BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH PHẠM CHÍ THANH CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ TRITERPENOID TỪ NẤM LINH CHI ĐỎ (Ganoderma lucidum) LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU Luận văn Thạc sĩ Dược học Thành phố Hồ Chí Minh, 2020 ii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Phạm Chí Thanh CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ TRITERPENOID TỪ NẤM LINH CHI ĐỎ (Ganoderma lucidum) LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU Ngành Kiểm Nghiệm Thuốc – Độc chất Mã số 8720210 Luận văn thạc sĩ Dược học NGƯỜ.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - PHẠM CHÍ THANH CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ TRITERPENOID TỪ NẤM LINH CHI ĐỎ (Ganoderma lucidum) LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU Luận văn Thạc sĩ Dược học Thành phố Hồ Chí Minh, 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - Phạm Chí Thanh CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ TRITERPENOID TỪ NẤM LINH CHI ĐỎ (Ganoderma lucidum) LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU Ngành : Kiểm Nghiệm Thuốc – Độc chất Mã số: 8720210 Luận văn thạc sĩ Dược học NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS TRẦN VIỆT HÙNG Thành phố Hồ Chí Minh, 2020 ii LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình Phạm Chí Thanh iii LỜI CẢM ƠN Luận văn thạc sĩ thực Viện Kiểm nghiệm thuốc thành phố Hồ Chí Minh hướng dẫn PGS TS Trần Việt Hùng, hỗ trợ DS Phan Nguyễn Trường Thắng Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến thầy định hướng khoa học, tận tình hỗ trợ, bảo, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận văn Xin trân trọng cảm nhà khoa học, tác giả cơng trình nghiên cứu trích dẫn luận văn cung cấp nguồn kiến thức quan trọng, tư liệu quý báu trình thực luận văn Xin trân trọng cảm ơn Ban Lãnh đạo Viện Kiểm nghiệm thuốc thành phố Hồ Chí Minh, Khoa/ Phịng đồng nghiệp Viện, Thầy/ Cơ Bộ mơn Hóa Phân tích – Kiểm nghiệm – Khoa Dược – Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh giúp đỡ tạo điều kiện để tơi hồn thành luận văn Xin cảm ơn Thầy/ Cô Hội đồng bảo vệ luận văn dành thời gian xem đóng góp ý kiến quý báu cho luận văn Cuối xin cảm ơn người thân gia đình, cảm ơn bạn bè thân thiết dành nhiều tình cảm, động viên suốt thời gian thực luận văn Phạm Chí Thanh iv BẢNG TÓM TẮT LUẬN VĂN BẰNG TIẾNG VIỆT Luận văn tốt nghiệp Thạc sĩ Dược học – Năm học 2018 – 2020 “CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ TRITERPENOIDS TỪ NẤM LINH CHI ĐỎ (GANODERMA LUCIDUM) LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU” PHẠM CHÍ THANH Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Trần Việt Hùng Đặt vấn đề Nấm Linh chi loại dược liệu quý nuôi trồng từ lâu Một thành phần nấm Linh Chi triterpenoid có tác dụng dược lý kháng viêm, chống dị ứng, có tác dụng giảm đau, giải độc, dưỡng gan, tiêu diệt tế bào u ác tính [9] Với cơng dụng phong phú đa dạng, chế phẩm từ nấm Linh chi đời ngày nhiều nhằm phục vụ chăm sóc sức khỏe người dân Tuy nhiên, DĐVN V kiểm soát hàm lượng chất chiết dược liệu, chưa kiểm sốt nhóm hoạt chất triterpenoid Dược điển Mỹ xây dựng chuyên luận kiểm soát chất lượng Linh Chi dựa 10 triterpenoid sử dụng chất chuẩn acid ganoderic A cao chuẩn hoạt chất có giá thành cao khó khăn nhập Từ kinh nghiệm nhóm đề tài trước thực Viện Kiểm nghiệm thuốc thành phố Hồ Chí Minh tiến hành phân lập chất chuẩn acid ganoderic A cao chuẩn, đề tài nhận thấy nhiều triterpenoid phân cực yếu chưa nghiên cứu Với lý trên, đề tài: “Chiết xuất, phân lập số triterpenoid từ nấm Linh Chi đỏ (Ganoderma lucidum) - Họ nấm Linh Chi (Ganodermataceae Donk) làm chất đối chiếu” nhằm phục vụ cho việc đánh giá, kiểm nghiệm sản phẩm từ nấm