Thông tin tài liệu
L I Cƒ MàN V i t' t c§ t' m lịng kính tr ng biˆ t ân sâu“c, s tụi xin gổi lặi cĐm õn chõn thnhnh ' t t i PGS.TS Nguy n Thu H ng – Tróê ng b mụnDó h cDó cHN c liá u,Tróặng% ¥i i ờãt–ntình˝ch b§ovàhã ng dflntơitrongt su qtrìnhnghiên u c vlm khúalu n tƠi b mụnDó c liá u Nh ng kiˆ n th cờã c truy¯ nờ ¥t t cụlhnh trangvụcựngbớchvquýbỏuchotụitrongquỏtrỡnh c tpvhcụngtỏcsauny Tụixingổi lặi cĐmõnsõusc nh' t t i ThS Nguy nVnPhóõng GiĐngviờn b mụnDó c liá u, Tróặng% Ơi h cDó cHN tụit nh ngngàyờ làngãỈiln“n g bó,ờ i,ngã Ỉi th…ykhơngch˝ dìud “t,giúp …utiênž bngž ˆ n v iconờãỈngnghiênc u khoa h c mcũn nghnh,khớcháltụitrongquỏtrỡnh c hiá th nkhúalu n BờncƠnhú,tụixincĐmõn GS.TS Phan K L c óhó ng dflnvtƠoi u kiá n t t nh' tchotơitrong ¸ cgiám viờ ˇnhtênkhoach vàlãutiêu §nbmflucây Tơixinc§mâns ı h tr nhi¸ ttìnhth…y t š b mơnDã c li¸ u,cácanhchˇ, cácemsinhviênờangnghiênuc khoa h ctrênbmơn Tơi cng xin trõn tr ng cĐm õn Ban giỏm hiá u Nhà trã Ỉng, phịng ban tồnth ˙ cỏc th ycụ Tró ặng% Ơi h cDó cHN ióluụnƠo t ời ¯ u ki¸ n thu–n l i cho tụitrongquỏtrỡnh c tpv h nghiờnc u tƠitró ặng Cu icựngtụixingổi lặi cĐmõnthõnthóõngnh ' t t i b m ,giaỡnh,b Ơnbố nh ng ngóặi luụn ng viờn, khớchálv l ch dı a tinh th…n v ng ch“c nh' t cho tơi cu c s ngvàtrongsu tqtrình ı c th hi¸ nkhóalu –n HàN i,ngàythángnm201 Sinh viên V˚Th Ĩ Huy¯ n Trang B Y T´ TRl NG% V TH ⁄ I HƠCDl CHÀN I Ì HUY˜ N TRANG 1601820 NGHIÊNC U I% ˜ U CH´ CAO% ” C GIÀUAPIGENINVÀLUTEOLINT CÚCHOAVÀNG ( L.) S DŁNG H˚ DUNGMƠIEUTECTIC KHĨALU N T T NGHI˚ PDl CSÀ ThS Nguy nVnPhãâng PGS.TS Nguy n Thu H ng B mônDã HÀN I - 2021 c li¸ u MŁC LŁC DANH MŁCCÁCKÝHI ˚ U,CÁCCH VI´ T T† T DANH MŁCCÁCB ƒ NG DANH MŁCCÁCHÌNHVÀ% % T VÔ N% THè CHlàNGI.T NG QUAN 1.1 T ng quan v¯ câycúchoavàng 1.1.1 Tên khoa học vị trí phân loại 1.1.2 Phân bố 1.1.3 Đặc điểm thực vật 1.2 T ng quan v¯ dã c li¸ ucúchoavàng 1.2.1 Thành phần hóa học 1.2.2 Tác dụng sinh học 1.2.3 Công dụng 1.3 T ng quan v¯ h¸ dungmơieutectic 10 1.3.1 Khái niệm 10 1.3.2 Thành phần 10 1.3.3 Phân loại 11 1.3.4 Phương pháp điều chế 12 1.3.5 Tính chất 14 1.3.6 Ứng dụng hệ dung môi eutectic chiết xuất dược liệu 15 1.3.7 Các phương pháp loại dung môi eutectic khỏi dịch chiết 16 CHlàNG2:% 2.1Nguyênli ITl NGVÀPHlàNGPHÁPNGHIÊNC U 18 ¸ u, thiˆ t bÓ 18 2.1.1 Nguyên liệu 18 2.1.2 Hóa chất, thiết bị, phần mềm 18 2.2 N idungnghiênuc 19 2.3Phãângphápnghiênc u 19 2.3.1 Quy trình dự kiến điều chế cao đặc giàu apigenin luteolin từ cúc hoa vàng 19 2.3.2 Phương pháp định lượng apigenin