MỞ ĐẦU Cùng với sự tiến bộ của khoa học kỹ thuật, chất lượng cuộc sống của con người được nâng lên. Tuy nhiên, hoạt động sản xuất và sinh hoạt của con người đã làm cho môi trường ô nhiễm, con người đang phải đối mặt với nhiều căn bệnh hiểm nghèo. Theo thống kê của tổ chức Y tế Thế giới (2015), Việt Nam đứng ở top 2 trên bản đồ ung thư thế giới, bình quân mỗi năm có khoảng 70.000 người chết và 200.000 người mắc bệnh mới, con số này đang tiếp tục gia tăng. Trước tình hình đó các nhà khoa học không ngừng tìm kiếm các hợp chất mới có thể tiêu diệt căn bệnh thời đại này, nhất là khi các phương pháp hỗ trợ điều trị như xạ trị, hóa trị và phẫu thuật để lại nhiều tác dụng xấu cho người bệnh. Trong hành trình tìm kiếm các chất mới có hoạt tính sinh học cao, các nhà khoa học đã phát hiện nhiều điều kỳ thú từ thiên nhiên. Trong những năm gần đây một số quốc gia như Ấn Độ, Thái Lan, Indonesia, Brazin, Trung Quốc, Úc đã tập trung nghiên cứu khai thác và sàng lọc các hợp chất có hoạt tính sinh học cao từ các loài cây ngập mặn. Việt Nam có khoảng 3260 km bờ biển với nhiều loài thực vật ở các vùng sinh thái ven biển khác nhau. Trong điều kiện địa lý khắc nghiệt như môi trường đất cát, yếm khí, nhiều côn trùng, thường xuyên ngập triều vv...các loài cây ngập mặn ven biển đã trải qua quá trình sinh tổng hợp đặc biệt tạo ra nhiều hợp chất có cấu trúc phong phú và có hoạt tính sinh học cao. Các loài cây vùng ngập mặn ven biển từ lâu đã là nguồn thuốc tự nhiên rất phong phú và gần gũi đối với người dân vùng biển. Tuy nhiên ở Việt Nam hiện nay các công trình nghiên cứu thăm dò về hoạt tính sinh học và thành phần hóa học của các loài cây ngập mặn đã được ứng dụng trong dân gian để làm thuốc còn rất ít. Chính vì vậy, với mong muốn phát hiện các chất có cấu trúc hóa học và hoạt tính sinh học lý thú từ các loài ngập mặn ven biển đã được người dân sử dụng làm thuốc nhưng chưa được nghiên cứu nhiều về mặt hóa học cũng như hoạt tính sinh học, chúng tôi đã lựa chọn 3 loài cây vùng ngập mặn là loài Cỏ chông (S. littoreus (Burm. f.) Merr.), loài Hếp (S. taccada (Gaertn. Roxb.) và loài Cóc đỏ (L. littorea (Jack) Voigt.) làm đối tượng để nghiên cứu. Luận án đặt ra mục tiêu cụ thể như sau: 1. Chiết xuất, phân lập các chất từ 3 loài cây ngập mặn: Cỏ chông (Spinifex littoreus), Hếp (Scaevola taccada) và Cóc đỏ (Lumnitzera littorea). 2. Xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất đã phân lập. 3. Đánh giá hoạt tính kháng vi sinh vật, gây độc tế bào, chống oxy hóa của các dịch chiết và một số chất phân lập được từ 3 loài cây kể trên. Đề tài: “Nghiên cứu thành phần hoá học và thăm dò hoạt tính sinh học của ba loài thực vật ngập mặn vùng ven biển Việt Nam: Cỏ chông (Spinifex littoreus), Hếp (Scaevola taccada) và Cóc đỏ (Lumnitzera littorea)” là cần thiết, có ý nghĩa khoa học và thực tiễn cao, có nhiều đóng góp mới vào việc nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các loài ngập mặn ven biển, một lĩnh vực chưa có nhiều công trình nghiên cứu ở Việt Nam. Các kết quả của đề tài sẽ góp phần giải thích về bản chất hóa học của các vị thuốc dân gian, nâng cao giá trị sử dụng của các loài cây ngập mặn.
M ỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT I DANH MỤC HÌNH II DANH MỤC CÁC BẢNG V MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 Tổng quan thực vật ngập mặn -3 1.1.1 Đặc điểm sinh thái thực vật ngập mặn -3 1.1.2 Phân bố rừng ngập mặn Việt Nam -5 1.1.3 Tình hình nghiên cứu thực vật ngập mặn giới -5 1.1.4 Tình hình nghiên cứu thực vật ngập mặn Việt Nam -14 1.2 Giới thiệu chi Cóc (Lumnitzera), họ Trâm bầu (Combretaceae) -16 1.2.1 Đặc điểm thực vật lồi Cóc đỏ (Lumnitzera littorea) -16 1.2.2 Ứng dụng y học cổ truyền lồi Cóc đỏ (Lumnitzera littorea) 17 1.2.3 Tình hình nghiên cứu lồi thuộc chi Cóc (Lumnitzera) -17 1.2.3.1 Tình hình nghiên cứu lồi Cóc trắng (Lumnitzera racemosa) 17 1.2.3.2 Tình hình nghiên cứu lồi Cóc đỏ (Lumnitzera littorea) 22 1.3 Giới thiệu chi Cỏ chông (Spinefex) thuộc họ Lúa (Poaceae) 22 1.3.1 Đặc điểm thực vật lồi Cỏ chơng (Spinifex litoreus) -22 1.3.2 Ứng dụng y học cổ truyền