Một số nghiên cứu về xác định biotype của bọ phấn trắng thuốc lá Bemisia tabaci truyền bệnh vi-rút khảm lá sắn tại Việt Nam nhằm làm sáng tỏ rằng biotype của B. tabaci là nguyên nhân lây truyền SLCMV ở Việt Nam là cơ sở để xây dựng các chiến lược quản lý bền vững SLCMV. Sử dụng một phần gen cytochrome oxidase 1 (COI) của ty thể với cặp mồi 2195Bt (5''-TGRTTTTTTGGTCATCCRGAAGT-3'') và CO12/Bt-sh2 (5''-TTTACTGCACTTTCTGCC-3''), phát hiện ra biotype Asia II 1 của B. tabaci có thể truyền SLCMV. Mời các bạn cùng tham khảo!
Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 1/2021 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ XÁC ĐỊNH BIOTYPE CỦA BỌ PHẤN TRẮNG THUỐC LÁ Bemisia tabaci TRUYỀN BỆNH VI-RÚT KHẢM LÁ SẮN TẠI VIỆT NAM Some Studies on Tabacco Whitefly Species (Bemisia tabaci) Transmitting Cassava Mosaic Virus Disease in Viet Nam Trịnh Xuân Hoạt1#*, Dương Thị Nguyên2#, Lê Quang Mẫn1 Ngày nhận bài: 23.11.2020 Ngày chấp nhận: 27.1.2021 Abstract In recent years, the cassava mosaic disease, caused by Sri Lankan cassava mosaic virus (SLCMV), is considered as the most serious threat to cassava cultivation in Vietnam It has been identified that SLCMV is transmitted by cuttings and the tabacco whitefly (Bemisia tabaci) Whiteflies are some of the world’s most devastating agricultural pests and plant-virus disease vectors Elucidation of which biotype of B tabaci is responsibility for transmission of SLCMV in Vietnam is the basis for development of sustainable management strategies of SLCMV Using the partial mitochondrial cytochrome oxidase (COI) gene with primer pair 2195Bt (5’-TGRTTTTTTGGTCATCCRGAAGT-3’) and CO12/Bt-sh2 (5’-TTTACTGCACTTTCTGCC-3’), we report here the discovery of biotype Asia II of B tabaci was able to transmit SLCMV It also was indicated that using yellow sticky traps in the cassava fields in uninfected areas is an useful method for early detection and prediction the pread of SLCMV by the Asia II of B tabaci from the infected areas to un-infected areas Keywords: Bemisia tabaci Asia II 1, Sri Lankan cassava mosaic virus, Manihot esculenta Crantz ĐẶT VẤN ĐỀ * Sắn (Manihot esculenta Crantz), thường trồng để lấy tinh bột, nguồn thực phẩm cho gần tỷ dân số 105 quốc gia Cây sắn đứng thứ sau lúa ngô nguồn cung cấp hàm lượng carbohydrate cao, nguồn nguyên liệu thô phục vụ ngành công nghiệp chế biến (http://www.fao.org/ newsroom/en/news/2008/1000899/index.html) Nhờ khả chống chịu tốt với điều kiện ngoại cảnh bất lợi hạn hán đất bạc màu, sắn trồng rộng rãi vùng nhiệt đới Châu Phi, Châu Á Châu Mỹ Latinh, trở thành trồng quan trọng giới (El-Sharkawy, 2004; Jarvis et al., 2012) Quan trọng hơn, tác động biến đổi khí hậu, sắn ngày trở nên quan trọng loại lương thực (Jarvis et al., 2012) Tuy nhiên, Viện Bảo vệ thực vật Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Thái Nguyên # equal contributors *Corresponding author: trinhxuanhoatppri@gmail.com thập kỷ gần đây, bệnh vi rút khảm sắn (CMDs) lên mối đe dọa nghiêm trọng sản xuất sắn Bệnh ghi nhận Tanzania sau bệnh xuất Ấn Độ, Sri Lanka, đảo thuốc