Cây nguồn mang bệnh lùn sọc ựen phương Nam thu thập trên ựồng ruộng ựược ựưa về nhà lưới Trung tâm Kiểm dịch thực vật sau nhập khẩu I, trồng trong chậu có chụp lồng mika ựể ựảm bảo sự cách ly.
Cây thắ nghiệm sạch bệnh ựược gieo trồng và chăm sóc trong chậu với số lượng 1 cây/chậu, có chụp lồng mika cách ly côn trùng ựể ựảm bảo cây hoàn toàn sạch bệnh trước khi tiến hành lây bệnh nhân tạo.
Rầy lưng trắng sạch bệnh ựược lấy từ bộ môn Côn trùng Ờ Viện Bảo vệ thực vật.
2.3.2.1. Xác ựịnh giai ựoạn mẫn cảm của cây lúa với virus lùn sọc ựen phương Nam
Thắ nghiệm ựược tiến hành trên cây lúa ở 3 giai ựoạn: mạ, ựẻ nhánh và ựứng cái Ờ làm ựòng.
Phương pháp lây bệnh: rầy lưng trắng tuổi 3 - 4 sạch bệnh ựược thả vào chậu cây lúa nhiễm bệnh, ựể rầy chắch hút 10 ngày, sau ựó chuyển sang cây lúa khỏe ở các giai ựoạn sinh trưởng khác nhau ựể lây bệnh với tỷ lệ 5 cá thể/cây lúa, cho chúng truyền virus trong 2 ngày sau ựó diệt trừ bằng thuốc Actara 0,1%. Cây sau khi lây bệnh ựược giữ trong lồng mica ựến khi biểu hiện triệu chứng.
Mỗi giai ựoạn tiến hành lây nhiễm trên 30 cây, nhắc lại 3 lần. đối chứng tiến hành thả rầy lưng trắng sạch bệnh.
* Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%). - Thời kỳ tiềm dục (ngày)
2.3.2.2. Xác ựịnh khả năng lan truyền virus lùn sọc ựen phương Nam từ lúa sang ngô, cỏ dại
Thắ nghiệm ựược tiến hành trên ngô giai ựoạn 3 Ờ 4 lá, và các loài cỏ ở giai ựoạn 4 - 6 lá.
Phương pháp lây bệnh: rầy lưng trắng tuổi 3 - 4 sạch bệnh ựược thả vào chậu cây lúa nhiễm bệnh, ựể rầy chắch hút 10 ngày, sau ựó chuyển sang cây ngô, cỏ khỏe với số lượng 5 cá thể/cây, cho chúng truyền virus trong 2 ngày sau ựó tiến hành diệt trừ bằng thuốc Actara nồng ựộ 0,1%. Cây sau khi lây bệnh ựược giữ trong lồng mica ựến khi cây biểu hiện triệu chứng. Những cây không biểu hiện triệu chứng sau 60 lây bệnh sẽ tiến hành thu mẫu ựể kiểm tra sự nhiễm virus bằng phương pháp RT-PCR.
Mỗi loại cây ký chủ tiến hành lây nhiễm trên 30 cây, nhắc lại 3 lần. đối chứng tiến hành thả rầy lưng trắng sạch bệnh.
* Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%). - Thời kỳ tiềm dục (ngày).
2.3.2.3. Xác ựịnh khả năng lan truyền virus lùn sọc ựen phương Nam từ ngô, cỏ dại sang lúa
Thắ nghiệm ựược tiến hành trên cây lúa ở giai ựoạn mạ.
Phương pháp lây bệnh: rầy lưng trắng tuổi 3 - 4 sạch bệnh ựược thả vào chậu cây ngô, cỏ nhiễm bệnh, ựể rầy chắch hút 2 ngày, sau ựó chuyển sang cây mạ khỏe với số lượng 5 cá thể/cây, cho chúng truyền virus trong 10 ngày sau ựó tiến hành diệt trừ bằng thuốc Actara nồng ựộ 0,1%. Cây sau khi lây bệnh ựược giữ trong lồng mika ựến khi cây biểu hiện triệu chứng.
Tiến hành lây nhiễm trên 30 cây lúa, nhắc lại 3 lần. đối chứng tiến hành thả rầy lưng trắng sạch bệnh.
* Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%). - Thời kỳ tiềm dục (ngày).