Linh chi v Đối tượng phương pháp nghiên cứu Đối tượng: nấm Linh chi đỏ (Ganoderma lucidum) Công ty Cổ phần Phát triển Dược Tây Nguyên cung cấp Phương pháp: 1) Kiểm tra chất lượng dược liệu nấm Linh Chi đỏ (2) Chiết xuất cao toàn phần cao phân đoạn có chứa triterpenoid (3) Phân lập, tinh chế xác định cấu trúc chất phân lập (4) Thiết lập chất đối chiếu từ chất phân lập Kết thực (1) Dược liệu nấm Linh Chi đỏ đáp ứng yêu cầu chất lượng theo DDVN V USP 41 (2) Chiết xuất cao tồn phần cao phân đoạn có nhiều triterpenoid (3) Phân lập, tinh chế xác định cấu trúc chất: Ganodermanontriol, lucidenic acid N lucidenic acid E2 (4) Thiết lập chất đối chiếu gồm chất: Ganodermanontriol, lucidenic acid N lucidenic acid E2 Kết luận Chiết xuất, phân lập, xác định cấu trúc thiết lập chất đối chiếu gồm chất với giá trị ấn định sau: 604,4 mg ganodermanontriol (95,7%), 126,2 mg acid lucidenic E2 (97,2%) 176,6 mg acid lucidenic N (96,8%) vi BẢNG TÓM TẮT LUẬN VĂN BẰNG TIẾNG ANH Final essay for the degree as a Master of Pharmacy – Year 2018–2020 “EXTRACTED, ISOLATED SOME TRITERPENOID FROM REDDISH LINGZHI (GANODERMA LUCIDUM) OF FAMILY GANODERMACEAE DONK TO BE THE REFERENCES SUBSTANCES” PHAM CHI THANH Supervisor: Assoc Prof PharmD Tran Viet Hung Introduction Ganoderma lucidum is a rare medicinal herb that has been cultivated for a long time One of the main ingredients of Ganoderma lucidum is triterpenoid which has pharmacological effects of anti-inflammatory, anti-allergic, analgesic, detoxifying, nourishing effects of malignant tumor cells [7] With rich and diversified uses, products from Ganoderma lucidum are more and more introduced to serve people's health care However, Vietnamese pharmacopoeia (5th edition) only controlled the extractable content in medicinal herbs without control of active ingredient groups such as triterpenoid, the USP has also developed the LingZhi quality control treatise based on 10 triterpenoids using standard substances It is ganoderic acid A and Extract, but these active ingredients have a high cost and difficulty in importing From the experience of the group of previous subjects performed at the Institute of Drug Quality Control of Ho Chi Minh City to isolate the standard standard of ganoderic acid A and Extract, the topic found that there are still many weakly polarized triterpenoids that have not been studied For the above reasons, the topic: “Extracting and isolating some triterpenoids from Ganoderma lucidum Ganodermataceae Donk as a reference material” for evaluation and control products from Ganoderma Lucidum vii Materials and methods Materials: Lingzhi (Ganoderma lucidum) is provided by Tay Nguyen Pharmaceutical Development Joint Stock Company Methods: 1) Check the quality of Lingzhi medicinal herbs (2) Extraction of total dried extract and other dried fraction-extract (3) Isolation, purification and structural determination of isolated substances (4) Establish the references substances from isolated substances Results (1) Ganoderma lucidum meets the quality requirements according to DDVN V and USP 41 (2) extracted the total dried extract and dried fraction-extract that have much triterpenoids (3) Isolation, purification and structure determination of substances: Ganodermanontriol, Lucidenic acid N and Lucidenic acid E2 (4) Establish a reference substance of substances: Ganodermanontriol, Lucidenic acid N and Lucidenic acid E2 Conclusions Extracted, isolated, structured and established the reference material of substances with the assigned values: 604,4 mg ganodermanontriol (95,7%), 126,2 mg lucidenic acid E2 (97,2%) and 176,6 mg lucidenic Acid N (96,8%) viii MỤC LỤC DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xii DANH MỤC HÌNH xiii DANH MỤC