Ấn Độ Dương hầu Châu Phi (Harrison et al., 1987), Đơng Nam Á có Việt Nam (Uke et al., 2018; Wang et al., 2016, 2019) Trước tốc độ phát triển lan rộng bệnh ngày gia tăng, việc xác định xác tác nhân truyền bệnh việc làm cấp thiết nhằm hạn chế lan truyền bệnh từ vùng sang vùng khác Trong thiệt hại sản lượng đáng kể ghi nhận bùng phát CMD, lây lan tiếp tục chứng minh xuất CMD gần Campuchia, Việt Nam Trung Quốc (NavasCastillo et al., 2011; Rey and Vanderschuren, 2017; Uke et al., 2018; Wang et al., 2016, 2019) Trước mối đe dọa CMDs gây ra, cần nỗ lực nghiên cứu để xác định loài véc tơ giúp trì sản xuất sắn vùng bị ảnh hưởng thường vùng phát triển Bọ phấn trắng Bemisia tabaci loài đa thực, chúng gây hại 700 ký chủ thực vật 35 Kết nghiên cứu Khoa học có sắn (Legg et al., 2002; Dinsdale et al., 2010) Ngồi ra, chúng cịn mơi giới truyền 200 loại vi rút gây bệnh thực vật, gây thiệt hại kinh tế nghiêm trọng cho nhiều loại trồng toàn giới (Legg et al., 2002; Seal et al., 2006) Cho đến nay, Bemisia tabaci có tới 39 biotype khác nhau, biotype giống hình thái, lại khác di truyền phân tử khả sinh sản, khả truyền loại virus cho trồng hay mức độ gây hại (Qin et al., 2016) (Xu et al., 2011), (Xu et al., 2011), (Horowitz and Ishaaya, 2014), (Maruthi et al., 2002) Chỉ tính riêng biotype ‘Middle East-Asia Minor 1′ (MEAM1), thiệt hại kinh tế hàng năm ước tính khoảng 714 triệu USD (Mascarin et al., 2013) Trên sắn, Bemisia tabaci ghi nhận có biotye khác SSA1 SSA2, biotype lànhững véc tơ truyền bệnh vi rút nguy hiểm (bệnh vi rút khảm sắn (CMBs) bệnhvi rút sọc nâu (CBSI)) (Mugerwa et al., 2012) Sự đa dạng di truyền hay biotype B tabaci xác định vùng 16S rDNA, cytochrome oxidase ty thể (mtCO1) trình tự vùng ITS1 tác giả De Barro (2005) Dinsdale et al (2010) Trong đó, đoạn gen mtCO1 sử dụng để thiết lập phân bố địa lý (Legg et al., 2002; Dinsdale et al., 2010) Khuếch đại vùng mtCO1 mục tiêu thường sử dụng mồi (MT10/C1-J-2195 MT12/TL2-N3014) (Sinmon et al., 1994) PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thu thập bọ phấn trắng (B tabaci) gây hại ruộng sắn Trưởng thành B tabaci thu thập sắn tỉnh Tây Ninh, Đồng Nai, Quảng Ngãi Hịa Bình ống hút côn trùng giữ o ống eppendorf 1,5 ml chứa cồn 90 Mẫu trì điều kiện nhiệt độ thường trình thu mẫu giữ điều kiện -20oC phòng thí nghiệm chiết suất DNA 2.2 Xác định biotype B tabaci Kỹ thuật chiết suất DNA B tabaci thực theo phương pháp Mugerwa et al (2018) Cho cá thể trưởng thành B tabaci vào ống eppendorf 1,5 ml Nhúng ống vào dung 36 BVTV – Số 1/2021 o dịch ni tơ lỏng cho vào tủ âm -80 C trước tiến hành nghiền mẫu dụng que nghiền chuyên dụng Cho µL dung dịch 50 mM NaOH nghiền kỹ, rửa que nghiền µL 50 mM NaOH Đậy chặt nắp ủ mẫu điều kiện nhiệt o độ 95 C phút để bất hoạt DNases Cho thêm µL dung dịch M Tris-HCl, pH Sử dụng µL cho phản ứng PCR Sử dụng cặp primer 2195Bt (5’TGRTTTTTTGGTCATCCRGAAGT-3’) CO12/Bt-sh2 (5’-TTTACTGCACTTTCTGCC-3’) (Mugerwa et al., 2018) Phản ứng PCR tiến o hành điều kiện 94 C phút; 35 chu kỳ o o với điều kiện nhiệt độ 94 C 20 giây, 52 C o o 30 giây 72 C phút; 72 C 