lồi Cỏ chơng (Spinifex littoreus) 23 1.3.3 Tình hình nghiên cứu lồi Cỏ chông (Spinifex littoreus) -23 1.4 Giới thiệu chi Hếp (Scaevola) thuộc họ Hếp (Goodeniaceae) -24 1.4.1 Tình hình nghiên cứu lồi thuộc chi Hếp (Scaevola) 24 1.4.2 Giới thiệu loài Hếp (Scaevola taccada) 28 1.4.2.1 Đặc điểm thực vật loài Hếp (Scaevola taccada) 28 1.4.2.2 Ứng dụng y học cổ truyền loài Hếp (Scaevola taccada) 28 1.4.2.3 Thành phần hóa học lồi Hếp (Scaevola taccada) 28 1.4.2.4 Nghiên cứu hoạt tính sinh học loài Hếp (S taccada) 30 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 32 2.1 Đối tượng nghiên cứu 32 2.1.1 Cây Cóc đỏ 32 2.1.2 Cây Hếp 32 2.1.3 Cây Cỏ chông 32 2.2 Hóa chất, thiết bị nghiên cứu -33 2.2.1 Hóa chất 33 2.2.2 Thiết bị 33 2.3 Phương pháp nghiên cứu -33 2.3.1 Phương pháp chiết mẫu thực vật -33 2.3.2 Phương pháp phân lập, tinh chế hợp chất 34 2.3.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học 34 2.3.3.1 Phương pháp thử hoạt tính gây độc tế bào [116][117] 34 2.3.3.2 Phương pháp thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định [118][119] 35 2.3.3.3 Phương pháp thử hoạt tính chống oxy hóa DPPH [120] [121] [122] .37 2.3.4 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất 38 2.4 Phân lập, tinh chế chất từ mẫu Hếp -38 2.4.1 Điều chế cặn chiết từ Hếp -38 2.4.2 Chiết tổng alkaloid từ cặn chiết MeOH 39 2.4.3 Phân lập, tinh chế chất từ Hếp 39 2.4.3.1 Phân lập, tinh chế chất từ cặn chiết n-hexane Hếp 40 2.4.3.2 Phân lập, tinh chế chất từ cặn chiết ethyl acetate Hếp 41 2.5 Phân lập, tinh chế chất từ mẫu Cóc đỏ -43 2.5.1 Điều chế cặn chiết từ Cóc đỏ -43 2.5.2 Phân lập, tinh chế chất từ Cóc đỏ 44 2.5.2.1 Phân lập, tinh chế chất từ cặn ethyl acetate cành Cóc đỏ 44 2.5.2.2 Phân lập, tinh chế chất từ cặn chiết ethyl acetate Cóc đỏ .46 2.5.2.3 Phân lập, tinh chế chất từ cặn chiết methanol cành Cóc đỏ 47 2.5.2.4 Phân lập, tinh chế chất từ cặn chiết methanol Cóc đỏ 49 2.6 Phân lập, tinh chế chất từ mẫu Cỏ chông 50 2.6.1 Điều chế cặn chiết từ hoa Cỏ chông 50 2.6.2 Phân lập, tinh chế chất từ Cỏ chông -50 2.6.2.1 Phân lập, tinh chế chất từ cặn chiết n-hexane hoa Cỏ chông 50 2.6.2.2 Phân lập, tinh chế chất từ cặn chiết n-butanol hoa Cỏ chông 52 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 55 3.1 Kết nghiên cứu loài Hếp (S taccada) 55 3.1.1 Hoạt tính sinh học loài Hếp 55 3.1.2 Thành phần hóa học Hếp -55 3.2 Kết nghiên cứu lồi Cóc đỏ (L littorea) -72 3.2.1 Hoạt tính sinh học lồi Cóc đỏ 72 3.2.2 Thành phần hóa học lồi Cóc đỏ 73 3.3 Kết nghiên cứu lồi Cỏ chơng (S littoreus) 98 3.3.1 Hoạt tính sinh học lồi Cỏ chông -98 3.3.2 Thành phần hóa học lồi Cỏ chông -99 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 129 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 131 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 132 TÀI LIỆU THAM KHẢO 133 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Singlet, douplet, triplet, douplet of douplet, s, d, t, dd, tt, m, br s triplet of triplet, multiplet, broad singlet MeOH, CD3OD Methanol, methanol deuteri hoá DMSO Dimethyl sulfoxide EtOAc Ethyl acetate CDCl3 Chloroform Ar Aren – vòng benzen Nồng độ ức chế 50% tế bào tăng trưởng IC50 (Compound concentrations that produce 50% of cell growth inhibition) Hằng số tương tác (Hz); độ dịch chuyển hóa học J, δ (ppm) Nồng độ ức chế tối thiểu - Minimum Inhibitory MIC Concentration Phổ hồng ngoại biến đổi Fourier - Fourier FT-IR Transform Infrared Spectroscopy Phổ khối lượng phun mù điện tử - Electron Spray ESI-MS Ionization Mass Spectroscopy Phổ khối lượng phun mù điện tử phân giải caoHR-ESI-MS Hight Resolution Electron Spray Ionization Mass Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H - Proton Nuclear H NMR Magnetic Resonance Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C - Carbon 13 C NMR Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Distortionless Enhancement by Polarization DEPT Transfer Tương tác dị hạt nhân qua liên kết HSQC Heteronuclear Single Quantum Coherence Tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết HMBC Heteronuclear Multipe Bond Coherence