BẢNG xv ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Nấm Linh chi (NLC) 1.1.1 Phân loại khoa học 1.1.2 Mô tả 1.1.3 Đặc điểm sinh thái phân bố 1.1.4 Thành phần hoá học 1.1.5 Tác dụng sinh học 13 1.1.6 Cách dùng số chế phẩm NLC thị trường 14 1.2 Các công trình nghiên cứu Triterpenes NLC 16 1.2.1 Trên giới 16 1.2.2 Trong nước 20 1.3 Chất đối chiếu 21 1.3.1 Định nghĩa 21 1.3.2 Phân loại chất đối chiếu 21 ix CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 23 2.2 Thiết bị, hóa chất dung mơi 23 2.2.1 Thiết bị 23 2.2.2 Hóa chất dung môi 24 2.3 Phương pháp nghiên cứu 25 2.3.1 Đánh giá chất lượng dược liệu 25 2.3.2 Chiết xuất cao toàn phần cao phân đoạn 27 2.3.3 Phân lập, tinh chế xác định cấu trúc chất phân lập 29 2.3.4 Thiết lập chất đối chiếu từ chất phân lập 33 CHƯƠNG KẾT QUẢ THỰC HIỆN 3.1 Đánh giá chất lượng dược liệu 38 3.1.1 Mô tả 38 3.1.2 Soi bột 38 3.1.3 Định tính 39 3.1.4 Độ ẩm 40 3.1.5 Tro toàn phần 40 3.1.6 Tro không tan acid 41 3.1.7 Xác định hàm lượng chất chiết 41 3.2 Chiết xuất cao toàn phần cao phân đoạn 42 3.2.1 Khảo sát yếu tố dung mội ảnh hưởng đến hiệu suất chiết 42 3.2.2 Qui trình chiết xuất cao toàn phần 43 x 3.3676 3.6777 2.00 3.7 3.6 3.5 3.4 3.3 3.2 3.1 1H-Acid lucidenic E2-MeOD 3.2554 3.2427 3.2272 3.2145 1.06 3.0 2.9 2.8 2.7 2.9289 2.9045 2.8831 2.8586 2.7840 2.7478 2.7114 2.6725 1.10 2.6 2.5 2.5419 2.5366 2.5060 2.5004 7.21 2.3 2.3430 2.3230 2.3019 2.4 2.2 F2 - Processing parameters SI 65536 SF 400.2000000 MHz WDW EM SSB LB 0.30 Hz GB PC 1.00 F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 Time 2.45 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG zg30 TD 65536 SOLVENT MeOD NS 16 DS SWH 8196.722 Hz FIDRES 0.250144 Hz AQ 3.9976959 sec RG 90.5 DW 61.000 usec DE 13.13 usec TE 298.7 K D1 2.00000000 sec TD0 SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P0 4.13 usec P1 12.40 usec PLW1 9.19999981 W ppm 2.2077 2.1227 2.1074 2.1024 3.00 Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 2.0 2.47 1.8324 1.8258 1.8107 1.7610 1.7289 1.9 1.8 3.02 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 1.1267 1.0559 1.0433 1.0395 1.0271 6.13 2.1227 2.1074 2.1024 2.1 0.9 2.92 1.6246 1.6192 4.12 1.3678 3.03 1H-Acid lucidenic E2-MeOD 2.93 0.9129 0.9071 0.8526 0.8398 3.18 ppm F2 - Processing parameters SI 65536 SF 400.2000000 MHz WDW EM SSB LB 0.30 Hz GB PC 1.00 F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 Time 2.45 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG zg30 TD 65536 SOLVENT MeOD NS 16 DS SWH 8196.722 Hz FIDRES 0.250144 Hz AQ 3.9976959 sec RG 90.5 DW 61.000 usec DE 13.13 usec TE 298.7 K D1 2.00000000 sec TD0 SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P0 4.13 usec P1 12.40 usec PLW1 9.19999981 W Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 145.77 151.79 175.96 174.39 170.28 170.22 199.76 194.21 194.18 207.53 207.48 220 200 180 160 140 BC-Acid lucidenic E2-MeOD 120 100 79.44 76.67 80 40 20 ppm 58.41 51.31 50.68 45.05 40.36 38.81 36.95 36.21 32.96 32.55 31.02 29.74 26.93 26.62 20.15 19.51 19.21 16.90 14.79 11.18 60 F2 - Processing parameters SI 32768 SF 100.6303700 MHz WDW EM SSB LB 1.00 Hz GB PC 1.40 F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 Time 10.24 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG zgpg30 TD 65536 SOLVENT MeOD NS 2500 DS SWH 25000.000 Hz FIDRES 0.762939 Hz AQ 1.3107200 sec RG 3.90625 DW 20.000 usec DE 18.00 usec TE 298.7 K D1 2.00000000 sec D11 0.03000000 sec TD0 SFO1 100.6414394 MHz NUC1 13C P0 3.33 usec P1 10.00 usec PLW1 40.40000153 W SFO2 400.2016008 MHz NUC2 1H CPDPRG[2 waltz65 PCPD2 78.20 usec PLW2 9.19999981 W PLW12 0.23131999 W PLW13 0.08770500 W Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 45.05 51.31 50.68 58.41 65 60 55 50 45 