TRẦN THỊ MAI NGHIÊN cứu THÀNH PHẦN hóa học của lá TRÀ HOA VÀNG CAMELLIA CHRYSANTHA (HU) TUYAMA THU hái tại THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ hà nội 2020

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ MAI NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ TRÀ HOA VÀNG CAMELLIA CHRYSANTHA (HU) TUYAMA THU HÁI TẠI THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2020 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ MAI Mã sinh viên: 1501319 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ TRÀ HOA VÀNG CAMELLIA CHRYSANTHA (HU) TUYAMA THU HÁI TẠI THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Phạm Hà Thanh Tùng Nơi thực hiện: Bộ môn thực vật Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI – 2020 LỜI CẢM ƠN! Trong thời gian thực khóa luận môn Thực vật - Trường Đại học Dược Hà Nội, em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ thầy cô, anh chị, bạn em sinh viên Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, trước tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới TS Phạm Hà Thanh Tùng, ThS Phạm Thị Linh Giang người trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình giúp đỡ em hồn thành khóa luận Em xin cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Trần Văn Ơn, ThS Nghiêm Đức Trọng anh chị kĩ thuật viên môn Thực vật tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ em hồn thành khóa luận thời hạn Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội, người dạy dỗ bảo em tận tình suốt tháng năm học tập trường Cuối cùng, với lịng biết ơn vơ hạn, em xin phép gửi lời cảm ơn tới gia đình, người thân, bạn bè động viên hỗ trợ em suốt thời gian qua Do thời gian có hạn trình độ thân cịn hạn chế nên khóa luận khơng thể tránh khỏi thiếu sót Vì vậy, em mong nhận bảo tận tình thầy góp ý chân thành bạn bè Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng năm 2020 Sinh viên Trần Thị Mai MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1.Vị trí phân loại đặc điểm thực vật loài Camellia chrysantha (Hu) Tuyama 1.1.1 Vị trí phân loại phân bố 1.1.2 Đặc điểm thực vật loài Camellia chrysantha (Hu) Tuyama 1.2 Thành phần hóa học 1.2.1 Nhóm polyphenol 1.2.2 Nhóm saponin 1.2.3 Nhóm polysaccharid 1.2.4.Một số thành phần khác 1.3 Tác dụng sinh học 1.3.1 Tác dụng chống oxy hóa 1.3.2 Tác dụng chống ung thư 11 1.3.3 Tác dụng hạ đường huyết 12 1.3.4 Tác dụng hạ mỡ máu 12 1.3.4 Tác dụng kháng khuẩn 13 1.3.4 Tác dụng theo y học cổ truyền 13 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Nguyên liệu thiết bị 14 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 14 2.1.2 Nguyên vật liệu nghiên cứu 14 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Định tính nhóm chất hữu có Trà hoa vàng 15 2.2.2 Phương pháp chiết xuất phân lập Trà hoa vàng 19 2.2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất 21 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 3.1 Kết định tính nhóm chất phương pháp hóa học 22 3.2 Kết chiết xuất, phân lập hợp chất saponin triterpenoid Trà hoa vàng 25 3.2.1 Chiết phân đoạn từ Trà hoa vàng 25 3.2.2 Quá trình phân lập hợp chất từ Trà hoa vàng 27 3.2.3 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ Trà hoa vàng 28 3.3 Bàn luận 38 KẾT LUẬN 42 ĐỀ XUẤT 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU 13 C-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 (Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonace spectroscopy) H-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (Proton Nuclear Magnetic Resonace