NOESY Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy 1 H H COSY Phổ tương quan-Correlated Spectroscopy SKC Sắc ký cột DANH MỤC HÌ Hình 1.1 Cành (1), hoa (2) chùm (3) Cóc đỏ [71] 16 Hình 1.2 Thân (1), nhánh cụm hoa (2), (3), hoa (4) Cỏ chơng [71]- -23 Hình 1.3 Ngọn cành mang hoa (1) hoa (2) Hếp (S taccada) [71] 28 Y Hình 2.1 Tiêu Cỏ chông (S littoreus) -32 Hình 2.2 Sơ đồ điều chế cặn chiết từ mẫu Hếp (S taccada) 38 Hình 2.3 Quy trình chiết tổng alkaloid từ cặn methanol Hếp -39 Hình 2.4 Sơ đồ phân lập chất từ cặn n-hexane Hếp (S taccada) -40 Hình 2.5 Sơ đồ phân lập chất từ cặn ethyl acetate Hếp (S taccada) -42 Hình 2.6 Sơ đồ chung chiết mẫu cành Cóc đỏ (L littoreus) -44 Hình 2.7 Sơ đồ phân lập chất từ cặn ethyl acetate cành Cóc đỏ -45 Hình 2.8 Sơ đồ phân lập chất từ cặn ethyl acetate Cóc đỏ 46 Hình 2.9 Sơ đồ phân lập chất từ cặn MeOH cành Cóc đỏ -47 Hình 2.10 Sơ đồ phân lập chất từ cặn methanol Cóc đỏ -49 Hình 2.11 Sơ đồ chiết mẫu hoa Cỏ chông (Spinifex littoreus) 50 Hình 2.12 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết n-hexane hoa Cỏ chơng 51 Hình 2.13 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết n-butanol hoa Cỏ chơng -53 Hình 3.1 Phổ 13C NMR (phổ giãn) chất ST1 -56 Hình 3.2 Các tương tác COSY (─) HMBC (→) chất ST2 -58 Hình 3.3 Phổ 1H 1H COSY chất ST2 -58 Hình 3.4 Phổ 1H NMR chất ST3 61 Hình 3.5 Phổ 13C NMR chất ST3 62 Hình 3.6 Phổ 1H NMR chất ST4 64 Hình 3.7 Phổ 13C NMR chất ST4 65 Hình 3.8 Phổ 1H NMR chất ST8 69 Hình 3.9 Phổ 13C NMR chất ST8 70 Hình 3.10 Phổ 1H NMR vùng trường thấp chất CĐ1 -74 Hình 3.11 Phổ 13C NMR chất CĐ2 75 Hình 3.12 Các tương tác HMBC chất CĐ2 -75 Hình 3.13 Phổ HMBC vùng trường cao chất CĐ2 76 Hình 3.14 Phổ 1H NMR chất CĐ2a -78 Hình 3.15 Phổ 13C NMR chất CĐ2a 79 Hình 3.16 Phổ 1H NMR chất CĐ3 80 Hình 3.17 Phổ 1H NMR (phổ giãn) chất CĐ4 -81 Hình 3.18 Phổ 1H NMR vùng trường thấp chất CĐ6 -83 Hình 3.19 Phổ 13C NMR chất CĐ6 84 Hình 3.20 Phổ 1H NMR vùng trường thấp chất CĐ7 -86 Hình 3.21 Các tương tác COSY(─) HMBC (→) chất CĐ7 -86 Hình 3.22 Phổ 1H 1H COSY chất CĐ7 -87 Hình 3.23 Phổ HMBC chất CĐ7 88 Hình 3.24 Phổ 1H NMR chất CĐ8 89 Hình 3.25 Phổ 1H NMR chất CĐ8a -90 Hình 3.26 Phổ 1H NMR chất CĐ9 92 Hình 3.27 Phổ 13C NMR chất CĐ9 93 Hình 3.28 Phổ 1H NMR chất CĐ10 -95 Hình 3.29 Phổ 13C NMR chất CĐ10 95 Hình 3.30 Các tương tác HMBC (H→C) chất CĐ10 96 Hình 3.31 Phổ HMBC chất CĐ10 -96 Hình 3.32 Phổ 1H NMR (giãn rộng) chất SL1 -99 Hình 3.33 Các tương tác COSY HMBC chất SL1 100 Hình 3.34 Phổ 1H 1H COSY vùng trường thấp chất SL1 101 Hình 3.35 Phổ HMBC vùng trường cao chất SL1 -102 Hình 3.36 Phổ 1H NMR chất SL2 104 Hình 3.37 Phổ 13C NMR chất SL2 -105 Hình 3.38 Phổ 1H NMR chất SL3 106 Hình 3.39 Phổ 1H NMR chất SL7 108 Hình 3.40 Các tương tác COSY, HMBC NOESY (chính) chất SL7 -108 Hình 3.41 Phổ 1H 1H COSY chất SL7 -109 Hình 3.42 Phổ HMBC chất SL7 -110 Hình 3.43 Phổ NOESY chất SL7 110 Hình 3.44 Phổ 1H NMR chất SL8 112 Hình 3.45 Phổ 13C NMR DEPT chất SL8 -113 Hình 3.46 Phổ 1H NMR chất SL9 115 Hình 3.47 Phổ 1H 1H COSY chất SL9 -116 Hình 3.48 Phổ HMBC chất SL9 -116 Hình 3.49 Các tương tác COSY, HMBC, NOESY (chính) chất SL9 117 Hình 3.50 Các tương tác COSY, HMBC, NOESY (chính) chất SL10 -119 Hình 3.51 Phổ HMBC vùng trường thấp chất SL10 -119 Hình 3.52 Phổ 1H 1H COSY vùng trường thấp chất SL10 120 Hình 3.53 Phổ NOESY vùng trường thấp chất SL10 121 Hình 3.54 Phổ 1H NMR (phổ giãn) vùng trường thấp chất SL10a 123 DANH MỤC CÁC BẢ Bảng 1.1 Các cấp ngập triều loài thường gặp rừng ngập mặn [1] -4 Bảng 1.2 Ứng dụng dân gian thử nghiệm hoạt tính sinh học số lồi thực vật ngập mặn giới [3] Bảng 1.3 Hợp chất terpenoid khung D-friedooleanane chi Vẹt (Bruguiera) chi Đước (Rhizophora) - 11 Bảng 1.4 Hợp chất terpenoid khung lupane phân lập từ lồi Dà vơi (Ceriops tagal) 12 Bảng 1.5 Các hợp chất flavonoid phân lập từ loài Đước vòi (R stylosa) -13 Bảng 1.6 Các hợp chất tannin phân lập từ Cóc trắng đảo Kaohsiung Bay -17 Bảng 1.7 Các hợp chất phân lập từ lồi Cóc trắng Ấn Độ Trung Quốc- - -18 Bảng 1.8 Một số hợp chất phân lập từ lồi Cóc trắng Nam Định [70]- -20 Bảng 1.9 Phân