- Tiến hành pha Skoog I, II và III của mơi trường MS Pha stock vitamin Morel, glycin và inosytol
PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG COD, BOD
1. PHƯƠNG PHÁP KALI PEMANGANAT (KMnO4)
1.1. Nguyên tắc thí nghiệm
- Dựa vào khả năng oxi hố mạnh của KMnO4 trong mơi trường axit. - Dựa vào lượng KMnO4 cho vào mẫu nước thử ban đầu và lượng KMnO4 cịn lại sau phản ứng ta cĩ thể xác định được lượng chất hữu cơ cĩ trong mẫu nước thử.
Cơ chế phản ứng.
- Trong mơi trường axit MnO4- tham gia phản ứng oxi hố các hợp chất hữu cơ
MnO4- + 5e + 8H+ = Mn2+ + 4H2O
- Lượng MnO4- cịn dư sau phản ứng được xác định bằng dung dịch (COOH)2
2MnO4- + 5 (C2O4)2 + 16H+ = 2Mn2+ + 10CO2 + 8H2O
1.2. Dụng cụ, hố chất cần chuẩn bị
* Dụng cụ : Bếp điện, bình tam giá 250ml, nhiệt kế 1000C, buret 25ml, pipet các loại.
* Hố chất : KMnO4 0,01N
(COOH)2 0,01N
H2SO4 1 : 2
1.3. Các bước tiến hành thí nghiệm
Cho vào bình tam giác dung tích 250ml (đã rửa sạch và sấy khơ) 50ml mẫu nước cần thử (nếu mẫu nước thử cĩ nồng độ chất hữu cơ lớn hơn 100 mg/l thì phải pha lỗng); thêm vào 5ml H2SO4 1 : 2, thêm đúng 10ml dung dịch KMnO4 0,01N (mẫu nước cĩ màu hồng). Sau đĩ đun sơi 10 phút trên bếp
điện, nhấc xuống chờ cho nhiệt độ hạ xuống 80-90 0C rồi thêm vào 10ml dung dịch (COOH)2 0,01N lắc đều cho mẫu nước mất màu (khơng màu) rồi dùng dung dịch KMnO4 0,01N để chuẩn độ cho đến khi mẫu nước chuyển từ
khơng màu sang màu hồng nhạt thì kết thúc chuẩn độ. Ghi kết quả lượng KMnO4đã tiêu tốn: V1.
72
Thay mẫu nước thử bằng 50ml nước cất để thí nghiệm một mẫu trắng. Các bước tiến hành thí nghiệm được thực hiện tương tự như trên: lượng KMnO4 0,01N tiêu tốn là V2.
Chú ý: Tiến hành chuẩn độở nhiệt độ 80 - 900C.
1.4. Tính tốn kết quả:
Hàm lượng COD (lượng oxi cần thiết để oxi hố chất hữu cơ) cĩ trong mẫu nước được tính theo cơng thức sau:
1000 . V 8 . N . ) V V ( ] X [ = 1− 2 (mg/l) Trong đĩ:
+ V1: Lượng dung dịch KMnO4 0,01N tiêu tốn để chuẩn mẫu nước thử (ml) + V2: Lượng dung dịch KMnO4 0,01N tiêu tốn để chuẩn mẫu nước cất (ml)
+ N: Nồng độ đương lượng của dung dịch KMnO4
+ V: Thể tích mẫu nước đem thử (ml) + 8 : Đương lượng gam của oxi (g)
2. PHƯƠNG PHÁP KALI BICROMAT (K2Cr2O7)
2.1. Nguyên tắc thí nghiệm
Cho các chất hữu cơ trong mẫu nước thử tác dụng với hỗn hợp axit cromic và axit sunfuaric lúc đun sơi với chất xúc tác là Ag+. Đun mẫu nước thử với thuốc thử trong ống sinh hàn hồi lưu và chuẩn độ lượng bicromat dư
sau phản ứng với dung dịch sắt-amoni sunfat NH4Fe (SO4). Cơ chế phản ứng:
- Trong mơi trường axit Cr2O72- tham gia phản ứng oxi hố các hợp chất hữu cơ:
Cr2O72- + 6e + 14H+ = 2Cr3+ + 7H2O
- Lượng Cr2O72- cịn dư sau phản ứng sẽ được xác định bằng dung dịch sắt - amoni sunfat
Cr2O72- + 6Fe2+ + 14H+ = Cr3+ + 6Fe3+ + 7H2O
2.2. Dụng cụ, hố chất cần chuẩn bị
* Dụng cụ : Bếp điện, ống sinh hàn hồi lưu, bình cầu hai cổ 250 ml, bình tam giác 500 ml, ống chuẩn độ 25 ml và ống hút các loại.
73
+ Dung dịch Kali bicromat 0,25N: Sấy K2Cr2O7 ở nhiệt độ 1050C trong hai giờ. Cân chính xác 12,259 g và hồ tan trong một ít nước cất sau đĩ định mức thành 1000 ml.
+ Dung dịch Sắt - amoni sunfat 0,25 N: Cân chính xác 98 g sắt- amoni và hồ tan vào trong 20 ml H2SO4 đậm đặc sau đĩ định mức thành 1000 ml
+ Chất chỉ thị Feroin
+ Axit sunfuaric đậm đặc (d = 1,84) + Bạc sunfat tinh thể
+ Thuỷ ngân (II) tinh thể.
2.3. Cách tiến hành thí nghiệm
Lấy 50ml mẫu nước cần thử cho vào bình cầu 3 cổ dung tích 250 ml, thêm 20 ml dung dịch kali dicromat 0,25 N (khi lượng chất hữu cơ quá lớn phải giảm bớt thể tích mẫu nước thử); thơng qua cổ bình cầu thêm từ từ từng lượng nhỏ 30 ml H2SO4 đậm đặc; thêm vào 1 g Ag2SO4, cuối cùng cho vài viên đá bọt rồi lắp ống sinh hàn hồi lưu, đun sơi nhẹ và giữ sơi trong hai giờ. Làm nguội bình, tháo ống sinh hàn và dùng 25ml nước cất rửa thành ống sinh hàn, chuyển dung dịch vào bình tam giác dung tích 500 ml và tráng bình cầu vài ba lần bằng nước cất. Sau đĩ thêm nước cất vừa đủ 250 ml, thêm 3- 4 giọt chất chỉ thị màu feroin và dùng dung dịch sắt-amoni sunfat 0,25 N chuẩn lượng kali dicromat dư. Việc chuẩn độ kết thúc khi dung dịch chuyển từ màu xanh mực sang đỏ nâu.
Tiến hành một thí nghiệm trắng với 50 ml nước cất và tiến hành tương tự. Nếu trong mẫu nước thử cĩ hàm lượng Cl cao thì cho thêm vào 1 g Hg+2.
2.4. Tính tốn kết quả:
Hàm lượng COD (lượng oxi cần thiết để oxi hố chất hữu cơ) cĩ trong mẫu nước được tính theo cơng thức sau:
1000 . V 8 . N . ) b a ( ] X [ = − (mg/l) Trong đĩ:
+ a: Thể tích dung dịch sắt-amoni sunfat tiêu tốn dùng để chuẩn mẫu trắng (ml) + b: Thể tích dung dịch sắt-amoni sunfat tiêu tốn dùng để chuẩn mẫu thử (ml) + N: Nồng độđương lượng của dung dịch sắt-amoni sunfat
+ V: Thể tích mẫu nước đem thử (ml) + 8 : Đương lượng gam của oxi (g)