- Máy khuấy từ gia nhiệt Van điều chỉnh
5.2.2Hiệu suất phân tách
T tr ng ngoài
5.2.2Hiệu suất phân tách
Đối với các phương pháp phân tách bằng ái lực truyền thống tương tác giữa kháng nguyên và kháng thể là tương tác không hóa trị, do đó các liên kết này tuy có độ đặc hiệu cao nhưng năng lượng (ái lực) không cao lắm. Hiệu suất thu hồi protein bằng phương pháp ái lực thường chỉ ở khoảng 50%. Ở đây qua đánh giá mức độ thu hồi chúng tôi đạt được mức độ thu hồi 60%. Điều này thể hiện lợi thế của việc tăng bề mặt tiếp xúc giữa hạt sắt từ và môi trường dung dịch.
Nói chung, hàm lượng hạt không bị phân tách bởi từ trường thường có hàm lượng rất nhỏ (< 5%) nên việc đánh giá trực quan bằng mắt thường không thể xác định chính xác hàm lượng này. Trong nghiên cứu này, việc đánh giá hiệu suất được thực hiện nhờ phép đo từ trường sử dụng hệ thống đo đạc đã chế tạo. Hiệu suất phân tách hạt nano từ trong hệ thống nam châm từ ra khỏi dung môi, hay còn gọi là hiệu suất thu hồi từ, được xác định thông qua phép đo từ của mẫu trước và sau khi phân tách và được đánh giá qua công thức: % 100 0 0 − × = H H H HSTH s MNP ,
trong đó HSTHMNP là hiệu suất thu hồi các hạt nano từ có gắn các PTSH cần quan tâm bằng từ trường, H0 là từ trường tổng cộng ban đầu, Hs là từ trường của các hạt không bị phân tách ra khỏi dung môi. Do trong quy trình gắn kết các PTSH (các kháng nguyên) cần quan tâm với cặp hạt nano-kháng thể bậc hai có tồn tại một xác suất không thành công, tức tồn tại một hiệu suất gắn kết có giá trị nhỏ hơn 100%. Vì vậy, hiệu suất phân tách các PTSH cần quan tâm sẽ được tính theo công thức:
165
trong đó, HSGK là hiệu suất gắn kết giữa cặp hạt nano-kháng thể bậc hai và PTSH cần quan tâm.
Để đánh giá bằng thực nghiệm hiệu suất phân tách, các giá trị H0, Hs
được xác định thông qua đo đạc từ trường của các hạt nano từ có mặt trong dung dịch tương ứng, sử dụng bộ cảm biến đã chế tạo. Giá trị hiệu suất gắn kết HSGK được xác định thông qua phương pháp hóa sinh. Kết quả thu được của hiệu suất thu hồi hạt từ đạt > 95% và hiệu suất phân tách các PTSH (trong trường hợp thí nghiệm thực tế là các protein) đạt > 89%. Điều này hạn chế việc mất mẫu do các thao tác rửa và thu hồi pha rắn như thường xảy ra ở các phương pháp khác.
166