2.3.2.4. Xác ựịnh tắnh kháng nhiễm của một số giống lúa trồng phổ biến ngoài sản xuất ở miền Bắc Việt Nam với bệnh lùn sọc ựen phương Nam
Thắ nghiệm ựược tiến hành trên cây lúa ở giai ựoạn mạ trên 11 giống lúa trồng phổ biến ở miền Bắc Việt Nam là: Khang Dân 18, Hương thơm 1, Bắc Thơm 7, Tám thơm, BC 15, DB5, DB6, CBP 45, Q5, Nếp 87, Nếp 97..
Phương pháp lây bệnh: rầy lưng trắng tuổi 3 - 4 sạch bệnh ựược thả vào chậu cây lúa nhiễm bệnh, ựể rầy chắch hút 10 ngày, sau ựó chuyển sang cây lúa khỏe của các giống lúa khác nhau cùng ở giai ựoạn mạ ựể lây bệnh với tỷ lệ 5 cá thể/cây lúa, cho chúng truyền virus trong 2 ngày sau ựó diệt trừ bằng thuốc Actara 0,1%. Cây sau khi lây bệnh ựược giữ trong lồng mika ựến khi cây biểu hiện triệu chứng.
Mỗi giống lúa tiến hành lây nhiễm trên 10 cây, nhắc lại 3 lần. đối chứng tiến hành thả rầy lưng trắng sạch bệnh.
* Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%). - Thời kỳ tiềm dục (ngày).
2.3.2.5. So sánh hiệu quả truyền bệnh lùn sọc ựen phương Nam giữa trưởng thành và ấu trùng tuổi 2-3 của rầy lưng trắng
Phương pháp lây bệnh: Rầy lưng trắng sạch virus ựược nuôi trên những cây lúa nhiễm bệnh. Ở thế hệ sau của chúng, tiến hành bắt 30 cá thể rầy lưng trắng trưởng thành và 30 cá thể ấu trùng tuổi 2 - 3 nhiễm virus thả vào cây lúa khỏe 7 Ờ 10 ngày tuổi ựể lây bệnh với số lượng 1 con/ cây cho chúng truyền virus ựến khi chết ựối với trưởng thành và ựến khi hóa vũ trưởng thành ựối với ấu trùng tuổi 2 Ờ 3 sau ựó diệt trừ bằng thuốc Actara 0,1%. Cây sau khi lây bệnh ựược giữ trong lồng mika ựến khi cây biểu hiện triệu chứng.
* Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%). - Thời kỳ tiềm dục (ngày).
2.3.2.6. Xác ựịnh khoảng thời gian chắch nạp tối thiểu virus lùn sọc ựen phương Nam của rầy lưng trắng
Tiến hành thắ tại các khoảng thời gian là: 0,5 giờ; 1 giờ; 3 giờ; 6 giờ và 24 giờ.
Trước khi tiến hành thắ nghiệm rầy lưng trắng bị bỏ ựói trong 4 giờ. Phương pháp lây bệnh: Rầy lưng trắng tuổi 3 - 4 sạch bệnh ựược thả vào chậu lúa nhiễm bệnh, cho chúng chắch hút trong 0,5; 1; 3; 6 và 24 giờ. Sau ựó chuyển sang cây lúa khỏe 7 Ờ 10 ngày tuổi ựể lây bệnh với số lượng 1 cá thể/ cây, cho chúng truyền virus trong 10 ngày rồi tiến hành diệt trừ bằng thuốc hóa học Actara nồng ựộ 0,1%. Cây sau khi lây nhiễm ựược cách ly bằng lồng lưới chống côn trùng ựến khi biểu hiện triệu chứng bệnh.
đối chứng tiến hành thả rầy lưng trắng sạch bệnh. * Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%).
- Thời kỳ tiềm dục (ngày).
2.3.2.7. Xác ựịnh khoảng thời gian nhân lên của virus lùn sọc ựen phương Nam trong cơ thể rầy lưng trắng
Tiến hành thắ nghiệm tại các khoảng thời gian là: 1; 3; 5 và 7 ngày.
Phương pháp lây bệnh: Rầy lưng trắng tuổi 3 - 4 sạch bệnh sau khi ựã bỏ ựói 4 giờ ựược thả vào chậu cây lúa nhiễm bệnh, cho chúng chắch hút trong 1 giờ. Sau ựó chuyển sang cây lúa khỏe 7 Ờ 10 ngày tuổi ựể lây bệnh với số lượng 1 cá thể/ cây, cho chúng truyền virus trong 1; 3; 5 và 7 ngày rồi tiến hành diệt trừ bằng thuốc Actara nồng ựộ 0,1%. Cây sau khi lây nhiễm ựược cách ly bằng lồng lưới chống côn trùng ựến khi biểu hiện triệu chứng bệnh.