BC-Acid lucidenic E2-MeOD 38.81 40.36 40 36.95 36.21 35 32.96 32.55 31.02 29.74 30 26.93 26.62 25 20.15 19.51 19.21 20 14.79 15 11.18 10 ppm F2 - Processing parameters SI 32768 SF 100.6303700 MHz WDW EM SSB LB 1.00 Hz GB PC 1.40 F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 Time 10.24 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG zgpg30 TD 65536 SOLVENT MeOD NS 2500 DS SWH 25000.000 Hz FIDRES 0.762939 Hz AQ 1.3107200 sec RG 3.90625 DW 20.000 usec DE 18.00 usec TE 298.7 K D1 2.00000000 sec D11 0.03000000 sec TD0 SFO1 100.6414394 MHz NUC1 13C P0 3.33 usec P1 10.00 usec PLW1 40.40000153 W SFO2 400.2016008 MHz NUC2 1H CPDPRG[2 waltz65 PCPD2 78.20 usec PLW2 9.19999981 W PLW12 0.23131999 W PLW13 0.08770500 W Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 16.90 13 12 11 10 Cosy-Acid lucidenic E2-MeOD ppm 12 10 ppm F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 QF SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 128 SFO1 400.2026 MHz FIDRES 91.911766 Hz SW 14.698 ppm FnMODE QF F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 Time 8.03 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG cosygpmfppqf TD 4096 SOLVENT MeOD NS 20 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 2.872243 Hz AQ 0.3481600 sec RG 64 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K D0 0.00000300 sec D1 1.50000000 sec D11 0.03000000 sec D12 0.00002000 sec D13 0.00000400 sec D16 0.00020000 sec IN0 0.00017000 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P17 2500.00 usec PLW1 9.19999981 W PLW10 1.57179999 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 16.00 % GPNAM[2] SMSQ10.100 GPZ2 12.00 % GPNAM[3] SMSQ10.100 GPZ3 40.00 % P16 1000.00 usec Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 6.0 5.5 5.0 4.5 Cosy-Acid lucidenic E2-MeOD 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 6.0 ppm 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 ppm F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 QF SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 128 SFO1 400.2026 MHz FIDRES 91.911766 Hz SW 14.698 ppm FnMODE QF F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 Time 8.03 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG cosygpmfppqf TD 4096 SOLVENT MeOD NS 20 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 2.872243 Hz AQ 0.3481600 sec RG 64 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K D0 0.00000300 sec D1 1.50000000 sec D11 0.03000000 sec D12 0.00002000 sec D13 0.00000400 sec D16 0.00020000 sec IN0 0.00017000 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P17 2500.00 usec PLW1 9.19999981 W PLW10 1.57179999 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 16.00 % GPNAM[2] SMSQ10.100 GPZ2 12.00 % GPNAM[3] SMSQ10.100 GPZ3 40.00 % P16 1000.00 usec Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 3.4 3.2 3.0 2.8 Cosy-Acid lucidenic E2-MeOD 2.6 2.4 2.2 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 ppm 3.4 3.2 3.0 2.8 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 QF SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 128 SFO1 400.2026 MHz FIDRES 91.911766 Hz SW 14.698 ppm FnMODE QF 2.6 2.4 2.2 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 Time 8.03 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG cosygpmfppqf TD 4096 SOLVENT MeOD NS 20 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 2.872243 Hz AQ 0.3481600 sec RG 64 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K D0 0.00000300 sec D1 1.50000000 sec D11 0.03000000 sec D12 0.00002000 sec D13 0.00000400 sec D16 0.00020000 sec IN0 0.00017000 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P17 2500.00 usec PLW1 9.19999981 W PLW10 1.57179999 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 