Định l-ợng hợp chất polyphenols tổng số theo ph-ơng phâp Folin Ciocalteau [69]

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đặc tính hoá sinh của một số phân đoạn dịch chiết từ cây thảo quyết minh (Cassia tora (Trang 37)

Folin - Ciocalteau [69]

Định 1- ợng polyphenols tổng số của dịch chiết ban đầu theo ph- ơng phâp Folin-Ciocalteau. Ph- ơng phâp năy đ- ợc thực hiện dựa trín nguyín tắc câc hợp chất polyphenols trong dung dịch phản ứng với thuốc thử Folin - Ciocalteau cho sản phẩm mău xanh lam, đo độ hấp thụ ở b-ớc sóng 765 nm, lấy acid gallic lăm chất chuẩn.

- Cđn 10 mg mỗi loại cao vă hòa loêng trong 1 ml ethanol 90%

- Dung dịch Na2C03: 200g Na2C03 + 800ml II20 đun sôi, thím một văi tinh thể Na2C03, sau 24h đem lọc vă dẫn n- ớc cất tới 1000ml.

Tiến hănh:

a) Cho văo mỗi cóng định l-ợng 20ị~il mẫu thử + l,58ml H20 + 1 OOjLil thuốc thử Folin - Ciocalteau sau 30 giđy đến 8 phút cho thím 300ịLil Na2C03. Để hỗn hợp dung dịch trong 2h ở 20°c rồi xâc định ở b- ớc sóng 765nm. Tiến hănh định 1- ợng acid gallic để dựng đ- ờng chuẩn. Xđy dựng đ- ờng chuẩn với acid gallic nh- sau:

b) Cđn 0,5g (500mg) acid gallic + 10ml cồn tinh khiết 90% hoă tan hết, thím 90ml n-ớc cất, lắc đều sẽ đ-ợc dung dịch chuẩn gốc có nồng độ 5mg acid

c) Chuẩn bị cóng (ống nghiệm) vă cho văo đó số 1- ợng dung dịch gốc chuẩn lă 0, 1, 2, 3, 5 vă 10ml. Sau đó dẫn n-ớc cất đến 100ml sẽ thu đ-ợc câc nồngđộ ở câc ống nghiệm nh- sau: 0, 50, 100, 150, 250 vă 500 mg acid chuẩn gallic/1. Tiếp theo tiến hănh so mău theo h- ớng dẫn ở mục a) cùng với mẫu thử (mẫu thí nghiệm) ở đđy mẫu chuẩn lă 2ịi\ dung dịch chuẩn acid gallic.

Hình 2.1. Kết quả xđy dựng đồ thị chuẩn acid gallic: (kỉm theo bảng) S T T Gallic acid (mg/1) OD765 nin 1 0 0,009 2 50 0,062 3 100 0,119 4 150 0,168 5 250 0,265 6 500 0,519

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đặc tính hoá sinh của một số phân đoạn dịch chiết từ cây thảo quyết minh (Cassia tora (Trang 37)

Tải bản đầy đủ (DOCX)

(70 trang)
w