luteolin dịch chiết cúc hoa vàng 19 2.3.3 Phương pháp điều chế hệ dung môi eutectic 20 2.3.4 Phương pháp khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết xuất 21 2.3.5 Phương pháp điều chế cao đặc từ dịch chiết DES 23 CHlàNG3:TH C NGHI˚ M, K´ T QUƒ VÀBÀ N LU N 24 3.1 K t quĐ khĐosỏtvla ch n há dungmụichi t xu' t 24 3.2 K t quĐ khĐosỏtcỏcy u t Đnhhó ê ng nquátrìnhchi ˆ t xu' t 26 3.2.1 Khảo sát nhiệt độ chiết xuất 26 3.2.2 Khảo sát thời gian chiết xuất 27 3.2.3 Khảo sát hàm lượng nước 28 3.2.4 Khảo sát tỉ lệ dược liệu/dung môi 28 3.3 Kˆ t quĐ khĐosỏtvla ch ncỏci u kiá n t iãuchoquátrình ˆ tchi xu' t 30 3.3.1 Thiết kế thí nghiệm 30 3.3.2 Xây dựng mơ hình 32 3.3.3 Đánh giá mô hình 34 3.3.4 Lựa chọn điều kiện tối ưu biến đầu vào 36 3.3.5 Thẩm định mơ hình 37 3.4 Kˆ t qu§ i Ự ¯ u chˆ caoỰ »cgiàuapigeninvàluteolin dÓch chiˆ ttcúchoa vàng 37 3.5Bànlu –n 39 3.5.1 Về sử dụng dung môi eutectic (DES) chiết xuất 39 3.5.2 Về kết khảo sát yếu tố ảnh hưởng lựa chọn điều kiện tối ưu cho trình điều chế cao đặc giàu apigenin luteolin từ cúc hoa vàng 41 K´ T LU NVÀKI TÀILI ´ N NGHÌ 42 ˚ U THAM KHƒ O PHŁ LŁC DANH MŁCCÁCKÝHI ˚ U,CÁCCH VI´ T T† T ABTS 2,2'-azino-bis(3- ethylbenzothiazolin-6-sulphonic acid) ALP Alkalin phosphatase Analysis ( of variance) ANOVA Phãângphápphântíchphãângsai AOAC Hi¸phicácnhàhóaphântíchchínhthc (Assosiation of Official Analytical Chemists) CAT Catalase CCD Thiˆtkˆphchptrungtâm Central ( Composite Design) DES Dungmôieutectic Deep ( eutectic solvent) DPPH 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl EtOH Ethanol Gal Galactose Glc Glucose Glu Acid gluconic GOT Aspartat aminotransferase GPT Alanin aminotransferase GSH-Px Enzym glutathion peroxidase HBA Ch'tnh–nliênkˆthydro Hydrogen ( Bond Accepter) HBD Ch'tcholiênkˆthydro Hydrogen ( Bond Donor) HPLC H¸thngs“ckýlnghi¸unngcao (High Performance Liquid Chromatography) IC50 Nngờcchˆ 50% IL-1 Interleukin LDH Lactat dehydrogenase MBC Nngờdi¸tkhu›ntithi˙uMinimum ( Bactericidal Concentration) MeOH Methanol MIC Nngờcchˆtithi˙u( MLR Hiquytuyˆntínhờabiˆn(Multivariable Linear Regression) NF-8B Tbodiáttnhiờn Minimal Inhibitory Concentration) OFAT PhóõngphỏpkhĐosỏtthayimtyut( One factor at a time) Rha Rhamnose RSD %l¸chchu›ntãângời( RSM Phãângphápb¯m»tờápng( SD %l¸chchu›n( Standard Deviation) STT Sthtı TB Trungbình TBABr Tetrabutylamino bromid TNF Yˆut ho¥itỉkhiu TPA 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate XO Xanthin oxidase Relative Standard Deviation) Response surface