tích định tính dịch chiết Cỏ chơng -24 Bảng 1.10 Thành phần hóa học loài thuộc chi Hếp (Scaevola) -25 Bảng 1.11 Một số hợp chất phân lập từ loài Hếp (Scaevola taccada) -29 Y Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR chiều chiều chất ST2 -59 Bảng 3.2 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất ST3 stigmasterol -62 Bảng 3.3 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất ST4 myricadiol 65 Bảng 3.4 Số liệu phổ 1H,13C NMR chất ST8 acid ursolic 70 Bảng 3.5 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất CĐ2 3-dihydroxy-2-methyl-5nonadecylbenzene -76 Bảng 3.6 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất CĐ3 1,3-dihydroxy-5nonadecylbenzene -80 Bảng 3.7 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất CĐ6 astragalin -84 Bảng 3.8 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất CĐ8 D-mannitol -89 Bảng 3.9 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất CĐ8a hexa-O-acetyl-D-mannitol 91 Bảng 3.10 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất CĐ9 α-D-glucopyranosyl-β-Dglucopyranoside 94 Bảng 3.11 Số liệu phổ 1H 13C NMR chất CĐ10 1,3,4,5-tetra-O-acetyl fructopyranose - 97 Bảng 3.12 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào Cỏ chông 98 Bảng 3.13 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất SL1 -102 Bảng 3.14 Số liệu phổ NMR chiều, chiều chất SL7 -111 Bảng 3.15 Số liệu phổ 1H, 13C NMR chất SL8 -113 Bảng 3.16 Số liệu phổ NMR chiều, chiều chất SL9 thymidine 117 Bảng 3.17 Số liệu phổ chiều, chiều NMR chất SL10 -121 Bảng 3.18 Tổng kết hợp chất phân lập từ ba nghiên cứu 124 mặn thuộc chi họ Error: Reference source not foundError: Reference source not found 1.1.2 Phân bố rừng ngập mặn Việt Nam Theo Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn, tính đến tháng 12 năm 2015 nuớc cịn khoảng 57,211 rừng ngập mặn diện tích rừng tự nhiên 19,559 rừng trồng 37,652 Error: Reference source not found Rừng ngập mặn nuớc ta phân thành khu vực Error: Reference source not found, bao gồm: Khu vực I: Ven biển Ðơng Bắc, từ mũi Ngọc (Móng Cái) đến mũi Ðồ Sơn Khu vực có đảo che chắn, sơng có độ dốc cao, dòng chảy mạnh, đem phù sa tận biển Dọc triền sơng bãi lầy (như sông Bắc Giang, sông Bắc Khê, sông Đồng Đăng) Độ mặn ổn định 26 – 27,5‰; mùa đông lạnh 15 - 19 o C, rừng ngập mặn phát triển, cao - 10 m Khu vực II: Ven biển đồng Bắc Bộ, từ mũi Đồ Sơn đến mũi Lạch Trường (Thanh Hóa) Vùng bồi tụ hệ thống sơng Hồng có nhiều phù sa, bãi bồi rộng; có nhiều sóng gió, khơng có đảo che chắn Độ mặn thay đổi nhiều, vào mùa mưa: – 0,5‰, vào mùa khô: 23 - 24‰ Hiện khu vực có 8000 rừng ngập mặn, chủ yếu rừng trồng để bảo vệ đê biển Khu vực III: Ven biển Trung Bộ, từ mũi Lạch Trường Đồ Sơn đến mũi Vũng Tàu Vùng bồi tụ hệ thống sông ngắn, dốc; bờ biển dốc, phù sa; vùng nhiều gió bão; có số lượng ít, ngập mặn cửa sơng, đầm phá có gỗ, bụi nhỏ Khu vực IV: Ven biển Nam Bộ, từ mũi Vũng Tàu đến mũi Nải (Hà Tiên), bồi tụ hệ thống sông Ðồng Nai, sông Cửu Long, giàu phù sa, bãi bồi rộng, gió bão; ngập mặn phát triển tốt, cao 20 - 30 m Vùng phân thành ba tiểu vùng ven biển đồng sơng Cửu Long, phía Tây Nam bán đảo Cà Mau bờ biển phía Tây bán đảo Cà Mau 1.1.3 Tình hình nghiên cứu thực vật ngập mặn giới Nghiên cứu đối tượng ngập mặn thực năm 1913, Bournot nhận dạng hợp chất lapachol từ Avicennia tomentosa Ấn Độ 12 Tây Phi Sau đó, vào năm 1959, Rao Bose phân lập triterpene với tên gọi genin-A từ vỏ Aegiceras corniculatum Ấn Độ Năm 1965, Taylor phân lập hợp chất limonoid có tên gọi gedunin từ gỗ Xylocarpus granatum châu Phi Từ năm 1970 đến năm 2000 có nhiều cơng trình nghiên cứu nhà khoa học Ấn Độ, Nhật Bản, Australia loài thực vật ngập mặn Bruguiera gymnorrhiza, Heritiera littoralis, Acanthus ilicifolius, Excoecaria agallocha vv Error: Reference source not foundError: Reference source not found Trong thập niên cuối kỷ XX, điểm bậc nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học hợp chất diterpenoid từ Giá (E agallocha) nhà khoa học Ấn Độ Nhật Bản Bốn hợp chất khung labdane beyerane thu từ lồi thể hoạt tính chống khối u in vitro mạnh