phân lập ựược bằng phản ứng ngưng kết nhanh trên phiến kắnh.
Vi khuẩn E.coli có nhiều serotyp O khác nhau, do vậy bước quan trọng ựầu tiên là xác ựịnh ựược nhóm serotyp O, sau ựó tiến hành các phản ứng kết ngang kết với huyết thanh ựơn giá trong nhóm cần xác ựịnh. Những nguyên liệu cơ bản cho việc xác ựịnh serotype gồm:
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 41 + Các chủng E. coli cần ựịnh typ ựược nuôi trên môi trường thạch máu. + Các kháng nguyên huyết thanh O chuẩn (ựa giá và ựơn giá).
* Phương pháp tiến hành phản ứng ngưng kết nhanh trên phiến kắnh như sau:
Nhỏ lên 2 ựầu lam kắnh sạch, mỗi ựầu 1 giọt nước muối sinh lý, dùng que cấy vô trùng lấy khuẩn lạc E.coli cần xác ựịnh trên môi trường thạch máu trộn ựều với 2 giọt nước muối sinh lý thành huyễn dịch vi khuẩn. Nhỏ một giọt kháng huyết thanh chuẩn vào một bên huyến dịch và một giọt nước muối sinh lý vào bên huyễn dịch còn lại (ựối chứng).
+ Phản ứng dương tắnh khi hình thành ngưng kết giữa kháng nguyên là vi khuẩn với huyết thanh, tạo thành những hạt nhỏ trắng lấm tấm, huyễn dịch tách ra làm 2 phần là các hạt ngưng kết và phần nước lỏng. Với phản ứng ngưng kết xảy ra nhanh, rõ rệt thì ựược ựánh giá mức ++++. Tùy theo khả năng ngưng kết nối ựể có thể ựánh giá mức ngưng kết ở các mức ựộ khác nhau +,++,+++.
+ Phản ứng là âm tắnh khi hỗn dịch vi khuẩn với kháng nguyên thanh ựục ựều như bên ựối chứng.
* Với những chủng có ngưng kết với kháng huyết thanh nhóm, tiếp tục thực hiện như vậy với các kháng huyết thanh ựơn giá thuộc nhóm ựể xác ựịnh rõ từng serotype. Trong trường hợp các chủng có hiện tượng ngưng kết chéo với nhiều nhóm hoặc ngưng kết với nhiều ựơn giá khác nhau, thì phải pha loãng kháng huyết thanh theo cấp số 2, kết quả sẽ lấy ngưng kết ở cấp số pha loãng cao nhất.