spectroscopy) br s Broad singlet C Camellia CC Sắc ký cột (Column chromatography) d Doublet dd Double boublet EA Ethyl Acetat ESI-MS Phương pháp khối ion hóa phun mù điện tử (Electrospray ionization - Mass Spectrometry) EtOH Ethanol HDL-C Lipoprotein cholesterol tỷ trọng cao IC50 Nồng độ ức chế 50% đối tượng thử nghiệm (Inhibitory Concertration at 50%) J (Hz) Hằng số tương tác tính Hz LDL-C Lipoprotein cholesterol tỷ trọng thấp MeOH Methanol m/z Khối lượng/điện tích m Multiplet NP Sắc ký pha thuận (Normal phase chromatography) Overlap chồng phổ q Quartet RP Sắc ký pha đảo (Reverse phase chromatography) s Singulet SKLM Sắc ký lớp mỏng TC Cholesterol toàn phần TG Triglycerid TLC Sắc ký lớp mỏng (Thin layer chromatography) v/v Thể tích/thể tích DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Kết định tính nhóm chất hữu Trà hoa vàng phương pháp hóa học 22 Bảng 3.2 Bảng so sánh liệu phổ 1H, 13C-NMR CC chất đối chiếu 28 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Một số hợp chất polyphenol có lồi C chrysantha Hình 3.1 Sơ đồ chiết xuất phân đoạn từ Trà hoa vàng 26 Hình 3.2 Sơ đồ phân lập hợp chất CC từ phân đoạn EtOH 96% 28 Hình 3.3 Phổ 13C-NMR hợp chất CC 34 Hình 3.4 Phổ 1H-NMR hợp chất CC 35 Hình 3.5 Phổ MS hợp chất CC 36 Hình 3.6 Cấu trúc hóa học liên kết HMBC (H⟶C) hợp chất CC 38 ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam quốc gia nằm vùng khí hậu gió mùa, có hệ thực vật phong phú đa dạng với nguồn tài nguyên thuốc dồi chủng loại lẫn công dụng làm thuốc đặc biệt y học cổ truyền lâu đời Cho nên việc sử dụng thuốc chữa bệnh nước ta hồn tồn phù hợp có điều kiện phát triển Trà hoa vàng (Camellia spp.) hay cịn gọi Kim hoa trà- lồi trà có hoa màu vàng thuộc chi Camellia L xem nguồn gen tự nhiên vô quý Trên giới, đặc biệt Trung Quốc có nhiều nghiên cứu chuyên sâu Trà hoa vàng, bào chế thành cơng nhiều sản phẩm dùng để phịng chữa bệnh có nguồn gốc từ Trà hoa vàng, mang lại giá trị kinh tế cao Trong hoa Trà hoa vàng có nhiều thành phần saponin, flavonoid, polyphenol, acid amin, nguyên tố vi lượng… mang lại lợi ích to lớn sức khỏe Các nghiên cứu Trà hoa vàng có tác dụng hạ huyết áp, giảm đường huyết, hạ cholesterol, hạ mỡ máu, chống u bướu, tăng cường hệ miễn dịch kéo dài tuổi thọ Trong hợp chất polyphenol saponin quan tâm nhiều nhất, tập trung chủ yếu nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa ức chế phát triển tế bào ung thư [11], [23], [24], [33] Ở Việt Nam, Trà hoa vàng lần người Pháp phát miền Bắc vào năm 1910 [6] Tuy nhiên năm gần đây, Trà hoa vàng quan tâm nghiên cứu khai thác sử dụng Mặc dù vậy, nghiên cứu nước tập trung vào phát triển mơ tả hình thái lồi mới, thành phần hóa học làm nên giá trị lồi Trà hoa vàng chưa tìm hiểu sâu sắc tồn diện Chính vậy, đề tài “ Nghiên cứu thành phần hóa học trà hoa vàng Camellia chrysantha (Hu) Tuyama” thực với mục tiêu: ... ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ MAI Mã sinh viên: 1501319 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ TRÀ HOA VÀNG CAMELLIA CHRYSANTHA (HU) TUYAMA THU HÁI TẠI THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người... tài “ Nghiên cứu thành phần hóa học trà hoa vàng Camellia chrysantha (Hu) Tuyama? ?? thực với mục tiêu: 1 Định tính thành phần hóa học Trà hoa vàng Chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hóa học chất... đây, Trà hoa vàng quan tâm nghiên cứu khai thác sử dụng Mặc dù vậy, nghiên cứu nước tập trung vào phát triển mơ tả hình thái lồi mới, thành phần hóa học làm nên giá trị lồi Trà hoa vàng chưa tìm