Khảo sát ảnh hưởng của nồng độ alginat

Một phần của tài liệu Nghiên cứu tạo hạt nhân tạo cây hoa Kiết tường, sử dụng Alginate chiếu xạ (Trang 47)

(0,1%) lên khả năng tạo hạt nhân tạo từ chồi cây Kiết Tường.

Thí nghiệm này được tiến hành trên 3 nghiệm thức. Mỗi nghiệm thức gồm 3 chai

thủy tinh với số mẫu cấy là 12mẫu/chai. Thí nghiệm này được lặp lại ba lần.

Chuẩn bị:

 100ml: dung dịch CaCl2 có nồng độ 50mM kết hợp dung dịch chitosan (1000 kGy) 0,1% trong bình tam giác 250ml (KC1).

 100ml: dung dịch CaCl2 50mM kết hợp dung dịch chitosan (100 kGy)

0,1% trong bình tam giác 250ml (KC2).

 20ml: môi trường tái sinh cây kết hợp dung dịch alginate 4%.

Các bình tam giác này sẽ được hấp khử trùng autoclave ở nhiệt độ 1210C, 1atm,

trong 15 phút, sau đó đem vào box cấy để thực hiện tạo hạt nhân tạo.

Mẫu dùng để tạo hạt nhân tạo là mẫu chồi từ lá cây Kiết Tường (sau 30 ngày nuôi cấy). Kích thước chồi từ 3-5mm. Các mẫu này cho vào bình tam giác chứa 10ml: môi

trường tái sinh cây kết hợp dung dịch alginate 4%. Dùng pipet hút từ 3-5ml dung dịch

này (có chứa mẫu chồi) nhỏ từ từ vào dung dịch (KC1) trên máy lắc từ khoảng 40 phút.

Các hạt nhân tạo được tạo thành sẽ được vớt ra và rửa sạch bằng nước cất vô trùng.

Sau đó các hạt này được cấy chuyển vào môi trường tái sinh cây. Làm tương tự với dung dịch (KC2).

Số liệu được ghi nhận sau 4 tuần nuôi cấy gồm các chỉ tiêu:

 Sinh khối tươi (g/cây): được xác định bằng cách cân lần lượt từng cây

một bằng cân phân tích có độ chính xác là 10-5g.

 Chiều cao cây (cm): được đo trực tiếp bằng thước có độ chính xác 1mm.

 Chiều dài rễ (cm): được đo trực tiếp bằng thước có độ chính xác 1mm.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu tạo hạt nhân tạo cây hoa Kiết tường, sử dụng Alginate chiếu xạ (Trang 47)