phương pháp tốn hố sử dụng phân tích quang phổ: - Simple Beer’law: xây dựng phương pháp theo định luật Lambert Beer - Classical least squares: phương pháp bình phương tối thiểu thơng thường (CLS) - Stepwise multiple linear regression: SMLR hồi quy tuyến tính bước - Partial least squares (PLS): phương pháp bình phương tối thiểu phần - Principal component regression -PCR: phương pháp hồi quy cấu tử - Undecided: chưa xác định Chọn mà chưa xác định sử dụng phương pháp để phân tích - Combine multiple methods: kết hợp nhiều phương pháp b) Thẻ Pathlength Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Pathlength Th giúp lựa chọn kiểu xử lý liệu để xây dựng phương pháp định lượng Gồm có chức năng: - Undecided: “Undecided” tu chọn cho phép hoãn việc chọn loại quang trình Khi chọn tính này, khơng thể hiệu chỉnh phương pháp Nếu click vào Calibrate phần mềm hiển thị thông báo nhắc nhở chọn loại quang trình khác Do phải thay đổi tu chọn khác hộp thoại Pathlength trước PL - 17 Calibrate Lựa chọn “Undecided” để giúp lựa chọn kĩ thuật ph hợp để b trừ cho khác biệt quang trình mẫu phân tích - Constant: Là tu chọn cho quang trình sử dụng giá trị quang trình để tính tốn số lượng thành phần nồng độ tất mẫu đem phân tích Giả thiết phổ hiệu chuẩn phổ đem phân tích phương pháp đều có giá trị c ng quang trình - Known: Tu chọn “Known” biết yêu cầu giá trị quang trình cho chất chuẩn hiệu chuẩn mẫu không xác định đem phân tích Quang trình chất chuẩn hiệu chuẩn mẫu khơng xác định khác giá trị phải biết đo cách sử dụng v ng phổ đặc biệt quang trình - Predict: Tu chọn “Predict” sử dụng thơng tin quang trình phương pháp hiệu chuẩn để dự đốn tuyến tính quang trình mẫu phân tích phương pháp Các quang trình mẫu hiệu chuẩn mẫu chưa xác định khác quang trình mẫu hiệu chuẩn bắt buộc phải biết trước - Internal reference : A = k x b x c : sử dụng đỉnh để b trừ cho khác biệt quang trình Phương pháp cho phép phân tích mẫu có quang trình khác khó khơng thể có phép đo độc lập quang trình mẫu Tu chọn hoạt động phổ mẫu chứa đỉnh thay đổi tỷ lệ với quang trình - Peak ratio or Normalize (A/b = k x c : Peak ratio or Normalize cho phép định đỉnh tham chiếu sử dụng để b đắp cho khác biệt quang trình mẫu Peak ratio or Normalzie hoạt động phổ mẫu chứa đỉnh thay đổi tỷ lệ với quang trình - Multiplicative signal correction (MSC : Tu chọn MSC sử dụng hàm toán học để b đắp cho khác biệt quang trình Tu chọn cho phep phân tích mẫu với khác biệt quang trình khó khơng thể có phép đo độc lập quang trình mẫu Giả thiết mối liên hệ quang trình đóng góp phương pháp vào độ hấp thụ tín hiệu hồn tồn tuyến tính MSC thiết kế để hoạt động với phổ có đáp ứng tuyến tính với nồng độ, tức loại phổ biểu diễn độ hấp thụ, log (1/R Kubelka-Munk - Standard normal variate (SNV : Sử dụng loại quang trình SNV quang trình mẫu khó khơng thể đo xác khơng thể tìm thấy đỉnh v ng phổ mẫu mà thay đổi theo quang trình PL - 18 c)Thẻ Components Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Components Tại đặt tên cho thành phần cần phân tích đơn vị mẫu bảng Components Table d)Thẻ Standards Hình PL - 4 Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Standards PL - 19 Trong th này, chọn Open Standard để mở file kết đo phổ Sau mở hết file, nhập nồng độ thực tế file cột C1 e)Thẻ Spectra Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Spectra mục data fomat: có lựa chọn - Spectrum: sử dụng liệu quang phổ gốc - First derivative: sử dụng liệu dạng đạo hàm bậc - Second derivative : sử dụng liệu dạng đạo hàm bậc g)Thẻ Regions Hình PL - Ảnh chụp hình phần mềm TQ Analyst - Thẻ Regions PL - 20 Tại th này, phần mềm gợi ý v ng phổ đo Tuy nhiên chọn th “ Edit Regions” để tự chọn v ng phổ cần đo PL - 21 : BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN MẠNH ĐỨC XÂY DỰNG QUI TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG NHANH SILDENAFIL CITRAT TRONG VIÊN NÉN TỰ TẠO BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỞ HỜNG NGOẠI KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2022 ... sidenafil citrat nguyên liệu Sildenafil citrat .13 2.3.2 Xây dựng qui trình định lượng Sildenafil citrat viên nén tự tạo quang phổ cận hồng ngoại 14 2.3.3 Xây dựng qui trình định lượng Sildenafil. .. cứu qui trình định lượng nhanh Sildenafil citrat công thức biết sẵn phương pháp đo quang phổ hồng ngoại quang phổ cận hồng ngoại 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Xác định hàm lượng sidenafil citrat. .. Sildenafil citrat chuẩn 0,028 mg/ml dung môi pha động - Dung dịch thử: dung dịch có nồng độ Sildenafil citrat 0,028 mg/ml dung mơi pha động 13 2.3.2 Xây dựng qui trình định lượng Sildenafil citrat