Error: Reference source not found Từ năm 2000 đến có thêm nhiều cơng trình nghiên cứu nhà khoa học Trung Quốc, Đài Loan, Nhật Bản vài quốc gia khác loài thuộc chi Vẹt (Bruguiera) B gymnorrhiza, B cylindrica, B exaristata, B sexangula; chi Đước (Rhizophora) R mucronata, R stylosa, R apiculata; chi Dà (Ceriops) C tagal, C decandra, chi Cóc (Lumnitzera) L racemosa, chi Bần (Sonneratia) S alba, S ovata Error: Reference source not foundError: Reference source not found Hoạt tính sinh học số lồi ngập mặn Hiện số quốc gia giới tập trung nghiên cứu khai thác sàng lọc hợp chất có hoạt tính sinh học từ lồi thực vật ngập mặn Các loài thực vật ngập mặn với hoạt tính sinh học chống oxy hóa, gây độc tế bào, chống tăng sinh tế bào, diệt côn trùng, chống sốt rét, kháng nấm, tiêu chảy vv trở thành đối tượng thu hút tập trung nghiên cứu ngành dược phẩm (bảng 1.2) Error: Reference source not found Bảng 1.2 Ứng dụng dân gian thử nghiệm hoạt tính sinh học số loài thực vật ngập mặn giới Error: Reference source not found Thử nghiệm hoạt tính TLTK sinh học TT Tên loài Ứng dụng dân gian Acanthus ilicifolius Lá, vỏ - thuốc lợi tiểu, trị Chống viêm, kháng Error: tiểu đường, bệnh phong, virus, giảm đau, chống Reference bại liệt, da liễu, rắn cắn, ung thư source not viêm gan, đau dày, thấp foundErro 13 r: Reference source not foundErro r: Reference source not found Err or: Reference source not foundE rror: Reference source not found khớp Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Acrostichum aureum Lá - trị nhọt, vết thương Gây độc cho cá Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Aegiceras corniculatum Error: Reference source not foundE rror: Lá - trị đau tai; mật hoa, hạt vỏ chữa bệnh Kháng virus, gây độc Reference hen suyễn, tiểu đường, với cá source chứng phong thấp not found Error: Reference source not found Amoora cuculata Vỏ hạt dùng làm thuốc Gây độc tế bào, kháng Error: chữa bệnh lị khuẩn 14 Reference source not foundE rror: Reference source not found Error: Reference source not found Avicennia officinalis Error: Reference source not foundE rror: Reference Kháng virus, thuốc lợi source Hạt, rễ, vỏ làm thuốc chữa tiểu, trị phong, viêm not found nhọt, đậu mùa, phong, lợi tiểu bệnh loét, kích dục, viêm Error: gan, kháng khuẩn Reference source not foundE rror: Reference source not found Avicennia marina Lá - điều trị bệnh thủy Hoạt tính kháng khuẩn, Error: đậu, viêm loét, chứng gây độc tế bào Reference phong thấp source not foundE rror: Reference source not found Error: Reference source not found Error: Reference source not foundE rror: Reference source 15 not found Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Bruguiera gymnorrhiza Error: Reference source Vỏ - trị sốt rét; trái - trị Thử nghiệm hóc mơn not foundE đau mắt, độc tố cá tăng trưởng thực vật rror: Reference source not found Bruguiera parviflora Vỏ - trị táo bón, chữa bệnh Chống ung thư ung thư Error: Reference source not found Bruguiera sexangula Vỏ làm thuốc chữa ung thư; rễ - trị bỏng Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Error: Reference source not found 10 Cerbera manghas Vỏ làm thuốc xổ; trái làm thuốc gây mê, độc; hạt - trị bệnh thấp khớp Error: Reference source not found 11 Ceriops decandra Rễ, vỏ làm thuốc trị viêm Chống virus, chống Error: loét, viêm gan, cầm máu viêm loét, kháng khuẩn Reference source not foundErro r: Reference source not 16 found Erro r: Reference source not found 12 13 14 Cynometra iripa Hạt - dầu dùng chữa bệnh da Error: Reference source not found Derris trifoliate Vỏ dùng làm chất kích thích, khử trùng, độc tố cá, Gây độc với cá trị thấp khớp, nhuận tràng, trừ sâu, chống co thắt Error: Reference source not found Lá làm thuốc chữa bệnh động kinh, loét; rễ - chữa sưng bàn chân, bàn tay, bệnh phong, đau răng, đàn hồi tử cung, viêm kết mạc, viêm da, gây độc cho cá Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Error: Reference source not found Error: Reference source not found Excoecaria agallocha Thử nghiệm chống virus, chống oxy hóa, kháng khuẩn, cai nghiện, chống