Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 35 doc

... phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp cận thêm một lĩnh vực khác của công nghệ sinh học thông ... truyền hay kỹ thuật gen) là một bộ phận quan trọng và là công nghệ chìa khóa (key technology) của lĩnh vực công nghệ sinh học. Công nghệ DNA tái tổ hợp được ra...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... con người. Công nghệ này có ứng dụng rộng rãi trong y học, dược học, nông nghiệp và nhiều ngành công nghiệp khác. Công nghệ sinh học (biotechnology). Theo nghĩa rộng là các quá trình công nghiệp ... thực vật (công nghệ sinh học truyền thống). Theo nghĩa phổ biến hiện nay đó là những quá trình sản xuất sử dụng các giống sinh vật mới, được tạo ra bởi công nghệ DNA tái...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... chiết DNA từ những sinh vật khác nhau; 2) Cắt và nối DNA ở những điểm đặc hiệu để tạo ra DNA tái tổ hợp (DNA mang các gen có nguồn gốc khác nhau), ví dụ: DNA plasmid có mang gen của người; 3) ... DNA (DNA ligase). Enzyme dùng để nối các phân tử DNA với nhau bằng cách tạo ra mối liên kết phosphodiester giữa nhóm 5’-phosphate và nhóm 3 -hydroxyl trong quá trình tái bản ho...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... phosphoryl hóa với một trong những hydroxyl của pentose. Phân tử đóng vai trò cấu trúc cơ sở của DNA và RNA, gồm ba phần: đường pentose (ribose trong RNA, deoxyribose trong DNA) , nitrogen base ... protein. Nấm men Saccharomyces cerevisiae. Là một vi sinh vật nhân thật được sử dụng nhiều trong công nghệ DNA tái t hp. Genome ca nm men S. cerevisiae khong 1,35ì10 7 base...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... protein trên các đoạn DNA, dựa vào độ di chuyển chậm của chúng so với DNA không bị protein bám trong các thí nghiệm điện di trên gel. Trình tự dẫn đầu (leader sequence). Một trong ba phần chủ yếu ... khuôn mẫu DNA sợi đơn với primer (mồi) để tổng hợp nên một sợi DNA bổ sung bằng cách sử dụng các dNTP có trong môi trường để kéo dài primer nhờ sự xúc tác của enzyme Taq DNA...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... đó DNA không bị cắt, những DNA của phage không có gắn gốc methyl sẽ bị cắt bởi RE. Trong kỹ thuật gen, enzyme methyl hóa được gọi là methylase enzyme. Methylase được dùng để bảo vệ đoạn DNA ... tiên trong vi khuẩn (first identified order in bacterium). Giá trị của enzyme hạn chế là ở tính đặc hiệu của chúng. Các enzyme này cắt DNA ở các vị trí nhận biết riêng biệt bao gồm từ 4...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... sâu trong một thời gian ngắn để dùng thì phải đặt trên đá tuyết (ice bath). II. Các enzyme trùng hợp 1. DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase được dùng để tổng hợp DNA ... ứng cắt DNA bằng RE - Ứng dụng chính + Đánh dấu đoạn DNA để làm mẫu dò bằng dịch chuyển điểm đứt. + Khởi đầu cho sự tổng hợp sợi thứ hai trong tạo dòng cDNA. + Xác định...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... của hệ điện di trong một điện trường có điện thế và cường độ thích hợp. Kỹ thuật này đơn giản và thực hiện nhanh. Hơn nữa, vị trí của DNA trong gel được xác định trực tiếp: các băng DNA trong ... số điện di DNA bằng agarose gel Hình 2.3 minh họa sự dịch chuyển của tập hợp các đoạn DNA trong hai mẫu ở ba nồng độ khác nhau của agarose, tất cả chúng ở trong một k...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... thế gel có thể được bảo quản trong một thời gian dài trước khi sử dụng. 2.2. Điện di 2D-PAGE Ngoài điện di SDS, có thể điện di các protein tùy theo điểm đẳng điện (isoelectric point, IEP) ... lượng điện di. 2.1.4. Hệ thống đệm Hầu hết điện di phân tách protein được thực hiện với một hệ thống đệm không liên tục tăng cường một cách ý nghĩa hình dạng của băng trong...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... rộng trong công nghệ sinh học hiện đại. Theo nguyên tắc trên, đã có nhiều bổ sung và cải tiến để dùng PCR cho nhiều mục đích khác nhau. Ở đây chỉ giới thiệu một số ứng dụng chính: - Trong ... sợi DNA và khuếch đại trong PCR (Hình 3.11). 3. Ứng dụng trong di truyền PCR giúp đắc lực cho việc lập bản đồ gen (gene mapping) của sinh vật. Phương pháp này có tên là phân tích...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... (target) có trong mẫu. Trường hợp genomic DNA, ta cần thủy phân một lượng tương đối lớn DNA (2-10 m g). Nhưng nếu mẫu DNA được tạo dòng trong các plasmid hoặc phage thì chỉ cần một lượng DNA ít ... băng DNA được lai với chỉ thị kích thước chuẩn của DNA (DNA size-marker). DNA của bacteriophage l được phân cắt bằng HindIII hoặc 1-kb ladder DNA là các chỉ thị kích thước c...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... phân tích trình tự DNA bằng khối phổ, điện di mao quản hoặc lai với các đoạn oligonucleotide được tổng hợp nhân tạo. Những tiến bộ nhanh chóng trong lĩnh vực kính hiển vi điện tử cho phép quan ... polyacrylamide gel cho phép phân biệt hai sợi đơn DNA hơn kém nhau một nucleotide. Các vạch DNA quan sát được nhờ có gắn phóng xạ 32 P vào mồi hoặc vào một trong bốn loại loại nuc...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... các kích thước của cDNA sợi đôi được tạo dòng trong bacteriophage  để xây dựng thư viện cDNA (cDNA library). Tuy nhiên, việc đưa các đầu bằng vào vector sẽ gây khó khăn trong việc lấy chúng ... của cDNA immunoglobulin, nhưng thành công của nhiều thí nghiệm dùng reverse transcriptase để tổng hợp sợi cDNA thứ hai đã cho thấy việc sử dụng cả hai enzyme đều có thể cho kết quả tốt. DNA...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... Tổng hợp cDNA sợi đôi bằng phương pháp primer-adapter Đoạn cDNA được tổng hợp theo phương pháp trên khi gắn vào trong các vector biểu hiện như gt20 và gt22 chỉ có 1/6 cơ hội biểu hiện trong vi ... do: chỉ một nửa các phân tử cDNA được đưa vào trong vector theo hướng chính xác đối với promoter lacZ, và chỉ một trong ba phân tử được gắn ở hướng phải sẽ ở trong khung đọc chính xá...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... các thuốc nhuộm này, thì đánh dấu sự trao đổi cht vi 100 àCi ca [ 35 S]Met hoc [ 35 S]Cys trờn 1 mL dịch nuôi cấy trong 5 phút. Điện di SDS- polyacrylamide gel và thực hiện phóng xạ tự ghi có thể ... nguyên-kháng thể, được dùng chủ yếu trong miễn dịch học để phát hiện sự có mặt của kháng thể hoặc kháng nguyên trong mẫu. Tương tự kỹ thuật Western blot, trong ELISA người thường...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20