methodology) DANH MŁCCÁCB ƒ NG STT Kýhi¸ u Tênb§ng Trang 1.1 1.2 3.1 3.2 K t quĐ khĐo sỏt kh Đ nng tƠo há dung môi eutectic 25 ng nh' t 3.3 Kˆ t qu§ mãhóabi ˆ nờ …uvào 30 3.4 Thi t k thớnghi mvk t quĐ th c nghiá m 31 3.5 KtquĐphõntớchANOVA 34 3.6 Mtsthơngsthngkêánh giách'tlãngmơhình 36 3.7 C' utrúc hóahc cº a m t s flavonoid chínhtrongcdã li¸ u cúchoavàng Phânlo ¥i DES dı atheothành …n ph Tóm t“t kˆ t qu§ th› m ˇnh phãâng pháp ˇnh lãng apigeninvàluteolin ˇchtrong chiˆ tcúc d hoavàng Kˆ t qu§ ki˙ m tra kh§ nngd ı ờốnc º amơhìnhš ời ¯ u ki¸ n t iãu 11 24 37 DANH MŁCCÁCHÌNHVÀ% THÌ STT Kýhi¸ u Tênhình Trang Khung c' u trúcº c a flavonoid dã c li¸ u cúc hoa 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 3.1 3.2 K t quĐ khĐosỏtnhi tờ chiˆ t xu' t 27 3.3 Kˆ t quĐ khĐo sỏtth ặi gian chi t xu' t 27 3.4 Kˆ t qu§ kh§osáthàmlãngnã c 28 10 3.5 K t quĐ khĐosỏtt dó c liá u/dungmụi 29 11 3.6 12 3.7 vàng Khung c' u trúcº c a h p ch' t terpenoid Ỉngthã g»p dã c li¸ u cúchoavàng C' u trúc mt s h p ch' t acid phenolic phenylpropanoid dã c li¸ u cúchoavàng C' u trúc hp ch' t polyacetylen dã c li¸ u cúc hoavàng C' utrỳcmt s HBAvHBDthó ặng gằp KhĐosỏtkh Đ nngchi t xu' t apigeninvàluteolin cº acác h¸ DES %thˇbi˙udinsıphØthuccºahàmlãngapigeninvà luteolin vàoời¯uki¸nchiˆtxu't Kˆ t quĐ nhlóngapigeninvluteolintrong flu caocỏcm v t kh ilãng %caothuờã c 6 11 26 33 38 % T VÔ N% Gỳtlbá nh r i lo¥n chuy˙ nhóapurin làmtnglãngacidurictrong ˙ ờã , câth c bi˙ u hi¸ n b ng nh ngcânsãngờaud d i kh p, ằc biá tlkhpbnngúnchõncỏiv thó ặng lƠi hu quĐ r' t nằng n cho bá nhnhõnnhóhókh p g i, biˆ n d¥ng kh p, suy th–n…n ˆ ukhơngờã c ch› nờoáns mvàời ¯ u trˇ ờúng T˝ l¸ m“c b¸ nhgútờangcóxu hã ng tng nhanh rõ ¸t r 50 nm qua, ằc biá t lƠi tcác qu c gia ờang phát tri ˙n [31] Xanthin oxidase(XO)làenzymchìakhóaxúctácchoqtrìnhsinh ng htp acid urictrongcâ ˙ th Sı ho¥tờ ngquá m c cº a enzymnàys ` làmtng n ngờ acid uric vàlàm t nh ngngunnhânchínhgâyra¸bnhgút [37, 69].Doờó,cácthu chˆ XOnhãallopurinol, buxostat fe hi¸ nờanglàm c c t nh ng li¸ u phápờ …utayờ ˙ ời ¯ u trˇ bá nh gỳttrờnlõmsng [37] Mằcdựcúhi u quĐ songcỏcthu cnycũnt n t¥i m t s tác d Øng khơng mong mu n nhã d ˇ ng da, s t, phát ban, r i lo¥n ch c nng th–n,viêmmàngnãovơkhu› nvàr i loƠn ch cnnggan [31].Vỡ vy, viá c nghiờncu thu c i u tr gỳt hi u quĐ v kh“c phØc ờã c nh ng h¥n chˆ v¯ tính an toàn ºa c allopurinol, febuxostat làc…n thiˆ t,ờ »c biá tlcỏcs Đn ph mcúngu n g c t dó c li¸ u CØm hoa cº acây cúchoavàng( Chrysanthemum indicum