HIV Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found 17 Error: Reference source not found Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Heritiera fomes Vỏ chữa vết thương vết cắt; hạt làm thức ăn 16 Heritiera littoralis Error: Hạt trị tiêu chảy, kiết lị, Kháng nấm, chống trầm Reference độc tố cá cảm source not found 17 Hibiscus tiliaceus Lá trị sốt, làm dịu ho, kiết lỵ nhiễm trùng tai Error: Reference source not found 18 Kandelia candel Vỏ làm thuốc chữa bệnh đái tháo đường Error: Reference source not found 15 Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found 19 Lumnitzera racemosa Thân trị ngứa, herpes, hen Kháng virus suyễn, tiểu đường, rắn cắn Error: Reference source not found Error: Reference source not foundErro r: Reference source not found 18 20 21 22 23 24 25 26 Phoenix paludosa Rhizophora apiculata Rhizophora mucronata Salicornia brachiata Sonneratia alba Thespesia populnea Xylocarpus granatum Error: Reference source not foundE rror: Reference source not found Lá, vỏ làm thuốc trị rối loạn dày, tim mạch, thấp khớp, đau dây thần kinh Error: Reference source not foundE rror: Reference Vỏ - trị tiêu chảy, chống Thuốc kháng virus, diệt source nôn mửa, thương hàn, cỏ, chống nấm, chống not found viêm gan, khử trùng, thuốc nôn, kháng sinh, chống Error: trừ sâu HIV, chống oxy hóa Reference source not found Error: Reference source not found Thuốc kháng virus, Vỏ - trị bệnh đái tháo chống HIV, kiểm tra đường, viêm gan, chống hormone tăng trưởng viêm loét thực vật Error: Reference source not found Điều trị viêm gan Hoạt động kháng virus Error: Reference source not found Điều trị xuất huyết, sưng, Độc với ấu trùng muỗi bong gân Error: Reference source not found Error: Tất phận Kháng khuẩn, chống Reference trị bệnh ngồi da, viêm oxy hóa, gây độc tế source niệu đạo, bệnh tim bào not found Vỏ dùng tiệt trùng, kiết lị, Thuốc chống nấm, diệt Error: tiêu chảy, sốt rét, bệnh tả côn trùng, chống nôn, Reference 19 kháng khuẩn 27 Xylocarpus mekongensis Vỏ dùng tiệt trùng, kiết lị, bệnh tả, trị sốt, sốt rét Thuốc giảm đau source not foundE rror: Reference source not found Error: Reference source not found - Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm Thực vật ngập mặn có hoạt tính kháng khuẩn mạnh chống lại nhiều vi sinh vật gây bệnh Brugierol phân lập từ loài Vẹt (Bruguiera conjugate), fagaronine (2hydroxy-3,8,9-trimethoxy-5-methylbenzo(c)phenanthridine phân lập từ lồi Fagara zanthoxyloides có tính diệt khuẩn không gây đột biến Error: Reference source not found Benzoquinone embelin 5-O-methylembelin phân lập từ loài Aegiceras corniculatum có hoạt tính diệt sâu bọ ức chế phát triển nấm Pythium ultimum Error: Reference source not found Dịch chiết từ cành loài Giá (E agallocha) chứa độc tố gây độc cho da có hoạt tính chống lại vi sinh vật gây bệnh người, vi khuẩn gram (-), gram (+) Error: Reference source not foundError: Reference source not found Error: Reference source not found Các acid béo methyl ester phân lập từ lồi Giá (E.agallocha) có hoạt tính kháng sinh kháng nấm mạnh Error: Reference source not found Gedunin phân lập từ lồi Cedrela odorata có hoạt tính diệt trùng, sâu bọ, diệt muỗi Error: Reference source not found Các dịch chiết từ thân loài ngập mặn rừng ngập mặn Bhitarkanika (Ấn Độ) Aegiceras corniculatum, Aegialitis rotundifolia, Aglaia cucullata, Cynometra iripa Xylocarpus granatum có khả ức chế vi sinh vật gây bệnh Error: Reference source not found Dịch chiết lồi Finlaysonia obovata có hoạt tính kháng khuẩn mạnh chống lại vi khuẩn gây bệnh cá nước Error: Reference source not found Dịch chiết từ loài Melaleuca leucadendron chứa tannin, triterpenoid, glycoside, vv có hoạt tính kháng nấm Error: Reference source not found Dịch chiết từ lồi thuộc chi Mắm (Avicennia) có hoạt tính kháng khuẩn với lồi vi khuẩn Candida albicans, Mycobacterium vaccae, Mycobacterium aurum, Mycobacterium smegmatis, 20 Mycobacterium fortuitum Staphylococcus aureum Error: Reference source not foundError: Reference source not found - Hoạt tính kháng virus Dịch chiết hợp chất polisacharide phân lập