16.00 % GPNAM[2] SMSQ10.100 GPZ2 12.00 % GPNAM[3] SMSQ10.100 GPZ3 40.00 % P16 1000.00 usec Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO 0.8 ppm - PL21 - 13 12 11 10 HMBC-Acid lucidenic E2-MeOD ppm 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW SINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 256 SFO1 100.6414 MHz FIDRES 172.986435 Hz SW 220.011 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Date_ Time F2 - Acquisition Parameters 20201006 6.40 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hmbcetgpl3nd TD 4096 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 2.872243 Hz AQ 0.3481600 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST6 120.0000000 CNST7 170.0000000 CNST13 8.0000000 D0 0.00000300 sec D1 1.50000000 sec D6 0.06250000 sec D16 0.00020000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6414394 MHz NUC2 13C P3 10.00 usec P24 2000.00 usec PLW2 40.40000153 W SPNAM[7] Crp60comp.4 SPOAL7 0.500 SPOFFS7 Hz SPW7 6.17269993 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[3] SMSQ10.100 GPZ3 14.00 % GPNAM[4] SMSQ10.100 GPZ4 -8.00 % GPNAM[5] SMSQ10.100 GPZ5 -4.00 % GPNAM[6] SMSQ10.100 GPZ6 -2.00 % P16 1000.00 usec CNST30 0.598113 Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 6.0 5.5 5.0 4.5 HMBC-Acid lucidenic E2-MeOD 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 ppm 1.0 210 200 190 180 170 160 150 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW SINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 256 SFO1 100.6414 MHz FIDRES 172.986435 Hz SW 220.011 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Date_ Time F2 - Acquisition Parameters 20201006 6.40 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hmbcetgpl3nd TD 4096 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 2.872243 Hz AQ 0.3481600 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST6 120.0000000 CNST7 170.0000000 CNST13 8.0000000 D0 0.00000300 sec D1 1.50000000 sec D6 0.06250000 sec D16 0.00020000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6414394 MHz NUC2 13C P3 10.00 usec P24 2000.00 usec PLW2 40.40000153 W SPNAM[7] Crp60comp.4 SPOAL7 0.500 SPOFFS7 Hz SPW7 6.17269993 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[3] SMSQ10.100 GPZ3 14.00 % GPNAM[4] SMSQ10.100 GPZ4 -8.00 % GPNAM[5] SMSQ10.100 GPZ5 -4.00 % GPNAM[6] SMSQ10.100 GPZ6 -2.00 % P16 1000.00 usec CNST30 0.598113 Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 6.0 5.8 5.6 5.4 5.2 5.0 HMBC-Acid lucidenic E2-MeOD 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3.8 3.6 3.4 ppm 3.2 80 70 60 50 40 30 20 10 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW SINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 256 SFO1 100.6414 MHz FIDRES 172.986435 Hz SW 220.011 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Date_ Time F2 - Acquisition Parameters 20201006 6.40 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hmbcetgpl3nd TD 4096 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 2.872243 Hz AQ 0.3481600 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST6 120.0000000 CNST7 170.0000000 CNST13 8.0000000 D0 0.00000300 sec D1 1.50000000 sec D6 0.06250000 sec D16 0.00020000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6414394 MHz NUC2 13C P3 10.00 usec P24 2000.00 usec PLW2 40.40000153 W SPNAM[7] Crp60comp.4 SPOAL7 0.500 SPOFFS7 Hz SPW7 6.17269993 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[3] SMSQ10.100 GPZ3 14.00 % GPNAM[4] SMSQ10.100 GPZ4 -8.00 % GPNAM[5] SMSQ10.100 GPZ5 -4.00 % GPNAM[6] SMSQ10.100 GPZ6 -2.00 % P16 1000.00 usec CNST30 0.598113 Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 3.0 2.8 2.6 2.4 2.2 HMBC-Acid lucidenic E2-MeOD 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 