5. Ý nghĩa khoa học thực tiễn của luận án
3.1.3.8.Ảnh hưởng của dung môi hữu cơ và chất tẩy rửa đến hoạt tính
Ion kim loại và một số thuốc thử (mM)
Hoạt tính tƣơng đối (%)
2mM 4mM 6mM 8mM 10mM K+ 91,5 3,0 93,8 2,6 92,8 3,1 93,7 3,3 91,5 3,0 Na+ 86,4 5,8 85,5 1,8 80,8 3,5 94,2 2,8 97,4 3,0 Ag+ 71,8 2,0 0 0 0 0 0 0 0 0 Fe2+ 69,9 2,8 76,9 3,2 91,8 2,4 93,3 2,6 101,3 2,5 Ni2+ 168,5 1,6 147,3 1,4 108,5 3,1 105,3 3,1 104,3 2,6 Mn2+ 65,1 3,2 84,4 2,4 95,5 2,6 94,8 3,2 97,0 3,2 Ca2+ 102,3 2,3 100,4 2,9 98,8 2,0 91,7 2,4 86,3 2,8 Zn2+ 105,9 2,8 97,4 2,5 99,2 2,9 98,8 1,8 98,7 1,2 Ba2+ 97,6 4,8 115,4 1,4 93,4 3,5 91,9 3,2 90,6 2,1 Cu2+ 52,8 2,2 0 0 0 0 0 0 0 0 Mg2+ 78,6 2,8 73,9 3,4 78,5 2,3 80,1 2,5 78,7 3,1 EDTA 61,3 1,1 64,6 2,4 65,8 3,0 71,0 2,2 67,1 3,1 2-Mercaptoethanol 114,6 2,6 108,1 3,2 103,1 2,3 100,2 2,5 93,7 1,2 Đối chứng 100 6,9
3.1.3.8. Ảnh hưởng của dung môi hữu cơ và chất tẩy rửa đến hoạt tính endoglucanase endoglucanase
Ảnh hưởng của dung môi hữu cơ đến hoạt động của cellulase từ chủng
Peniophora sp. NDVN01 đã được phân tích. Việc bổ sung dung môi methanol (1% v/v), ethanol (1-5%), isopropanol (1-10%), n-butanol (1-5%) và acetone (1- 15%) tăng cường hoạt động của enzyme, nhưng khi ở nồng độ cao dung môi methanol (5-20%), ethanol (10-20%), isopropanol (15-20%) và n-butanol (10- 20%) ức chế hoạt động của enzyme. Trong đó, dung môi acetone ở nồng độ 15% (v/v) làm tăng hoạt tính cellulase mạnh nhất với hoạt tính tương đối đạt 121% so với đối chứng không bổ sung dung môi. Dung môi n-butanol với nồng
độ từ 10-20% (v/v) ức chế mạnh hoạt tính enzyme, hoạt tính tương đối còn lại 39-41% so với đối chứng (hình 3.15A).
A B
Hình 3.15. Biểu đồ so sánh ảnh hƣởng của dung môi hữu cơ (A) và chất tẩy rửa (B) đến hoạt tính endoglucanase của chủng Peniophora sp. NDVN01
Met: Methanol; Eth: Ethanol; Ipro: Isopropanol; n-But: n-Butanol; Ace: Acetone; T20: Tween 20; T80: Tween 80; TX-100: Triton X-100; TX-114: Triton
X-114; ĐC: Đối chứng
Chất tẩy rửa làm tăng sức căng bề mặt của dung dịch do đó ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme. Khi bổ sung 1-20 (v/v) của các chất tẩy rửa Tween 20, Tween 80 và Triton X-100 làm tăng cường các hoạt động của endoglucanase từ
Peniophora sp. NDVN01 với hoạt tính tương đối đạt 112-155%. Bổ sung các Triton X-114 tại nồng độ 1% (v/v) tăng cường mạnh nhất hoạt động của enzyme, nhưng ở nồng độ từ 10-20% Trixton X-114 ức chế hoạt động enzyme. Trong số các chất tẩy rửa khảo sát, SDS ức chế hoàn toàn hoạt tính của enzyme, điều này có thể liên quan đến việc anion hóa phân tử enzyme khi các phân tử SDS bao quanh phân tử enzyme (hình 3.15B). Năm 2008, Jianmin và đtg khi nghiên cứu ảnh hưởng của chất tẩy rửa đến hoạt tính của endo-β-1,4-glucanase từ A. terreus
đã xác định được enzyme hoàn toàn bị ức chế bởi việc bổ sung Tween 100 và SDS ở nồng độ 1% (w/v) [91]. chất tẩy rửa SDS ở nồng độ 10 mM cũng làm giảm hoạt động của endoglucanase từ chủng A. terreus với hoạt tính tương đối chỉ còn 13,7% [123]. Như vậy, endoglucanase từ chủng Peniophora sp. NDVN01 là một enzyme khá bền với chất tẩy rửa.