10 o phút giữ mẫu điều kiện C Phản ứng PCR thực máy Mastercycler Pro (Eppendorf, Germany) Phản ứng PCR thực 25 μl phản ứng chứa 0,4 μM primer, 0,2 μM dNTP, 1,25 U i-Taq DNA polymerase (iNtRON Biotechnology, Korea) 1X Taq polymerase buffer μL từ phản ứng điện di 1% (w/v) agarose gel dung dịch 1X TAE nhuộm Redsafe Nucleic Acid Staining Solution (iNtRON Biotechnology, Korea) kiểm tra hình ảnh hệ thống GelDoc-It® 310 Imaging System (United Kingdom) Sản phẩm PCR có kích thước khoảng 867 bp tinh DNA Purification Kit (QIAGEN, Singapore) giải trình tự trực tiếp chiều primer 2195Bt CO12/Btsh2 hệ thống ABI3100 DNA Công ty Bioneer, Korea Kết giải mã trình tự gen so sánh với Ngân hàng Gen (GenBank) phần mềm trực tuyến BLAST (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) Cây phả hệ xây dựng phương pháp NeighborJoining phần mềm MEGA7.0 (Kumar et al., 2016) sử dụng gen loại chủng vi rút gây bệnh khảm vi rút Sri Lanka, Ấn Độ, số loại bệnh vi rút khảm trồng khác 2.3 Xác định có mặt chủng SLCMV thể trưởng thành B tabaci Tiến hành treo bẫy dính màu vàng ruộng sắn bị nhiễm bệnh Tây Ninh để thu hút trưởng thành bay đến dính vào bẫy Ngay sau có Kết nghiên cứu Khoa học trưởng thành B tabaci dính bẫy, bẫy dính màu vàng bọc lớp polyethylene trì bẫy dính màu vàng đồng ruộng vịng ngày tiến hành thu mẫu trưởng thành hàng ngày Tiến hành lấy mẫu cá B tabaci cho vào ống eppendorf chứa sẵn cồn 90o để bảo quản mẫu, phục vụ bước nghiên cứu Tại phịng thí nghiệm, nhúng ống chứa B tabaci vào dung dịch ni tơ lỏng cho vào tủ âm -80oC trước tiến hành nghiền mẫu que nghiền chuyên dụng Cho µL dung dịch 50 mM NaOH nghiền kỹ, rửa que nghiền µL 50 mM NaOH Đậy chặt nắp ủ mẫu o điều kiện nhiệt độ 95 C phút để bất hoạt DNase Cho thêm µL dung dịch M Tris-HCl, pH Sử dụng µL cho phản ứng PCR Phản ứng PCR tiến hành với cặp primer SLCMVA-F1/SLCMV-A-R2 Điều kiện phản ứng PCR bao gồm 94oC phút; 30 chu kỳ với điều kiện nhiệt độ 94oC 30 giây, 55oC 30 giây 72oC 30 giây Sản phẩm PCR giải mã trực tiếp hai chiều sử dụng primer SLCMV-AF1/SLCMV-A-R2 (Uke et al., 2018) BVTV – Số 1/2021 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tập tính, gây hại B tabaci sắn Trưởng thành thường bay với khoảng cách ngắn 1-3m tán cây, bay theo phương nằm ngang, đơi có kiểu bay theo vòng xoắn Khi trưởng thành gặp ánh sáng trực xạ chúng liền lẩn tránh bay sang khác, nơi có ánh sáng tán xạ Trong q trình chích hút dịch cây, B tabaci truyền vi rút cho thơng qua tuyến nước bọt Có thể phân biệt sắn bị nhiễm bệnh B tabaci truyền bệnh trình sinh trưởng nhiễm bệnh từ hom giống thơng qua triệu chứng (Hình 1B) Nếu hom giống không nhiễm bệnh, bị nhiễm bệnh B tabaci truyền vi rút trình sinh trưởng phát triển phía biểu triệu chứng, già bánh tẻ phía khơng biểu triệu chứng (Hình 1C) Nếu hom giống bị nhiễm bệnh tất bị khảm, biến dạng, quăn queo Trong đó, sắn khỏe khơng biểu triệu chứng (Hình 1A) Hình Đặc điểm phân biệt triệu chứng bệnh vi rút khảm sắn Ghi chú: (A) Cây khỏe (B) Cây biểu triệu chứng trồng từ hom giống bị nhiễm bệnh (C) Cây biểu triệu chứng bệnh bọ phấn truyền (D-F) Đặc