ppm 0.8 80 70 60 50 40 30 20 10 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW SINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 256 SFO1 100.6414 MHz FIDRES 172.986435 Hz SW 220.011 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Date_ Time F2 - Acquisition Parameters 20201006 6.40 h INSTRUM AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hmbcetgpl3nd TD 4096 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 2.872243 Hz AQ 0.3481600 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST6 120.0000000 CNST7 170.0000000 CNST13 8.0000000 D0 0.00000300 sec D1 1.50000000 sec D6 0.06250000 sec D16 0.00020000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6414394 MHz NUC2 13C P3 10.00 usec P24 2000.00 usec PLW2 40.40000153 W SPNAM[7] Crp60comp.4 SPOAL7 0.500 SPOFFS7 Hz SPW7 6.17269993 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[3] SMSQ10.100 GPZ3 14.00 % GPNAM[4] SMSQ10.100 GPZ4 -8.00 % GPNAM[5] SMSQ10.100 GPZ5 -4.00 % GPNAM[6] SMSQ10.100 GPZ6 -2.00 % P16 1000.00 usec CNST30 0.598113 Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 13 12 11 10 HSQC-Acid lucidenic E2-MeOD ppm 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 200 SFO1 100.6394 MHz FIDRES 221.422638 Hz SW 220.016 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Time INSTRUM F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 4.36 h AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hsqcedetgpsp.3 TD 2048 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 5.744485 Hz AQ 0.1740800 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST2 145.0000000 D0 0.00000300 sec D1 2.00000000 sec D4 0.00172414 sec D11 0.03000000 sec D16 0.00020000 sec D21 0.00360000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec P28 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6394268 MHz NUC2 13C CPDPRG[2 bi_p5m4sp_4sp.2 P3 10.00 usec P14 500.00 usec P31 2119.00 usec P63 1500.00 usec PLW0 W PLW2 40.40000153 W PLW12 0.66064000 W SPNAM[3] Crp60,0.5,20.1 SPOAL3 0.500 SPOFFS3 Hz SPW3 6.17269993 W SPNAM[14 Crp32,0.75,20.2 SPOAL14 0.500 SPOFFS14 Hz SPW14 1.31680000 W SPNAM[18 Crp60_xfilt.2 SPOAL18 0.500 SPOFFS18 -1509.46 Hz SPW18 1.18910003 W SPNAM[31 Crp32,1.5,20.2 SPOAL31 0.500 SPOFFS31 Hz SPW31 0.65842003 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[2] SMSQ10.100 GPZ2 20.10 % P16 1000.00 usec Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 6.0 5.5 5.0 4.5 HSQC-Acid lucidenic E2-MeOD 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 ppm 90 80 70 60 50 40 30 20 10 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 200 SFO1 100.6394 MHz FIDRES 221.422638 Hz SW 220.016 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Time INSTRUM F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 4.36 h AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hsqcedetgpsp.3 TD 2048 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 5.744485 Hz AQ 0.1740800 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST2 145.0000000 D0 0.00000300 sec D1 2.00000000 sec D4 0.00172414 sec D11 0.03000000 sec D16 0.00020000 sec D21 0.00360000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec P28 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6394268 MHz NUC2 13C CPDPRG[2 bi_p5m4sp_4sp.2 P3 10.00 usec P14 500.00 usec P31 2119.00 usec P63 1500.00 usec PLW0 W PLW2 40.40000153 W PLW12 0.66064000 W SPNAM[3] Crp60,0.5,20.1 SPOAL3 0.500 SPOFFS3 Hz SPW3 6.17269993 W SPNAM[14 Crp32,0.75,20.2 SPOAL14 0.500 SPOFFS14 Hz SPW14 1.31680000 W SPNAM[18 Crp60_xfilt.2 SPOAL18 0.500 SPOFFS18 -1509.46 Hz SPW18 1.18910003 W SPNAM[31 Crp32,1.5,20.2 SPOAL31 0.500 SPOFFS31 Hz SPW31 0.65842003 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[2] SMSQ10.100 