từ loài thuộc họ Đước có hoạt tính kháng virus cúm người virus gây suy giảm miễn dịch khỉ Error: Reference source not found Dẫn xuất xanthopene phân lập từ lồi C inophyllum (Guttiferae) có hoạt tính kháng virus HIV dòng tế bào HIV-1 Error: Reference source not found Một vài polysaccharide từ loài B cylindrical, E agallocha, R apiculata, R mucronata, Sesuvium portulacastrum, Suaeda maritime Suaeda monica có hoạt tính virus gây suy giảm miễn dịch, dịch chiết từ lồi Pongamia pinnata có hoạt tính kháng virus cúm người Error: Reference source not found - Hoạt tính chống oxy hóa Một số dịch chiết hợp chất phân lập từ thực vật ngập mặn có hoạt tính chống oxy hóa mạnh dịch chiết từ loài Giá (E agallocha) Error: Reference source not foundError: Reference source not foundError: Reference source not foundError: Reference source not found; từ lá, thân, vỏ rễ loài Avicennia alba, A corniculatum, B gymnorrhiza, Ceriops decandra, R mucronata, Sonneratia apetala, A ilicifolius, Ipomoea pescaprae, Sesuvium portulacstrum Sweda maritima Error: Reference source not found; Heritiera fomes Error: Reference source not found; hợp chất phenolic, lignan dẫn xuất benzofuran phân lập từ loài Pandanus odoratissimus Error: Reference source not found Dịch chiết từ vỏ dẫn xuất flavonol phân lập từ loài R stylosa có hoạt tính ức chế hoạt động gốc tự Error: Reference source not found - Hoạt tính chống ung thư Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính chống ung thư gồm alkaloid, aldehyde, phenyl propanoid, flavonoid, glycoside, lignan, lipid, lipid khơng xà phịng hóa, nucleic acid, polysaccharide, protein, terpenoid thành phần khác Error: Reference source not found Trong số đó, hợp chất có hoạt tính gây độc tế bào khối u hiệu công bố nhiều alkaloid Error: Reference source not found, phenylpropanoid terpenoid Error: Reference source not found Các hợp chất 3α-Z-coumaroyltaraxerol, 3α-Z-feruloyltaraxerol từ loài Vẹt trụ (B cylindrica) 21 có hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư phổi (NCI-H-87) Error: Reference source not found Hợp chất gedunin phân lập từ vỏ X granatum Bangladesh có khả ức chế tăng trưởng dòng tế bào ung thư ruột Ca2 Error: Reference source not found Các dẫn xuất hidroquinone phân lập từ thân cành Aegiceras corniculatum có hoạt tính gây độc tế bào dịng tế bào ung thư thận Error: Reference source not found Các hợp chất xanthone từ vỏ, rễ Calophyllum inophyllum hợp chất dẫn đường tiềm cho loại thuốc chống ung thư; dịch chiết hợp chất diterpene phân lập từ lồi E agallocha có hoạt tính kháng u tốt Error: Reference source not foundError: Reference source not found Các phenolic glycoside phân lập từ loài E agallocha quercetin-3-O-(3O-methyl-α-L-rhamnopyranoside) quercetin-3-O-[α-L-arabinofuranosyl-3-O-(3O-methyl-α-L-rhamnopyranoside] có hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư tuyến tụy (PANC1) ung thư tuyến tuyền liệt (DU145) Error: Reference source not foundError: Reference source not found Thành phần hóa học số lồi ngập mặn Trong điều kiện địa lý đặc thù, môi trường đất, cát, yếm khí vùng ven biển ngập mặn, lồi thực vật ngập mặn có q trình sinh tổng hợp khác biệt, tạo nhiều hợp chất thứ cấp có cấu trúc đa dạng, có hoạt tính sinh học cao alkaloid, terpenoid, flavonoid, lignan, hợp chất chứa lưu huỳnh, phenolic glycoside, steroid, acid béo, carbonhydrate vv Theo báo cáo có 340 chất phân lập có khoảng 200 chất phân lập từ ngập mặn thực thụ gồm alcohol béo, acid béo, alkaloid, carotenoid, aminoacid, hydrocarbon, lipid, pheromone, phorbol ester, phenolic steroid, triterpene, tannin nhiều hợp chất có cấu trúc lạ Error: Reference source not found - Alkaloid Các alkaloid phân lập từ loài ngập mặn ven biển có cấu trúc đa dạng, số hợp chất cịn có chứa lưu huỳnh dạng dithiolane Từ lồi thuộc chi Vẹt (Bruguiera) nhà khoa học Úc phân lập hợp chất ankaloid brugine (1) Error: Reference source not found, tropine (2), tropine acetate (3), tropine benzoate (4), tropine isobutyrate (5), tropine isovalerate (6), tropine n-butyrate (7), tropine propionate (8) Error: Reference source not