Vật liệu nghiên cứu

Một phần của tài liệu Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của virus lùn sọc đen phương nam (southern rice black streaked dwarf virus (Trang 51 - 53)

2.1.3.1. Cây thắ nghiệm nhiễm bệnh

- Cây nhiễm bệnh lùn sọc ựen phương Nam (lúa, ngô, cỏ dại một lá mầm) ựược thu thập tại các tỉnh thuộc miền Bắc Việt Nam.

2.1.3.2. Cây thắ nghiệm sạch bệnh

- Cây lúa, ngô và các cây ký chủ phụ trước khi tiến hành thắ nghiệm LBNT ựược gieo trồng tại khu nhà kắnh của Trung tâm kiểm dịch thực vật sau nhập khẩu I - đông Ngạc - Từ Liêm - Hà Nội.

+ Các giống lúa thắ nghiệm: Q 5, Khang dân 18 (KD18), DB 5, DB 6, CBP 45, BC 15, Hương Thơm 1 (HT 1), Bắc Thơm 7 (BT 7), Tám Thơm (TT), Nếp 87 (N 87) và Nếp 97 (N 97).

+ Giống ngô thắ nghiệm: ngô lai C 919 do công ty Syngenta cung ứng tại Việt Nam.

+ Các loài cỏ thắ nghiệm: cỏ chân vịt, cỏ chỉ lớn, cỏ ựuôi phượng, cỏ lục lông, cỏ lồng vực cạn, cỏ lồng vực nước, cỏ lác dù, cỏ may, vỏ mật và cao lương.

2.1.3.3. Vector truyền bệnh

Rầy lưng trắng (Sogatella furcifera) sạch virus do Bộ côn trùng - Viện Bảo vệ thực vật cung cấp.

2.1.3.4. Dụng cụ, hóa chất và thiết bị nghiên cứu

Dụng cụ phục vụ cho thu mẫu rầy và bố trắ thắ nghiệm gồm: công tơ hút rầy, ống tuýp sạch, lồng chụp mika, chậu vại cấy lúa, ống nghiệm, lồng chụp lướiẦ

* Hóa chất và thiết bị phục vụ cho công tác kiểm tra tác nhân gây bệnh trong phòng thắ nghiệm bằng phương pháp ELISA:

+ đệm rửa, ựệm conjugate, ựệm costing, ựệm chất nền, kháng huyết thanh ựặc hiệu của SRBSDV, viên cơ chất...

+ Máy rửa, máy chuẩn pH, máy ủ nhiệt, máy ựọc kết quả ELISA... * Hóa chất và thiết bị phục vụ cho công tác kiểm tra tác nhân gây bệnh trong phòng thắ nghiệm bằng phương pháp RT-PCR:

+ đệm tách chiết RNA, cặp mồi ựặc hiệu của SRBSDV, ựệm chạy ựiện di, dung dịch LiCl, dung dịch TAE, dung dịch TE...

+ Máy li tâm, máy spin, máy chạy phản ứng PCR, máy ựiện di, máy ựọc trình tự gen...

+ Trình tự cặp mồi là:

RB-S10-F2: 5ỖTCCATAATGGCTGACATAAGAC3Ỗ RB-S10-R2: 5ỖCATTTGAGCAGGAACTTCACG3Ỗ

- Ngoài ra còn một số thiết bị cần thiết trong phòng thắ nghiệm như: tủ lạnh sâu, tủ lạnh, kắnh lúp, máy ựọc, máy ựo PH, ống ựong, bình thuỷ tinh,

phễu lọc, vải lọc, giấy thấm, ựầu côn các loại, ống tube 0,2 ml; 0,5 ml; 1,5 ml, pipet tự ựộng 1 ựầu côn: 10 - 20 ộl, 100 ộl, 200 ộl...

Một phần của tài liệu Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của virus lùn sọc đen phương nam (southern rice black streaked dwarf virus (Trang 51 - 53)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(129 trang)