Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 34 pot

... phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp cận thêm một lĩnh vực khác của công nghệ sinh học thông ... truyền hay kỹ thuật gen) là một bộ phận quan trọng và là công nghệ chìa khóa (key technology) của lĩnh vực công nghệ sinh học. Công nghệ DNA tái tổ hợp được ra...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... con người. Công nghệ này có ứng dụng rộng rãi trong y học, dược học, nông nghiệp và nhiều ngành công nghiệp khác. Công nghệ sinh học (biotechnology). Theo nghĩa rộng là các quá trình công nghiệp ... thực vật (công nghệ sinh học truyền thống). Theo nghĩa phổ biến hiện nay đó là những quá trình sản xuất sử dụng các giống sinh vật mới, được tạo ra bởi công nghệ DNA tái...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... chiết DNA từ những sinh vật khác nhau; 2) Cắt và nối DNA ở những điểm đặc hiệu để tạo ra DNA tái tổ hợp (DNA mang các gen có nguồn gốc khác nhau), ví dụ: DNA plasmid có mang gen của người; 3) ... DNA (DNA ligase). Enzyme dùng để nối các phân tử DNA với nhau bằng cách tạo ra mối liên kết phosphodiester giữa nhóm 5’-phosphate và nhóm 3 -hydroxyl trong quá trình tái bản ho...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... phosphoryl hóa với một trong những hydroxyl của pentose. Phân tử đóng vai trò cấu trúc cơ sở của DNA và RNA, gồm ba phần: đường pentose (ribose trong RNA, deoxyribose trong DNA) , nitrogen base ... protein. Nấm men Saccharomyces cerevisiae. Là một vi sinh vật nhân thật được sử dụng nhiều trong công nghệ DNA tái t hp. Genome ca nm men S. cerevisiae khong 1,35ì10 7 base...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... protein trên các đoạn DNA, dựa vào độ di chuyển chậm của chúng so với DNA không bị protein bám trong các thí nghiệm điện di trên gel. Trình tự dẫn đầu (leader sequence). Một trong ba phần chủ yếu ... khuôn mẫu DNA sợi đơn với primer (mồi) để tổng hợp nên một sợi DNA bổ sung bằng cách sử dụng các dNTP có trong môi trường để kéo dài primer nhờ sự xúc tác của enzyme Taq DNA...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... đó DNA không bị cắt, những DNA của phage không có gắn gốc methyl sẽ bị cắt bởi RE. Trong kỹ thuật gen, enzyme methyl hóa được gọi là methylase enzyme. Methylase được dùng để bảo vệ đoạn DNA ... tiên trong vi khuẩn (first identified order in bacterium). Giá trị của enzyme hạn chế là ở tính đặc hiệu của chúng. Các enzyme này cắt DNA ở các vị trí nhận biết riêng biệt bao gồm từ 4...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... sâu trong một thời gian ngắn để dùng thì phải đặt trên đá tuyết (ice bath). II. Các enzyme trùng hợp 1. DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase được dùng để tổng hợp DNA ... ứng cắt DNA bằng RE - Ứng dụng chính + Đánh dấu đoạn DNA để làm mẫu dò bằng dịch chuyển điểm đứt. + Khởi đầu cho sự tổng hợp sợi thứ hai trong tạo dòng cDNA. + Xác định...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... của DNA khuôn mẫu và ion Mg 2+ , thì Tth pol lại xúc tác phản ứng khuếch đại DNA. Enzyme này cho phép khuếch đại khuôn mẫu là RNA thông qua sự hình thành cDNA. 2. RNA polymerase (DNA- dependent ... hợp DNA theo chiều 5’ 3’. Cơ chất của nó là RNA hay DNA (sợi đơn hoặc sợi đôi): - Hoạt tính RNase H. Bao gồm hai hoạt tính exoribonuclease 5’ 3’ và 3’5’ phân hủy các DNA hoặ...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... Phân tích phức hợp protein :DNA (DNase footprinting). + Loại bỏ DNA trong các phân đoạn RNA hay protein. 2. Nuclease S1 (Aspergillus oryzae) Enzyme nuclease S1 cắt DNA sợi đơn hoặc RNA để tạo ... của DNA để phân tích trình tự bằng phương pháp Maxam và Gilbert ( 197 7), dùng làm mẫu dò trong các kỹ thuật lai phân tử (xem chương 5). + Phosphoryl hóa các đoạn nối (linker) và...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... của hệ điện di trong một điện trường có điện thế và cường độ thích hợp. Kỹ thuật này đơn giản và thực hiện nhanh. Hơn nữa, vị trí của DNA trong gel được xác định trực tiếp: các băng DNA trong ... số điện di DNA bằng agarose gel Hình 2.3 minh họa sự dịch chuyển của tập hợp các đoạn DNA trong hai mẫu ở ba nồng độ khác nhau của agarose, tất cả chúng ở trong một k...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... khe nhỏ được cắt trong gel ngay phía trước băng DNA quan tâm và đặt trong khe một mẫu giấy loại NA-45. Gel sau đó được điện di trở lại và băng DNA quan tâm sẽ dịch chuyển vào trong mẫu giấy. ... nhiệt độ Tập tính điện di của DNA trong agarose gel không bị ảnh hưởng rõ rệt bởi thành phần base của DNA hoặc nhiệt độ mà ở đó gel được chạy. Trong agarose gel, tính linh độ...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... 2.3), kích thước và điện tích của DNA. Bảng 2.3. Hiệu quả của sự phân tách DNA trong polyacrylamide gel không biến tính Hình 2.5. Sơ đồ minh họa các bước trong quá trình điện di agarose ... protein. 1. Điện di nucleic acid Điện di polyacrylamide gel được dùng để phân tách và thu hồi các đoạn DNA có chiều dài từ 5-2.000 bp. Nồng độ polyacrylamide gel được sử dụng...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... Tần số điện biến nạp với DNA siêu xoắn và DNA mạch vòng là giống nhau. Do đó, không cần thiết phải dùng vector được tinh sạch cao trong các phản ứng gắn. - Hiệu suất biến nạp phân tử cho DNA ... kinh điển để biến nạp DNA plasmid vào tế bào E. coli. Các tế bào được ủ trong dung dịch CaCl 2 để trở thành tế bào khả biến giúp cho chúng dễ tiếp nhận DNA plasmid. DNA plasmid...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... trọng là chọn vector và DNA ngoại lai như thế nào để kích thước của phage tái tổ hợp nằm trong giới hạn cho phép. Hình 4.9. Các bước tạo dòng trong bacteriophage λ . DNA nguồn được cắt bằng ... thiết để tạo dòng. Các bước tạo dòng trong phage λ được tóm tắt như sau (Hình 4.9 và 4.10): - Tinh sạch DNA vector bằng ly tâm theo gradient tốc độ hoặc điện di gel sau khi đã đ...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... nhanh để thu tiểu thể, tái huyền phù chúng trong đệm 1 SDS, biến tính ở 100 o C trong 3 phút, ly tâm 12.000 g trong 1 phút ở nhiệt độ phòng. Tiến hành điện di SDS trên polyacrylamide gel 6%. ... của eukaryote trong vi khuẩn là chọn một vector biểu hiện mang promoter mạnh (strong promoter) của prokaryote. Promoter là trình tự DNA hướng dẫn RNA polymerase liên kết với DNA và...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20