CHƯƠNG 2: CÁC PHƯƠNG PHÁP SẢN XUẤT COLLAGEN
2.1.3 Qui trình chiết tách Collagen từ da mực [7]
Da mực Rửa sạch Làm khô Loại noncollagenous protein và màu NaOH 0,1M Ly tâm Rửa Trích ly Kết tủa CH3COOH 0,5M Bã Ly tâm NaCl 0,8M Sấy lạnh
ĐAMH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM GVHD: TS. PHAN NGỌC HÒA
Thuyết minh qui trình công nghệ :
Da mực sau khi được rửa sạch được làm khô rồi cho dung dịch NaOH 0,1M vào để tiến hành loại những hợp chất noncollagenous protein và màu. Sau đó tiến hành rửa và trích ly bằng dung dịch acid acetic trong vòng 3 ngày .
Hỗn hợp sau khi trích ly sẽ được tiến hành ly tâm với tốc độ 50000 vòng / phút trong vòng 1h để thu lấy phần dịch, phần dịch chiết thu được là dịch lỏng, hơi sánh gọi là acid-soluble collagen.
Để kết tinh collagen, cho NaCl sẵn vào dịch chiết đến nồng độ 0.8M. Đến đây collagen thô đã được kết tủa. Để thu được collagen sạch, ta tiến hành ly tâm với tốc độ 50000 vòng / phút trong vòng 1h rồi tiến hành sấy lạnh thu được sản phẩm collagen dạng bột. 2.1.4 Quy trình trích ly collagen từ da cá tuyết (Baltic cod) [9]
Thuyết minh qui trình công nghệ
Nguyên liệu là da cá được cắt nhỏ tới đường kính khoảng 3mm bằng máy nghiền, sau đó tiến hành khuấy trộn với dung dịch acid acetic nồng độ 0,1÷ 0,5M với tỉ lệ 1:6 ÷ 1:40 ở nhiệt độ lạnh trong vòng 2h.
Tiến hành đồng nhất hóa dung dịch vừa khuấy trộn ở nhiệt độ trong thời gian 4 phút, tốc độ đồng nhất là 6000 vòng / phút.
Sau đó dung dịch được tiếp tục khuấy trộn trong thời gian 24h ở nhiệt độ rồi được đưa qua máy đồng nhất hóa với thông số kĩ thuật giống như giai đoạn đầu.
Sau khi hỗn hợp đã được đồng nhất với nhau ta tiến hành ly tâm thu lấy phần dịch có chứa collagen, quá trình ly tâm được tiến hành ở nhiệt độ lạnh trong thời gian 20 phút, tốc độ ly tâm đạt 6000 vòng / phút.
Các quá trình được tiến hành ở nhiệt độ lạnh và trong điều kiện vô trùng để tránh da cá bị biến tính ảnh hưởng đến chất lượng collagen.
Những kết quả phân tích collagen trên da cá tuyết
Tác giả đã tính hàm lượng collagen thông qua việc phân tích hàm lượng hydroxyproline và nhân với hệ số chuyển đổi từ hydroxyproline qua collagen là 14,7. Hàm lượng collagen trong da cá tuyết là 21,5% (tính theo trọng lượng ướt), và 71,2% (tính theo trọng lượng khô).
Đối với phương pháp chiết bằng acetic cho thấy hiệu suất chiết phụ thuộc rất
nhiều vào nồng độ acid và tỉ lệ nguyên liệu/dung dịch. Cho nên khi khảo sát quá trình chiết, cần tiến hành ở các nồng độ và tỉ lệ khác nhau để tìm mối liên hệ của chúng ảnh hưởng đến hiệu suất tách chiết.
Đối với phương pháp chiết bằng acid citric, vẫn chiết được collagen nhưng hiệu suất tách chiết không cao hơn acetic. Tuy nhiên tác giả chỉ dừng lại ở việc khảo sát các quá trình tách chiết mà chưa phân tích được những thông số của collagen như các chuỗi cấu trúc của collagen, trọng lượng phân tử, vị trí và thành phần acid amin, nhiệt độ biến tính của collagen,…