found 22 - Terpenoid Một số lượng lớn hợp chất triterpenoid khung D-friedooleanane, lupane, oleanane, ursane, dammarane diterpenoid khung dolabrane, kaurane, aurane, pimarane vv phân lập từ loài ngập mặn Bảng 1.3 Hợp chất terpenoid khung D-friedooleanane chi Vẹt (Bruguiera) chi Đước (Rhizophora) Ký hiệu Tên gọi Loài 3α-taraxerol B cylindrica TLTK Error: 10 3α-E-caffeoyltaraxerol B cylindrica Reference Error: 11 3α-E-coumaroyltaraxerol B cylindrica Reference Error: 12 3α-E-feruloyltaraxerol B cylindrica Reference Error: 13 3α-Z-coumaroyltaraxerol B cylindrica Reference Error: 14 3α-Z-feruloyltaraxerol B cylindrica Reference Error: 15 3β-taraxerol B cylindrica Reference Error: 16 3β-E-feruloyltaraxerol B cylindrica Reference Error: 17 3β-Z-feruloyltaraxerol B cylindrica Reference Error: 18 taraxerone B sexangula Reference Error: 19 3β-E-cafferoyltaraxerol R mucronata Reference Error: 20 3β-E-p-coumaroyltaraxerol R mucronata Reference Error: 21 3β-Z-caffeoyltaraxerol R mucronata Reference Error: 22 3β-Z-p-coumaroyltaraxerol R stylosa Reference Error: 23 3β-O-E-coumaroyltaraxerol R stylosa Reference Error: 24 3β-O-Z-coumaroyltaraxerol R stylosa Reference Error: 25 3β-taraxerol acetate R stylosa Reference Error: 26 3β-taraxerol formate R stylosa Reference Error: Reference 23 Bảng 1.4 Hợp chất terpenoid khung lupane phân lập từ lồi Dà vơi (Ceriops tagal) Ký hiệu Tên gọi Loài 27 3α-O-trans-feruloylbetulinic acid C tagal 28 3α-O-trans-coumaroylbetulinic acid C tagal 29 3β-O-cis-feruloylbetulin C tagal 30 28-hydroxylup-20(29)-en-3-on C tagal 31 3-epi-betulinic acid C tagal 32 3β-O-cis-coumaroylbetulin C tagal 33 3β-O-cis-coumaroylbetulinic acid C tagal 34 3β-O-trans-feruloylbetulin C tagal 35 3β-O-trans-coumaroylbetulinic acid C tagal 36 3β-O-trans-coumaroylbetulin C tagal 37 3-epi-betulin C tagal 38 betulin C tagal 39 lupeol C tagal 24 TLTK Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen Error: Referen ce Error: Referen Từ loài B gymnorrhiza phân lập hợp chất terpenoid khung dammarane bruguierin A (40), bruguierin B (41), bruguierin C (42) Error: Reference source not found Ngồi cịn có hợp chất terpenoid khung ent-kaurane, labdane, entisopimarane, oleanane, ursane phân lập từ loài thực vật ngập mặn loài Rhizophora stylosa, Rhizophora mucronata Error: Reference source not foundError: Reference source not foundError: Reference source not found, loài Giá (E agallocha) Error: Reference source not foundError: Reference source not foundError: Reference source not found - Flavonoid Từ lồi Đước vịi, phân lập nhiều hợp chất flavonoid có hoạt tính qt gốc tự DPPH mạnh, đặc biệt chất (50) có IC50 = 4,3 µg/ml (bảng 1.5) Error: Reference source not found Bảng 1.5 Các hợp chất flavonoid phân lập từ loài Đước vịi (R stylosa) Ký hiệu Tên gọi Tên lồi 43 (-)-epicatechin R stylosa 44 3-O-acetyl (-)-epicatechin R stylosa 45 3,7-O-diacetyl (-)-epicatechin R stylosa 25 TLT K Error: Refere Error: Refere Error: Refere 46 3,3’,4’,5,7-O-penta-acetyl (-)-epicatechin R stylosa 47 (+)-afzelechin R stylosa 48 (+)-catechin R stylosa 49 cinchonain Ib R stylosa 50 proanthocyanidin B2 R stylosa Error: Refere Error: Refere nce Error: Refere Error: Refere Error: Refere - Naphthoquinone Từ loài ngập mặn Avicennia marina, Avicennia alba, Avicennia officinalis phân lập hợp chất naphthoquinone gồm avicennone A - G (51 - 57), avicequinone A (58), C (59), stenocarpoquinone B (60) hỗn hợp avicenol A (61), C (62) Error: Reference source not found 26 ... trúc hóa học hoạt tính sinh học lý thú từ lồi ngập mặn ven biển người dân sử dụng làm thuốc chưa nghiên cứu nhiều mặt hóa học hoạt tính sinh học, chúng tơi lựa chọn loài vùng ngập mặn loài Cỏ... trung nghiên cứu khai thác sàng lọc hợp chất có hoạt tính sinh học từ loài thực vật ngập mặn Các loài thực vật ngập mặn với hoạt tính sinh học chống oxy hóa, gây độc tế bào, chống tăng sinh tế... đóng góp vào việc nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi ngập mặn ven biển, lĩnh vực chưa có nhiều cơng trình nghiên cứu Việt Nam Các kết đề tài góp phần giải thích chất hóa học vị