đối chứng tiến hành thả rầy lưng trắng sạch bệnh. * Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%).
2.3.2.8. Xác ựịnh thời gian chắch truyền virus lùn sọc ựen phương Nam tối thiểu của rầy lưng trắng
Tiến hành thắ nghiệm tại các khoảng thời gian là: 0,5 giờ; 1 giờ; 3 giờ; 6 giờ và 24 giờ.
Công thức lây bệnh ựược tiến hành như sau: Rầy lưng trắng sạch virus tuổi 3 - 4 ựược thả vào chậu cây lúa nhiễm bệnh, cho chúng chắch hút trong 10 ngày. Sau ựó chuyển sang cây lúa khỏe 7 Ờ 10 ngày tuổi ựể lây bệnh với số lượng 1 cá thể/ cây, cho chúng truyền virus trong 0,5; 1; 6 và 24 giờ rồi tiến hành diệt trừ bằng thuốc Actara nồng ựộ 0,1%. Cây lúa sau khi lây nhiễm ựược cách ly bằng lồng lưới chống côn trùng ựến khi biểu hiện triệu chứng bệnh.
Trước khi cho chắch truyền, rầy lưng trắng mang virus ựược bỏ ựói trong 4 giờ.
đối chứng tiến hành thả rầy lưng trắng sạch bệnh. * Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ cây nhiễm bệnh (%).
- Thời kỳ tiềm dục (ngày).
2.3.2.9. Xác ựịnh tỷ lệ rầy lưng trắng mang virus truyền bệnh lùn sọc ựen phương Nam hiệu quả
Tiến hành thắ nghiệm: Thả 30 cá thể rầy lưng trắng sạch virus tuổi 3 Ờ 4 vào chậu cây lúa nhiễm bệnh, cho chúng chắch hút trong 10 ngày. Sau ựó chuyển sang cây lúa khỏe giai ựoạn 7 Ờ 10 ngày ựể lây bệnh với số lượng 1 cá thể/ cây, cho chúng truyền virus trong 2 ngày rồi tiến hành bắt rầy và giám ựịnh số lượng rầy mang virus trong cơ thể bằng phương pháp RT-PCR. %. Cây lúa sau khi lây nhiễm ựược cách ly bằng lồng lưới chống côn trùng ựến khi biểu hiện triệu chứng bệnh.
* Chỉ tiêu theo dõi: - Tỷ lệ rầy lưng trắng mang virus (%).
- Tỷ lệ rầy lưng trắng truyền virus hiệu quả (%).
2.3.2.10. đánh giá hiệu lực của một số loại thuốc hóa học xử lý hạt giống trong phòng trừ rầy lưng trắng trên lúa ở giai ựoạn mạ
Thắ nghiệm gồm 5 công thức ựối với mạ sau gieo 3; 7 và 14 ngày tuổi ngày. Thắ nghiệm ựược nhắc lại 3 lần cho một tuổi mạ. Mỗi công thức nhắc lại 3 khay.
CT 1: Thuốc Cruiser plus 312.5 FS
(0.5ml thuốc + 50 ml nước/ 1 kg hạt giống) CT 2: Thuốc Gaucho 600 FS
(0,4 ml thuốc + 100 ml nước/ 1 kg hạt giống) CT 3: Thuốc Kola 600 FS
(0,5 ml thuốc + 50 ml nước/ 1 kg hạt giống) CT 4: Thuốc Enaldo 40 FS
(0,8ml thuốc + 100 ml nước/ 1 kg hạt giống) CT 5: đối chứng
Phương pháp tiến hành: Ngâm và ủ hạt giống lúa ựến khi hạt nảy mầm, tiến hành pha thuốc theo ựúng liều lượng và nồng ựộ mà nhà sản xuất ựã khuyến cáo. Dùng thuốc ựã pha phun lên hạt giống và ựảo ựều, ựưa hạt giống ựã xử lý vào ủ lại 8 - 12 giờ, sau ựó gieo vào khay và ựặt trong lồng mika chống côn trùng.
Khi mạ ựược 3, 7 và 14 ngày tuổi tiến hành thả rầy lưng trắng tuối 3 - 4 sạch bệnh với số lượng 50 con/ khay.
