30 độ C 37 độ C
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận
Kết luận
1. Đã khảo sát được thời gian lên men B. subtilis natto để tạo điều kiện cho việc chiết tách protease ngoại bào. Kết quả cho thấy tại thời điểm 24h hoạt độ protease từ môi trường nuôi cấy khá cao; hoạt độ amylase và cellulase thì thấp hơn so với thời điểm 48h, 72h.
2. Đã khảo sát được ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy (300
C và 370C) tới khả năng tạo enzym ngoại bào của B. subtilis natto. Kết quả cho thấy, khi nuôi cấy vi sinh vật ở nhiệt độ 370C, vi sinh vật sinh tổng hợp protease có hoạt tính cao tương đương với ở 300
C, hơn nữa ở nhiệt độ này còn hạn chế được sự tổng hợp amylase và cellulase của B. subtilis natto so với lên men ở 300C.
Đã khảo sát được ảnh hưởng của tốc độ lắc tới khả năng sinh enzym ngoại bào của B. subtilis natto. Khi lắc ở tốc độ lắc 150v/p, hoạt độ protease cao hơn so
với lắc ở 100v/p. Đồng thời ở tốc độ lắc này, vi sinh vật sinh tổng hợp ít amylase hơn.
Enzym thu được từ môi trường lên men vi khuẩn (370
C, 150v/p, 24h) sau khi chiết tách bằng amoni sulfat 60% bão hịa có khả năng phân giải fibrin tương đương với chế phẩm Nattospes, có hoạt độ enzym khoảng 300FU/10ml.
Đề xuất
Qua q trình nghiên cứu, khóa luận đưa ra một số đề xuất:
1. Tiếp tục nghiên cứu một số thơng số khác trong q trình lên men ảnh hưởng tới khả năng sinh enzym ngoại bào của B. subtilis natto như: pH môi trường, thành phần dinh dưỡng, tuổi giống,… từ đó đưa ra mơi trường nuôi cấy tổng hợp tối ưu giúp B. subtilis natto tăng tiết enzym đích protease, đồng thời hạn chế được các
enzym amylase, cellulase để thuận lợi cho quá trình tinh chế sau này.
2. Tiếp tục nghiên cứu các phương pháp tách chiết, tinh chế protease ngoại bào của B. subtilis natto.