Hình 2.3: Sơ đồ bố trí thí nghiệm cảm nhiễm bệnh do vi khuẩn
Bố trí thí nghiệm:
Cá thí nghiệm: Cá tầm cókích thước thương phẩm thu từ các trại nuôi, cá được nuôi thuần dưỡng trở lại. Chọn cá khoẻ đưa vào thí nghiệm.
Điều kiện nuôi: Mật độ: 10 con/ bể 3m3 nước Nhiệt độ: 250C
Sục khí liên tục
Cho ăn bằng thức ăn tổng hợp.
Thí nghiệm gây nhiễm: loài vi khuẩn có tần số xuất hiện cao được bố trí thí nghiệm cảm nhiễm. Bố trí 3 thang nồng độ cảm nhiễm lần lượt là 104, 106, 108 cfu/ml bằng cách tiêm dưới da 0.2ml dịch khuẩn/con cá. Nhóm đối chứng tiêm dưới da nước muối sinh lý tiệt trùng 0.85% 0.2ml /cá.
Chủng vi khuẩn cần nghiên cứu
Nuôi cấy tăng sinh
NaCl 0,85% Xác định mật độ VK Lô TN1 Tiêm 0.2ml dịch khuẩn 104 cfu/ml Lô TN1 Tiêm 0.2ml dịch khuẩn 108 cfu/ml Lô TN1 Tiêm 0.2ml dịch khuẩn 106 cfu/ml Lô đối chứng Tiêm 0.2ml nước muối sinh
Thí nghiệm gồm 3 bể dùng cho 3 mức nồng độ và 1 bể đối chứng. Việc lựa chọn bể cho mỗi nghiệm thức được xác định ngẫu nhiên.
Chăm sóc cá thí nghiệm: Theo dõi tình trạng sức khoẻ cá trong thời gian thí nghiệm, hàng ngày cho ăn, siphon lấy thức ăn thừa và thay 30% nước. Khi xuất hiện cá bị bệnh, ghi chép các dấu hiệu lâm sàng. Cá chết được quan sát, giải phẩu kiểm tra sự thay đổi ở những cơ quan bên ngoài và bên trong, thu mẫu bệnh phẩm để nghiên cứu vi khuẩn.
Xử lý cá bệnh sau thí nghiệm:
Cá bị bệnh ở các lô thí nghiệm được mổ phân tích vi khuẩn.
Phân lập định tính lại: Lấy mẫu bệnh phẩm gan, thận, vết loét cá bệnh phân lập định tính lại bằng test định danh vi khuẩn.