điểm phân bố hình ảnh trưởng thành B tabaci 37 Kết nghiên cứu Khoa học 3.2 Xác định biotype B tabaci truyền SLCMV Việt Nam Để xác định biotype B tabaci truyền SLCMV sắn Việt Nam, cặp primer 2195Bt CO12/Bt-sh2 sử dụng để BVTV – Số 1/2021 khuếch đại sản phẩm với kích thước khoảng 867 bp thuộc mẫu DNA chiết suất từ cá thể trưởng thành B tabaci thu Tây Ninh, Đồng Nai, Quảng Ngãi Hịa Bình (Hình 2) Hình Kết PCR nhân gen COI trưởng thành B tabaci có kích thước khoảng 867bp với mẫu B tabaci thu thập từ Tây Ninh (giếng (B tabaci TN1)), Đồng Nai (giếng (B tabaci DN), Quảng Ngãi (giếng (B tabaci QNg) Hịa Bình (giếng 4-6 (B tabaci VT1-HB, B tabaci VT2-HB B tabaci HS-HB, tương ứng) Mẫu đối chứng âm (giếng 7) Qua giải mã so sánh trình tự đoạn gen mtCOI phần mềm Clustal Omega (https://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/) cho thấy mẫu trưởng thành B tabaci thu từ tỉnh khác nghiên cứu có độ đồng 100% Nghĩa tất mẫu thu từ tỉnh khác sắn thuộc biotype Bảng Danh sách đoạn gen mtCOI B tabaci sử dụng xây dựng phả hệ Mã số EU192047 HM137326 HM590139 AJ510057 AJ867557 AY686088 AF418666 AJ748390 HM137338 HQ916813 DQ174523 GQ139492 HM137339 HM137313 HM137345 AY686083 DQ309075 EU192045 HM590146 AJ748357 38 Cây ký chủ Cà chua (Solanum lycopersicum) Sắn (Manihot esculenta) Cà tím (Solanum melongena) Đậu xanh (Vigna radiata) Khoai lang (Ipomoea batatas)s Cây Nam Mỹ (Gossypium hirsutum) Sắn (Manihot esculenta) Đậu đũa (Vigna unguiculata) Rau muống (Ipomoea aquatica) Khoai lang (Ipomoea batatas) Cây Cơ tịng (Codiaeum variegatum) Rau muống (Ipomoea aquatica) Rau muống (Ipomoea aquatica) Rau muống (Ipomoea aquatica) Bí rợ (Cucurbita moschata) Bơng (Gossypium herbaceum) Bơng (Gossypium herbaceum) Bông (Gossypium herbaceum) Acanthospermum hispidum Quốc gia Trung Quốc Trung Quốc Ấn Độ Pakistan Trung Quốc Trung Quốc Ấn Độ Bangladesh Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Ấn Độ Biotype Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II 10 Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II Asia II 11 Asia II Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 1/2021 Mã số GQ281733 HQ268813 KJ787661 AY903536 HQ622855 AJ550177 AB297897 AM691064 AB440786 AB440792 DQ174527 AJ510066 KF790677 AJ748382 EU192050 Cây ký chủ Cà tím (Solanum melongena) Đậu cô ve (Phaseolus vulgaris) Đậu cô ve (Phaseolus vulgaris) Thài lài lơng (C benghalensis) Cà tím (Solanum melongena) Khoai tây (Solanum tuberosum) Cà chua (Solanum lycopersicum) Sài đất hai hoa (Wedelia biflora) Sài đất hai hoa (Wedelia biflora) Sương sáo (Mesona chinensis) Thục quỳ (Althaea rosea) Bí (Trichosanthes dioica) Đậu tương (Glycine max) Quốc gia Ấn Độ Ấn Độ Ấn Độ Nam Phi Reunion Syria Pháp Nhật Bản Nhật Bản Đài Loan Pakistan Ấn Độ Bangladesh Trung Quốc GU086325 - Indonesia AY686072 HQ916820 AY686089 GQ139495 AY057128 JF754907 JF901837 JF901844 AB308111 DQ130054 AF344247 AY827604 EU760745 GU220055 Cà chua (Solanum lycopersicum) Bông ổi (Lantana camara) Phù dung (Hibiscus mutabilis) Cà chua (Solanum lycopersicum) Cà chua (Solanum lycopersicum) Sắn (Manihot esculenta) Sắn (Manihot esculenta) Sắn (Manihot esculenta) - Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Trung Quốc Hoa Kỳ Nhật Bản Congo Cameroon Mali Cameroon - Cây phả hệ xây dựng dựa 56 trình tự mtCOI Cây phả hệ chia thành nhóm chính: (i) nhóm Sub-Saharan Africa, (ii) New World, Australia-Asia Middle East Asia Minor Phần gốc phả hệ bao gồm SSA1, SSA2, SSA4 JpL xem nhóm gây hại chủ yếu số loại trồng nông nghiệp quan trọng sắn, đậu, khoai lang (Legg et al., 2002; Mugerwa et al., 2012) Nhóm thứ chia thành nhóm phụ Nhóm phụ New World bao gồm New World New World Nhóm phụ Australia-Asia bao gồm China 1, China2, China 3, Australia/Indonesia, Asia 1, Asia III Japan Nhóm phụ Middle East Asia Minor bao gồm Mediterranean, Middle East Asia Biotype Asia II MEAM MEAM IO IO MEAM MED MED Japan Asia III Asia III Asia I Asia I China China Australia/ Indonesia China China China China New World New World New World New World JpL SAS1 SAS4 SAS2 SAS2 Nhóm ngồi Minor 1, Middle East Asia Minor 2, Indian Ocean Nhóm phụ Asia bao gồm Asia II 1, Asia II 2, Asia II 3, Asia II 4, Asia II 5, Asia II 6, Asia II 7, Asia II 8, Asia II 9, Asia II 10 Asia II 11 Loài B tabaci gây hại sắn thu thập Việt Nam (B tabaci VT1-HB, B tabaci VT2-HB, B tabaci HS-HB, B tabaci DN, B tabaci Qng B tabaci TN1) xếp vào nhóm Asia II với B tabaci từ số nước khác có mã số Ngân hàng gen EU192047 (hại cà chua Trung Quốc), HM137326 (hại sắn Trung Quốc), HM590139 (gây hại cà tím Ấn Độ), AJ510057 (hại đậu xanh Pakistan) AJ867557 (hại khoai lang Trung Quốc) (Hình 3) 39 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 1/2021 Tại Việt Nam, nghiên cứu trước thu thập B tabaci 32 loại ký chủ 49 tỉnh khác (Mugerwa et al., 2012) Trong đó, xác định biotype Asia 1, Asia II 1, Asia II 6, MEAM1, MED B tabaci biotype gây hại phổ biến Tuy nhiên, 32 loại ký chủ nói khơng có sắn Như vậy, nghiên cứu bổ sung sắn vào phổ ký chủ biotype Asia II B tabaci Việt Nam Trong thời gian tới, cần có nghiên cứu khả lan truyền SLCMV từ sắn sang loại trồng khác ký chủ loài B tabaci Asia II nêu MW051475 – B tabaci VT1-HB EU192047 MW051476 – B tabaci VT2-HB HM137326 HM590139 Asia II MW051477 – B tabaci HS-HB AJ510057 99 MW051478 – B tabaci DN MW051479 – B tabaci QNg 78 MT359897 – B tabaci TN1 AJ867557 AY686088 99 AF418666 Asia II 77 AJ748390 77 98 HM137338 Asia II HQ916813 99 DQ174523 Asia II GQ139492 Asia II 10 HM137339 99 HM137313 Asia II HM137345 94 Asia II AY686083 92 99 DQ309075 Asia II EU192045 Asia II 11 HM590146 99 AJ748357 Asia II GQ281733 99 HQ268813 Middle East Asia Minor KJ787661 99 99 AY903536 Indian Ocean HQ622855 76 99 86 99 AJ550177 AB297897 AM691064 thời so sánh chúng với trình trự đoạn gen SLCMV cho thấy, trình tự gen khuếch đại từ thể B tabaci hồn tồn trùng với trình tự gen SLCMV Như vậy, kỹ thuật nói trên, phát SLCMV thể trưởng thành B tabaci, kể B tabaci dính bẫy dính màu vàng từ đến ngày điều kiện ngồi đồng ruộng (Hình 5) Từ kết này, cho thấy treo bẫy dính màu vàng ruộng sắn khu vực chưa bị nhiễm bệnh Hàng tuần, tiến hành thu mẫu trưởng thành B tabaci