Để xác định hàm lượng đồng huyết thanh của người bình thường và đánh giá sự khác biệt theo lứa tuổi, giới tính, chúng tôi tiến hành lấy mẫu theo các nhóm đối tượng sau:
Nhóm 1: Lứa tuổi dưới 18. Nhóm 2: Lứa tuổi từ 18 đến 30. Nhóm 3: Lứa tuổi từ 31 đến 40. Nhóm 4: Lứa tuổi từ 41 đến 59. Nhóm 5: Lứa tuổi từ 60 đến 74.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
53 Nhóm 6: Lứa tuổi từ 75 trở lên.
Các đối tượng là các thanh thiếu niên, cán bộ đang công tác, đang sống và làm việc tại Hà Nội. Các đối tượng vẫn sinh hoạt và làm việc bình thường, không có bất kỳ biểu hiện của bệnh trong quá trình khám sức khỏe. Các đối tượng được lấy mẫu máu tĩnh mạch vào buổi sáng, lúc đói để định lượng đồng huyết thanh. Tổng số đối tượng là 1000 người trong đó có 646là nam và 354 là nữ.
Lấy mẫu huyết thanh được bảo quản trong tủ lạnh, khi tiến hành phân tích được rã đông tự nhiên, sau đó mẫu được pha loãng với nước cất theo tỷ lệ 1:1. Hàm lượng đồng trong huyết thanh được xác định bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử với kỹ thuật ngọn lửa. Kết quả phân tích được đưa ra ở bảng 3.15;
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
54
Bảng 3.15 : Kết quả phân tích hàm lƣợng đồng trong huyết thanh nhóm đối chứng
Nhóm Lứa tuổi Giới tính Số mẫu Hàm lƣợng đồng (mg/l) X ± SD 1 Dưới 18 Nam 39 0,90±0,17 Nữ 40 0,91±0,13 2 18-30 Nam 200 0,95±0,21 Nữ 88 1,12±0,31 3 31-44 Nam 153 0,99±0,29 Nữ 131 1,27±0,28 4 45-59 Nam 49 1,09±0,35 Nữ 69 1,31±0,32 5 60-74 Nam 35 1,17±0,33 Nữ 16 1,35±0,31 6 Trên 75 Nam 170 1,23±0,35 Nữ 10 1,40±0,34 7 Tổng Nam 646 1,05±0,30 Nữ 354 1,22±0,33
Kết quả khảo sát của hàm lượng đồng huyết thanh cho thấy: giá trị trung bình đối với nam là 1,05mg/l và độ lệch chuẩn 0,30mg/l, đối với nữ là 1,22mg/l và độ lệch chuẩn là 0,33mg/l. Hàm lượng đồng huyết thanh ở nam thấp hơn nữ ở có ý nghĩa thống kê với P < 0,001 và có sự tăng hàm lượng đồng theo tuổi.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
55
Về sự mối liên hệ của đồng huyết thanh theo tuổi, kết quả nghiên cứu cho thấy từ 45 tuổi trở lên đồng huyết thanh tăng có ý nghĩa thống kê so với tất cả các nhóm tuổi khác. Sự tăng của đồng huyết thanh theo tuổi cũng được nhiều tác giả đề cập, các nghiên cứu của DrugueM năm 1984 cho thấy đồng huyết thanh của nhóm người khoẻ mạnh trên 60 tuổi có giá trị trung bình là 1,50mg/l cao hơn so với nhóm tuổi trưởng thành là 1,07mg/l. Nghiên cứu của Jolnson năm 1992 [18], về khả năng hấp thu, chuyển hoá và thời gian bán huỷ sinh học của đồng cũng cho thấy có sự tăng hàm lượng đồng trong huyết thanh cùng với sự tăng của tuổi tác. Lý giải về sự tăng hàm lượng đồng các tác giả cho rằng có sự thay đổi cấu trúc của Ceruloplasmin ở người có tuổi, bình thường Ceruloplasmin là một oxygen oxidoreductase được tổng hợp ở gan có chứa 6 nguyên tử đồng hoá trị II trong cấu trúc bởi liên kết SH, khi nghiên cứu bằng phổ cộng hưởng từ điện tử cho thấy sự tồn tại đồng hoá trị I trong cấu trúc của Ceruloplasmin tăng do vậy số nguyên tử đồng tăng trong cấu trúc của Ceruloplasmin dẫn đến tăng hàm lượng đồng huyết thanh.
Về mối liên hệ giữa đồng huyết thanh và giới tính cho thấy hàm lượng đồng huyết thanh ở nữ cao hơn ở nam có ý nghĩa thống kê. Sự tăng hàm lượng đồng huyết thanh ở nữ cũng được nhiều tác giả đề cập[17,22] nguyên nhân tăng hàm lượng đồng ở nữ được các tác giả cho rằng do hàm lượng estrogen ở nữ cao làm tăng quá trình tổng hợp ceruloplasmin ở gan, dẫn tới tăng hàm lượng đồng huyết thanh.