GPZ2 20.10 % P16 1000.00 usec Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 6.0 5.5 5.0 4.5 HSQC-Acid lucidenic E2-MeOD 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 ppm 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 200 SFO1 100.6394 MHz FIDRES 221.422638 Hz SW 220.016 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Time INSTRUM F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 4.36 h AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hsqcedetgpsp.3 TD 2048 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 5.744485 Hz AQ 0.1740800 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST2 145.0000000 D0 0.00000300 sec D1 2.00000000 sec D4 0.00172414 sec D11 0.03000000 sec D16 0.00020000 sec D21 0.00360000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec P28 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6394268 MHz NUC2 13C CPDPRG[2 bi_p5m4sp_4sp.2 P3 10.00 usec P14 500.00 usec P31 2119.00 usec P63 1500.00 usec PLW0 W PLW2 40.40000153 W PLW12 0.66064000 W SPNAM[3] Crp60,0.5,20.1 SPOAL3 0.500 SPOFFS3 Hz SPW3 6.17269993 W SPNAM[14 Crp32,0.75,20.2 SPOAL14 0.500 SPOFFS14 Hz SPW14 1.31680000 W SPNAM[18 Crp60_xfilt.2 SPOAL18 0.500 SPOFFS18 -1509.46 Hz SPW18 1.18910003 W SPNAM[31 Crp32,1.5,20.2 SPOAL31 0.500 SPOFFS31 Hz SPW31 0.65842003 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[2] SMSQ10.100 GPZ2 20.10 % P16 1000.00 usec Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - 3.4 3.2 3.0 2.8 2.6 HSQC-Acid lucidenic E2-MeOD 2.4 2.2 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 ppm 0.6 35 30 25 20 15 10 F1 - Processing parameters SI 2048 MC2 echo-antiecho SF 100.6303700 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB F2 - Processing parameters SI 2048 SF 400.2000000 MHz WDW QSINE SSB LB Hz GB PC 1.40 F1 - Acquisition parameters TD 200 SFO1 100.6394 MHz FIDRES 221.422638 Hz SW 220.016 ppm FnMODE Echo-Antiecho ppm Time INSTRUM F2 - Acquisition Parameters Date_ 20201006 4.36 h AvanceNEO 400Mhz System PROBHD Z149000_0044 ( PULPROG hsqcedetgpsp.3 TD 2048 SOLVENT MeOD NS 15 DS 16 SWH 5882.353 Hz FIDRES 5.744485 Hz AQ 0.1740800 sec RG 101 DW 85.000 usec DE 10.00 usec TE 298.7 K CNST2 145.0000000 D0 0.00000300 sec D1 2.00000000 sec D4 0.00172414 sec D11 0.03000000 sec D16 0.00020000 sec D21 0.00360000 sec IN0 0.00002259 sec SPARSELI TDav SFO1 400.2026013 MHz NUC1 1H P1 12.40 usec P2 24.80 usec P28 usec PLW1 9.19999981 W SFO2 100.6394268 MHz NUC2 13C CPDPRG[2 bi_p5m4sp_4sp.2 P3 10.00 usec P14 500.00 usec P31 2119.00 usec P63 1500.00 usec PLW0 W PLW2 40.40000153 W PLW12 0.66064000 W SPNAM[3] Crp60,0.5,20.1 SPOAL3 0.500 SPOFFS3 Hz SPW3 6.17269993 W SPNAM[14 Crp32,0.75,20.2 SPOAL14 0.500 SPOFFS14 Hz SPW14 1.31680000 W SPNAM[18 Crp60_xfilt.2 SPOAL18 0.500 SPOFFS18 -1509.46 Hz SPW18 1.18910003 W SPNAM[31 Crp32,1.5,20.2 SPOAL31 0.500 SPOFFS31 Hz SPW31 0.65842003 W GPNAM[1] SMSQ10.100 GPZ1 80.00 % GPNAM[2] SMSQ10.100 GPZ2 20.10 % P16 1000.00 usec Current Data Parameters NAME Acid lucidenic 2-L2 EXPNO PROCNO - PL21 - ... 2020 ? ?CHI? ??T XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ TRITERPENOIDS TỪ NẤM LINH CHI ĐỎ (GANODERMA LUCIDUM) LÀM CHẤT ĐỐI CHI? ??U” PHẠM CHÍ THANH Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Trần Việt Hùng Đặt vấn đề Nấm Linh chi. .. MINH - Phạm Chí Thanh CHI? ??T XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ TRITERPENOID TỪ NẤM LINH CHI ĐỎ (Ganoderma lucidum) LÀM CHẤT ĐỐI CHI? ??U Ngành : Kiểm Nghiệm Thuốc – Độc chất Mã số: 8720210 Luận văn thạc... tài khoa học ? ?Chi? ??t xuất, phân lập acid ganodeic A từ nấm linh chi (Ganoderma lucidum) làm chất đối chi? ??u” Đề tài tiến hành chi? ??t xuất cao toàn phần cách làm ẩm 1,5 kg Nấm Linh Chi với lít Ethanol