vào bẫy để phát sớm có mặt SLCMV B tabaci Asia II Hình Kết PCR nhân gen mã hóa lớp vỏ protein DNA-A phát virus SLCMV thể Middle East Asia Minor Mediterranean Japan AB440786 99 AB440792 Asia III 84 DQ174527 99 AJ510066 Asia I KF790677 99 AJ748382 China 91 EU192050 Australia/Indonesian GU086325 96 AY686072 China 99 HQ916820 99 AY686089 China GQ139495 99 AY057128 New World 99 JF754907 New World 99 JF901837 New World JF901844 JpL AB308111 Sub Saharan Africa DQ130054 Sub Saharan Africa AF344247 99 AY827604 Sub Saharan Africa EU760745 Outgroup GU220055 Bemisia afer B tabaci M 100bp DNA marker Các giếng 1-8: Mẫu B tabaci thu sau 2, 3, 4, 5, 6, 7, ngày lưu đồng ruộng Giếng 9: mẫu đối chứng dương Giếng 10: mẫu đối chứng âm (B tabaci không mang mầm bệnh) Giếng 11: đối chứng âm (khơng có DNA) (MH891840) SLCMV isolate HN7-Trung Quốc (MG595921) SLCMV isolate Tây Ninh-Việt Nam (MG595918) SLCMV isolate Gia Lai-Việt Nam (MG595916) SLCMV isolate Phú Yên-Việt Nam 73 (MG595923) SLCMV isolate Đăk Nông-Việt Nam (LC312131) SLCMV Tây Ninh VTN6-Việt Nam 100 0.02 H2 SLCMV R2 (AF423180) ICMV Hình Cây phả hệ phân tích biotype B tabaci phương pháp Neighbor Joining với giá trị bootstrap 1000 lần Giá trị nốt giá trị % bootstrap 86 (NC 038449) JMIV (AJ314739) ICMV (NC 038956) JLYMV 99 (JN807766) AYMV (KM923994) CLCuMuV (MK784269) ToLCBDV 95 100 3.3 Xác định khả phát SLCMV thể trưởng thành B tabaci dính bẫy dính màu vàng Bằng kỹ thuật PCR, sử dụng cặp primer đặc hiệu SLCMV-A-F1/SLCMV-A-R2 giải trình tự DNA cá thể trưởng thành B tabaci đồng 40 (DQ116879) ChiLCuV (KX353622.2) PaYLCV 100 (AM292303) PeLCV 0.02 Hình Cây phả hệ xác định SLCMV thể B tabaci dính vào bẫy dính màu vàng treo đồng ruộng Kết nghiên cứu Khoa học KẾT LUẬN Biotype Asia II loài B tabaci biotype truyền SLCMV gây bệnh vi rút khảm sắn Việt Nam Hom giống khỏe, bị nhiễm bệnh trình sinh trưởng non biểu triệu chứng bệnh Nhưng hom giống bị bệnh tất biểu triệu chứng bệnh Có thể treo bẫy dính màu vàng ruộng sắn khu vực chưa bị nhiễm bệnh để thu bắt trưởng thành B tabaci phát có mặt SLCMV thể B tabaci, phục vụ cho cơng tác dự tính dự báo mật độ B tabaci phát sớm SLCMV đồng ruộng Lời cảm ơn Cơng trình kết dự án SATREPS “The project for development and dissemination of sustainable production system based on invasive pest management of cassava in Vietnam, Cambodia and Thailand” Nhóm tác giả chân thành cảm ơn TS Ayaka Uke (Department of Integrated Biosciences, Graduate School of Frontier Sciences, The University of Tokyo, 5-1-5 Kashiwanoha, Kashiwa City, Chiba 277-8562, Japan) tư vấn số kỹ thuật sử dụng nghiên cứu TÀI LIỆU THAM KHẢO De Barro, P.J., 2005 Genetic structure of the whitefly Bemisia tabaci in the Asia-Pacific region revealed using microsatellite markers Mol Ecol 14, 3695-3718 Dinsdale, A., Cook, L., Riginos, C., Buckley, Y.M and De Barro, P., 2010 Refined global analysis of Bemisia tabaci (Hemiptera: Sternorrhyncha: Aleyrodoidea: Aleyrodidae) mitochondrial cytochrome oxidase to identify species level genetic boundaries Ann Entomol Soc Am 103, 196-208 El-Sharkawy, M.A., 