0
Tải bản đầy đủ (.pdf) (99 trang)

Lựa chọn hệ thống tế bào biểu hiê ̣n

Một phần của tài liệu TÁCH DÒNG VÀ BIỂU HIỆN CECROPIN TRONG CÁC HỆ VECTOR KHÁC NHAU114652 (Trang 30 -30 )

www.promega.com/resources/produc...ression/ www.invitrogen.com/site/us/en/ho...ems.html

www.globeimmune.com/technology/ www.blueskybiotech.com/BioServic...ion.aspx Nấm men Côn trùng www.invitrogen.com/site/us/en/ho...ems.html www.invitrogen.com/site/us/en/ho...ems.html Virus Động vật có vú Hình 7. Các hệ thống biểu hiện protein tái tổ hợp.

Muốn biểu hiện được bất kỳ một protein nào thì trước hết phải lựa chọn được hệ thống biểu hiện tức là nơi sản xuất protein tái tổ hợp. Việc này phụ thuộc rất nhiều vào loại protein, mục đích sử dụng protein cũng như điều kiện của từng phòng thí nghiệm. Hình 7 minh họa các hệ thống biểu hiện đang được dùng trong biểu hiện protein tái tổ hợp hiện nay. Trong đó, hệ thống vi khuẩn được sử dụng rộng rãi nhất để biểu hiện protein cũng như AMPs trong đó có cecropin. Các "nhà máy" vi khuẩn thường được lựa chọn do chi phí thấp, sinh khối lớn và tốc độ sản xuất nhanh [16, 32]. Một số vi khuẩn hay được sử dụng trong biểu hiện protein tái tổ hợp như E. coli, Caulobacter, Staphylococcus, Streptomyces, Bacillus [76]. Những điểm nổi

bật của các vật chủ này là: hoạt tính protease thấp, các plasmid tương đối bền, khả năng sinh trưởng trên nhiều loại cơ chất khác nhau và hiệu suất biểu hiện cao. Trong số các hệ thống biểu hiện vi khuẩn thì E. coli được sử dụng phổ biến nhất để sản xuất các protein tái tổ hợp [16, 36]. Nhiều năm qua, nỗ lực tối ưu hóa E. coli thành bộ máy biểu hiện protein của các sinh vật bậc cao đã tạo ra nhiều chủng E. coli thương mại phục vụ cho mục đích sản xuất protein tái tổ hợp khác nhau. Chiến lược này đã tạo ra hàng loạt các “nhà máy” biểu hiện từ

E. coli như: BL21, BL21 (DE3), BL21 (DE3)-pLysS, BL21 Star-pLysS, BL21-SI, Tuner, Tuner pLysS, Rosetta, Rosetta pLysS, … Trong số này, E. coli BL21 (DE3) là một chủng biểu hiện protein hiệu quả và phổ biến. Chủng này có ưu điểm thiếu hụt hai protease lon và ompT, tương thích với hệ thống promoter T7 lacO (là một promoter mạnh được sử dụng ở nhiều hệ thống vector biểu hiện). Rất nhiều nghiên cứu AMPs nói chung và cecropin nói riêng đều cho thấy khả năng biểu hiện protein tái tổ hợp của E. coli BL21 (DE3) là rất cao [36, 53, 65].

Một phần của tài liệu TÁCH DÒNG VÀ BIỂU HIỆN CECROPIN TRONG CÁC HỆ VECTOR KHÁC NHAU114652 (Trang 30 -30 )

×