3.7.1.2. Mẫu nƣớc tiểu
Để xác định hàm lượng đồng trong nước tiểu, chúng tôi lấy mẫu nước tiểu trong 24 giờ của người bình thường và tiến hành đo hàm lượng đồng bằng phương pháp hấp thụ nguyên tử dựa trên đường chuẩn đã được thiết lập.
Kết quả phân tích đồng trong mẫu nước tiểu đối chứng được đưa ra ở bảng 3.16:
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
56
Bảng 3.16: Kết quả phân tích hàm lƣợng đồng trong nƣớc tiểu nhóm đối chứng
Nhóm Lứa tuổi Giới tính Số mẫu Hàm lƣợng đồng (mg/l) X ± SD 1 Dưới 18 Nam 32 <0,026 Nữ 19 <0,026 2 18-30 Nam 50 <0,026 Nữ 45 <0,026 3 31-44 Nam 48 <0,026 Nữ 53 <0,026 4 45-59 Nam 40 <0,026 Nữ 43 <0,026 5 60-74 Nam 20 <0,026 Nữ 15 <0,026 6 Trên 75 Nam 41 <0,026 Nữ 27 <0,026 7 Tổng Nam 231 <0,026 Nữ 202 <0,026
Kết quả trên cho thấy hàm lượng đồng trong nước tiểu của người bình thường nhỏ hơn 0,026mg/l, không có sự khác nhau về giới tính và độ tuổi. Hàm lượng đồng trong nước tiểu ở người bình thường đã được nhiều tác giả nghiên cứu [2,22,16]. Nguyên nhân hàm lượng đồng trong nước tiểu ở người bình thường thấp là do lượng đồng đi vào cơ thể kết hợp với α-2Globulin tạo thành Ceruloplasmin đi vào máu, lượng đồng còn dư nhờ cân bằng nội môi không thải qua nước tiểu mà thải qua mật.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
57
3.7.1.3. Mẫu sinh thiết gan
Trong các chỉ số sinh học để chẩn đoán bệnh Wilson, sinh thiết gan là một chỉ số vàng để chẩn đoán chính xác nguyên nhân gây bệnh[15,16], tuy nhiên việc lấy mẫu sinh thiết gan tại Việt Nam còn rất khó khăn và phức tạp, chủ yếu là do tâm lý của người bệnh. Trong khi đó, trên thế giới, mẫu sinh thiết gan là một trong những chỉ số bắt buộc cần phải phân tích và đánh giá trước khi điều trị bệnh, do mẫu sinh thiết gan thể hiện được tốc độ và hệ số tích lũy của đồng theo thời gian từ đó sẽ đưa ra được phác đồ điều trị chính xác nhất. Trong nghiên cứu này, chúng tôi chỉ sử dụng được một mẫu gan của bệnh nhân ghép gan 9 tuổi, chỉ số phân tích về máu và nước tiểu cũng như các xét nghiệm cận lâm sàng khác cho thấy bệnh nhân không có biểu hiện mắc bệnh Wilson. Mẫu gan được sấy khô sau đó tiến hành vô cơ hóa theo quy trình đã mô tả ở mục 2.3.3. Kết quả phân tích được đưa ra ở bảng 3.17:
Bảng 3.17: Kết quả phân tích hàm lƣợng đồng trong mẫu sinh thiết gan nhóm đối chứng
Tên mẫu Hàm lƣợng đồng
Mẫu sinh thiết gan 21,5µg/g
Kết quả phân tích ở bảng 3.17 cho thấy hàm lượng đồng trong sinh thiết gan nhỏ hơn kết quả nghiên cứu của mẫu bệnh nhân nữ gép gan 12 tuổi mà nhóm tác giả Vũ Đức Lợi đã công bố trước đây [2], hàm lượng đồng trong sinh thiết gan của bệnh nhân này có giá trị là 91,2 µg/g. Các kết quả này cũng phù hợp với nghiên cứu của Kern L. Nuttall của Canada [20] khi nghiên cứu trên 141 sinh thiết gan bao gồm 103 mẫu sinh thiết gan của người trưởng thành và 38 mẫu sinh thiết gan của trẻ em, kết quả cho thấy giá trị trung bình của đồng trong gan là 55 µg/g, giá trị thấp nhất là 7 µg/g và cao nhất là 147 µg/g, tác giả cũng đưa ra đề xuất khi hàm lượng đồng trong mẫu sinh thiết gan vượt quá 200 µg/g thì cần phải xem xét và đánh giá nguy cơ mắc các bệnh liên quan đến gan và bệnh Wilson [15,16,20]. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
58