2004 Cassava biology and physiology Plant Mol Biol 56, 481-501 Horowitz, A R and Ishaaya, I., 2014 Dynamics of biotypes B and Q of the whitefly Bemisia tabaci and its impact on insecticide resistance Pest Manag Sci 70, 1568-1572 Jarvis, A., Ramirez-Villegas, J., Campo, B.V.H and Navarro-Racines, C., 2012 Is cassava the answer BVTV – Số 1/2021 to African climate change adaptation? Trop Plant Biol 5, 9-29 Kumar S., Stecher G and Tamura K., 2016 MEGA7: Molecular Evolutionary Genetics Analysis Version 7.0 for Bigger Datasets Mol Biol Evol 33, 1870-1874 Legg, J.P., French, R., Rogan, D., Okao-Okuja, G and Brown, J.K., 2002 A distinct Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Sternorrhyncha: Aleyrodidae) genotype cluster is associated with the epidemic of severe cassava mosaic virus disease in Uganda Mol Ecol 11, 1219-1229 Maruthi, M.N., Colvin, J., Seal, S., Gibson, G and Cooper, J., 2002 Co-adaptation between cassava mosaic geminiviruses and their local vector populations Virus Res 86, 71-85 Mascarin, G.M., Kobori, N.N., Quintela, E.D and Delalibera, I., 2013 The virulence of entomopathogenic fungi against Bemisia tabaci biotype B (Hemiptera: Aleyrodidae) and their conidial production using solid substrate fermentation Biol Control 66, 209-218 10 Mugerwa, H., Rey, M.E.C, Alicai, T., Ateka, E., Atuncha, H., Ndunguru, J and Sseruwagi, P., 2012 Genetic diversity and geographic distribution of Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae) genotypes associated with cassava in EastAfrica Ecol Evol 2, 2749-2762 11 Mugerwa, H., Seal S.,, Wang, H-L, Patel, M.V., Kabaalu R., Omongo C.A., Alicai T.,, Tairo, F., Ndunguru, J., Sseruwagi P and Colvin J., 2018 African ancestry of New World, Bemisia tabaci-whitefly species Scientific Reports DOI:10.1038/s41598-01820956-3 12 Navas-Castillo, J., Fiallo-Olive, E and Sanchez-Campos, S., 2011 Emerging virus diseases transmitted by whiteflies Annu Rev Phytopathol 49, 219-248 13 Qin, L., Pan, L.-L & Liu, S.-S., 2016 Further insight into reproductive incompatibility between putative cryptic species of the Bemisia tabaci whitefly complex Insect Sci 23, 215-224 14 Rey, C and Vanderschuren, H., 2017 Cassava mosaic and brown streak diseases: current perspectives and beyond Annu Rev Virol 4, 429-452 15 Shatters, R.G., Powell, C.A., Boykin, L.M., Liansheng, H.E and Kenzie, C.L.M.C., 2009 Improved DNA barcoding method for Bemisia tabaci and related 41 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 1/2021 Aleyrodidae: development of universal Bemisia tabaci biotype-specific mitochondrial cytochrome c oxidase I polymerase chain reaction primers Mol Entomol 102, 750-758 16 Seal, S.E., VandenBosch, F and Jeger, M.J., 2006 Factors influencing begomovirus evolution and their increasing global significance: implications for sustainable control CRC Crit Rev Plant Sci 25, 23-46 17 Simon, C., Frati F., Beckenbach A., Crespi B., Liu H and Flook P , 1994 Evolution,weighting and phylogenetic utility of mitochondrial gene sequences and a compilation of conserved polymerase