2.3.2.1. Lưu giữ hai loài tảo Isochrysis galbana và Thalassiosira sp.
Tảo giống được lưu giữ trên môi trường lỏng đặt ở phòng thí nghiệm. Ưu điểm của phương pháp này là dễ quan sát mẫu, thuận lợi cho việc nhân nhanh sinh khối trong một thời gian ngắn, dễ tiến hành trong điều kiện phòng thí nghiệm của Việt Nam. Tuy nhiên, phương pháp này còn một số hạn chế như thời gian lưu giữ mẫu ngắn
(từ 3 - 4 tuần), tuỳ thuộc vào chu kỳ sinh trưởng của từng chủng, chiếm diện tích trên giàn nuôi và khả năng lây nhiễm giữa các mẫu là rất lớn do phải cấy chuyển nhiều lần cũng như là tốn sức lực của người quản lý chủng giống. Các mẫu vi tảo sẽ được nuôi trên môi trường lỏng phù hợp đến khi tế bào vi tảo ở vào pha sinh trưởng theo hàm số mũ (ở pha logarit) sẽ tiến hành lấy mẫu và lưu giữ giống.
Hút 5 mL môi trường lỏng vào từng ống nghiệm, sau đó bổ sung lượng mẫu với tỉ lệ là 70: 30 theo thể tích (v/v). Tất cả các công đoạn trên đều thao tác trong điều kiện vô trùng, tránh bị nhiễm khuẩn. Các mẫu vi tảo quang tự dưỡng sẽ được giữ trên 3 ống nghiệm. Các ống nghiệm được dán nhãn ghi rõ tên và ngày cấy chuyển. Sau đó, chúng sẽ được nuôi trong điều kiện ánh sáng yếu (300 lux) và nhiệt độ thấp (20 - 240C), 2 - 3 ngày sau khi cấy chuyển cần phải theo dõi và kiểm tra mẫu. Lập sổ theo dõi sau khi cấy chuyển và ghi chép lại tình trạng phát triển của mẫu tảo, thời gian cấy chuyển, số lượng mẫu… Tất cả chủng giống phải được giữ ở cả 3 đợt cấy chuyển liên tiếp (3 thế hệ) để tránh mất giống.
Thí nghiệm 1. Bố trí thí nghiệm chọn thời gian lưu giữ phù hợp thể hiện qua Hình 2.4
Hình 2. 5. Sơ đố bố trí thí nghiệm xác định thời gian lưu giữ thích hợp.
Điều kiện lưu giữ: Hai loài vi tảo được giữ trong ống nghiệm ở độ mặn 25‰, môi trưởng f/2, cường độ ánh sáng 300 lux ở môi trường lỏng, nhiệt độ 23 - 240C.
4 tuần
Tảo giống Isochrysis galbana và Thalassiosira sp.
2 tuần 6 tuần
- Nhân sinh khối.
- Kiểm tra và đánh giá tốc độ sinh trưởng Lưu giữ với thời gian khác nhau