a) Phương pháp thử hoạt tính protease
Nguyên tắc: Dùng “casein” làm cơ chất, xác định khả năng phân giải protein
của protease trên cơ sở đo vòng phân giải casein trên đĩa thạch [3].
Tiến hành: Pha 100ml dung dịch chứa 1% casein và 2% thạch trong cốc có
mỏ 200ml, thêm 10 giọt xanh methylen, khuấy đều và đun cho đồng nhất. Đổ 16ml dung dịch trên vào các đĩa petri. Khi thạch đơng thì đục các giếng thạch có đường kính 0,6cm. Nhỏ 0,05ml dịch thử vào giếng thạch. Ủ trong tủ ấm 370C/24 giờ và đọc kết quả [4].
b) Phương pháp thử hoạt tính amylase
Ngun tắc: amylase có khả năng phân giải tinh bột thành các oligosaccharid
và đường đơn không bắt màu với thuốc thử Lugol (KI + I2). Dùng tinh bột làm cơ chất xác định sự tồn tại và sơ bộ thử hoạt tính amylase có trong dịch chiết enzym [3].
Tiến hành: Pha 100ml dung dịch chứa 1% tinh bột và 2% thạch trong cốc có
mỏ 200ml, khuấy đều và đun cho đồng nhất. Đổ 16ml dung dịch trên vào các đĩa petri. Khi thạch đơng thì đục các giếng thạch có đường kính 0,6cm. Nhỏ 0,05ml dịch thử vào giếng thạch. Ủ trong tủ ấm 370C/24 giờ. Dùng Lugol nhỏ lên bề mặt thạch để quan sát vòng phân giải tinh bột [3].
c) Phương pháp thử hoạt tính cellulase
Nguyên tắc: Cellulase có khả năng phân giải CMC thành các oligosaccharid
không bắt màu với thuốc thử Lugol (KI + I2). Dùng CMC làm cơ chất xác định sự tồn tại và sơ bộ thử hoạt tính cellulase có trong dịch chiết enzym [3], [9].
Tiến hành: Pha 100ml dung dịch chứa 0,5% CMC và 2% thạch trong cốc có
16ml dung dịch trên vào các đĩa petri. Khi thạch đơng thì đục các giếng thạch có đường kính 0,6cm. Nhỏ 0,05ml dịch thử vào giếng thạch, ủ trong tủ ấm 370
C/24 giờ. Dùng Lugol nhỏ lên bề mặt thạch để quan sát vòng phân giải CMC [3].