chain reaction primers Ann Entomol Soc Am 87, 651-701 18 Uke A., Hoat T.X., Quan M.V., Liem N.V., Ugaki M and Natsuaki K.T., 2018 First Report of Sri Lankan cassava mosaic virus Infecting Cassava in Vietnam Plant Dis https://doi.org/10.1094/PDIS05-18-0805-PDN 19 Wang H.L., Cui X.Y., Wang X.W., Liu S.S., Zhang Z.H and Zhou X.P (2016) First report of Sri Lankan cassava mosaic virus infecting cassava in Cambodia Plant Dis 100: 1029-1029 20 Wang, D., Yao, X.M., Huang, J.X., Shi, T and Wang, G.F., 2019 First report of Sri Lankan cassava mosaic virus infected cassava in China Plant Dis https://doi.org/10.1094/PDIS-09-18-1590-PDN 21 Xu, J., Lin, K.K and Liu, S.S , 2011 Performance on different host plants of an alien and an indigenous Bemisia tabaci from China J Appl Entomol 135, 771-779 Phản biện: TS Lê Thị Tuyết Nhung HIỆU LỰC CỦA MỘT SỐ LOẠI THUỐC TRỪ NHỆN ĐỐI VỚI NHỆN GIÉ Steneotarsonemus spinki Smiley HẠI LÚA Ở THỪA THIÊN HUẾ Efficacy of Some Acaricides Controlling Panicle rice Mite Steneotarsonemus spinki Smiley in Thua Thien Hue Province Trần Thị Hồng Đơng, Trương Đức Linh Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Huế Tác giả liên hệ: tranthihoangdong@huaf.edu.vn, ĐT: 0983905241 Ngày nhận bài: 05.11.2020 Ngày chấp nhận: 30.11.2020 Abstract A study was conducted to determine acaricides product and spraying time obtained the highest efficacy to control Panicle Rice Mite (PRM), Steneotarsonemus spinki Smiley in 2020 in Thua Thien Hue province The testing Experiment was setupped in entomology laboratory and greenhouse, Agronomy faculty, College of Agriculture and Forestry, Hue University Laboratory, testing the efficacy of acaricides (Kinalux 25EC, Miktox 2.0EC, Calicydan 260EC, Comite 73EC, Brightin 4.0EC, Nilmite 550SC) with recommended dose in laboratory, result showed that Comite 73EC was the highest efficacy 82.68% (1 day after treated) and maintain to days after treated with 60.83% In greenhouse, experiment to determine spraying time of Comite 73EC and result indicated that the times spraying treatment on 10 and 25 days after infection (finish tillering and booting stage) reached highest efficacy 60.83% and highest rice yield was 29.87 grams/pot Keywords: Efficacy, Panicle Rice Mite, Acaricides, Thua Thien Hue province ĐẶT VẤN ĐỀ Nhện gié, Steneotarsonemus spinki Smiley lồi sâu hại lúa 42 giới, thuộc họ Tarsonemidae, lớp nhện (Acarina) Ngoài gây hại trực tiếp chích hút làm cho lúa bị thối bẹ, nghẹn đòng, vết ... chứng bệnh bọ phấn truyền (D-F) Đặc điểm phân bố hình ảnh trưởng thành B tabaci 37 Kết nghiên cứu Khoa học 3.2 Xác định biotype B tabaci truyền SLCMV Việt Nam Để xác định biotype B tabaci truyền. .. hệ xác định SLCMV thể B tabaci dính vào bẫy dính màu vàng treo đồng ruộng Kết nghiên cứu Khoa học KẾT LUẬN Biotype Asia II loài B tabaci biotype truyền SLCMV gây bệnh vi rút khảm sắn Việt Nam. .. có sắn Như vậy, nghiên cứu bổ sung sắn vào phổ ký chủ biotype Asia II B tabaci Việt Nam Trong thời gian tới, cần có nghiên cứu khả lan truyền SLCMV từ sắn sang loại trồng khác ký chủ loài B tabaci