L.) làdã c li¸ u ờã c sỉ dØng r ngrãi trongcáctrã Ỉng h p hoa m“t,chóngm»t, nh cờ …u,ờaum “tờ , ch§y nhi¯ u nã c m“t, huyˆ t áp cao, ờinh c mØn nh t, sãng ờau[3] Các nghiên cu thı c nghi¸ m ờãch ngminhdãc liá unycũncúkh Đ nngh Ơ aciduricthụn g qua ó Æng c chˆ xanthin oxidase [37] Thành ph…n hóa h c c º a cúc hoa vàng flavonoid,trongº ờóyˆ ch ulàapigeninvàluteolin - hai h p ch' tờãờã c ch ng minh tácd Øng c chˆ xanthin oxidaserõ ¸ t qua r nhi¯ unghiên c u [28, 37, 42, 51] Vì v–y, ˙ hã ng t ipháttri ˙ n sĐn ph m phũngv i u tr bá nhgúttcúchoavàng,vi¸ c nghiên c u ời ¯ u chˆ caoờ »cgiàu apigenin luteolin t dã c li¸ unày làc…n thiˆ t Hi¸ n nay, nã c dung môi h u câ nhãn-hexan, ethyl acetat, cloroform, aceton,ethanolờang c sỉờãdØng r ngrãiờ˙ chiˆ t xu' tcách p ch' tcóho ¥ttínhsinh h c t dã c li¸ u Tuy nhiên , nã c cónhãcời ˙ mlàkh§ nngchiˆ t xu' tcách p ch' tớt phõnc ckộm,trongkhiúcỏcdung mụih ucõ lƠigõy ụnhimmụitró ặng, d cháy n §nhhã š ng t i s c kh econngã Ỉi [48].% eutectic (DES - Deep eutectic solvent)ờãờã ˙ kh“c phØcnhãcời ˙ mnày,dungmôi c lı a ch nnhãm t gi§i phápthayth ˆ dungmơitruy ¯ n th ng v i nh ngờ »ctính:antồn,thân ¸ nthi v imơitrã Æng, d phân hº y, d ời ¯ u chˆ , chi phíth ' p, hi¸ u su' t chiˆ t cao [10] Hi¸ n nay, m»cdùờãcóm ts nghiêncu ng dØng DES chiˆ t xu' tcách p ch' t t nhiờnsongfln vcũnr' t hƠn ch % ằc biá t, chãa có nghiênu c sỉ dØng h¸ dung môiDES ˙ ời ¯ u chˆ cao »c giàuapigeninvàluteolin cúchoa t vàng Vìv–y, ¯ tài khóalu –n t t nghi¸ p “Nghiênc u i Ự ¯ u chˆ caoỰ »cgiàuapigenin luteolin cúct hoa vàng( L.) sæ dÝng h¸ dung mơi eutectic’’ờã c thı c hi¸ n v i mØc tiêu: Xây d ı ng quy trình chi ˆ t xu' t dˇch chiˆ t giàu apigenin luteolin cúc hoat vàngsỉ dØng h¸ dungmơieutectic Xâyd ı ngquytrình¯ ời u chˆ caoờ »cgiàuapigeninvàluteolin dˇch chiˆ t tcúc hoavàngtrong ¸ dung h mơieutectic ... chˆ cao »c giàuapigeninv? ?luteolin cúchoa t vàng Vìv–y, ¯ tài khóalu –n t t nghi¸ p “Nghiênc u i Ự ¯ u chˆ cao? ?? »cgiàuapigenin luteolin cúct hoa vàng( L. ) sỉ dÝng h¸ dung mơi eutectic? ??’ờã c thı c... dˇch chiˆ t giàu apigenin luteolin cúc hoat vàngsỉ dØng h¸ dungmơieutectic Xâyd ı ngquytrình¯ ời u chˆ cao? ?? »cgiàuapigeninv? ?luteolin dˇch chiˆ t tcúc hoavàngtrong ¸ dung h mơieutectic CHlàNGI.T... l? ?ng apigenin (Y 1) hàm l? ? chiˆ t cúchoavàng ng luteolin (Y 2) dˇch Cao? ?? »cgiàuapigeninv? ?luteolin c ời ¯ uờãchˆ t dˇch chiˆ t cúchoavàngtrong DES b ngcácphãângpháp:sæ dØng ph§ndungmơi,chi ˆ t l ng
Ngày đăng: 19/08/2022, 00:34
Xem thêm:
