4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.5.1. đánh giá tắnh kháng bệnh virus PVX, PVY của các con lai và dòng Ộbố
Ộbố mẹỢ nhị bội thông qua kiểm tra gen kháng
Trong phần thắ nghiệm kiểm tra gen kháng virus PVX cho các dòng lai tái sinh, chúng tôi sử dụng cặp mồi GM 339 nhân ựoạn DNA có kắch thước 330bp liên kết rất chặt với gen Nb (Marano và cs, 2002).
Trình tự mồi: PrimerF:GGTAGTTGGACGAGCATAT
PrimerR:CTCACTTTTAGACCAGATTT
Kết quả ựiện di cho thấy: Khi sử dụng mồi GM 339 thì hầu hết các dòng khoai tây nghiên cứu ựều có ựoạn ADN ựược nhân lên với kắch thước 330bp ựúng như kắch thước của ựoạn ADN liên kết chặt với gen Nb là gen kháng virus PVX. Như vậy tất cả các con lai ựều có gen Nb nên có khả năng kháng virus PVX.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 53
Hình 4.10. Kết quả ựiện di sản phẩm PCR sử dụng cặp mồi ựặc hiệu GM339 liên kết chặt với gen Nb Ờ gen kháng virus PVX
Có 3 gen kháng PVY ựược tìm thấy (Muựoz và cs, 1975; Galvez and Brown, 1980; Cockerham 1943, 1970): 1. Ryadg tìm thấy trong Solanum
tuberosum ssp. Andigena; 2. Rychc tìm thấy trong Solanum chacoense; 3. Rysto
tìm thấy trong Solanum hougasii và Solanum stoloniferum. Trong ựó gen Rysto
là một gen cho khả năng kháng rất cao ựối với tất cả các chủng virus PVY ở khoai tâỵ Ye-Su Song và cs (2005) ựã ựịnh vị ựược locus của gen Rysto nằm trên nhiễm sắc thể XII và ựược phát hiện bởi mồi SSR: STM0003. Mồi STM0003 nhân ựoạn ADN có kắch thước 111bp cùng nằm trên nhiễm sắc thể số XII và liên kết rất chặt với gen Rysto
Tương tự kiểm tra gen kháng virus PVY ta có kết quả như hình ảnh dưới ựây:
M B208 B186 131/3 131/10 131/13
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 54
Hình 4.11. Kết quả ựiện di sản phẩm PCR sử dụng cặp mồi ựặc hiệu STM 0003 liên kết chặt với gen Rysto là genkháng virus PVY
Hình ảnh 4.11 cho thấy: Khi sử dụng mồi STM 0003 các dòng khoai tây ựều có ựoạn ADN ựược nhân lên với kắch thước 111bp ựúng như kắch thước của ựoạn ADN liên kết chặt với gen Rysto là gen kháng virus PVỴ
Như vậy cả hai dòng bố mẹ nhị bội và các con lai của chúng ựều có cả tắnh kháng virus PVX, PVY