(300kGy) lên khả năng tạo hạt nhân tạo từ chồi Kiết Tường
Thí nghiệm này được tiến hành trên 3 nghiệm thức. Mỗi nghiệm thức gồm 3 chai
Chuẩn bị:
100ml dung dịch CaCl2 có nồngđộ 50mM trong bình tam giác 250ml.
20ml dung dịch: môi trường tái sinh cây Kiết Tường kết hợp dung dịch
alginate 4% và dung dịch alginate chiếu xạ 0,1% trong bình tam giác 100ml (KA1).
20ml dung dịch: môi trường tái sinh cây Kiết Tường kết hợp dung dịch
alginate 4% và dung dịch alginate chiếu xạ 0,2% trong bình tam giác 100ml (KA2).
20ml dung dịch: môi trường tái sinh cây Kiết Tường kết hợp dung dịch
alginate 4% và dung dịch alginate chiếu xạ 0,3% trong bình tam giác 100ml (KA3).
20ml dung dịch: môi trường tái sinh cây Kiết Tường kết hợp dung dịch
alginate 4% và dung dịch alginate chiếu xạ 0,4% trong bình tam giác 100ml (KA4).
Các bình tam giác này sẽ được hấp khử trùng autoclave ở nhiệt độ 1210C, 1atm,
trong 15 phút, sau đó đem vào box cấy để thực hiện tạo hạt nhân tạo.
Mẫu dùng để tạo hạt nhân tạo là mẫu chồi từ lá cây Kiết Tường (sau 30 ngày nuôi cấy). Kích thước chồi từ 3-5mm. Các mẫu này cho vào các bình tam giác chứa 10ml
dung dịch (KA1), (KA2), (KA3) và (KA4). Dùng pipet hút từ 3-5ml dung dịch (KA1)
(có chứa mẫu chồi) nhỏ từ từ vào dung dịch CaCl2 50mM trên máy lắc từ khoảng 40
phút. Các hạt nhân tạo được tạo thành sẽ được vớt ra và rửa sạch bằng nước cất vô trùng. Sau đó các hạt này được cấy chuyển vào môi trường tái sinh cây.
Làm tương tự với các dung dịch (KA2), (KA3) và (KA4). Số liệu ghi nhận sau 4 tuần nuôi cấy gồm các chỉ tiêu:
Sinh khối tươi (g/1cây): được xác định bằng cách cân lần lượt từng cây
một bằng cân phân tích có độ chính xác là 10-5g.
Chiều cao cây (cm): được đo trực tiếp bằng thước có độ chính xác 1mm.