Phƣơng pháp tách chitin từ vỏ tôm, vỏ cua đƣợc làm theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Thiết và Đỗ Ngọc Tú (2007) [12].
- Chuẩn bị:
Phụ phẩm vỏ tôm, vỏ cua sau khi thu mua sẽ đƣợc rửa sạch và loại bỏ thịt. Sau đó đem đi sấy khô ở 400
C và nghiền nhỏ.
Vỏ dứa đƣợc nghiền nhỏ trong máy xay sinh tố, sau đó chiết lấy dịch proteinase bromelain bằng nƣớc máy từ 2 đến 3 lần theo tỷ lệ khoảng 1,5 ~ 2 lít nƣớc trên 1kg vỏ dứa.
- Phương pháp tiến hành:
Trong dứa có rất nhiều bromelain – enzyme thủy phân protein, đồng thời còn có nhiều axit hữu cơ. Do vậy, dịch ép bã dứa rất thích hợp để loại bỏ cả protein và các chất khoáng trong quá trình thu nhận chitin từ vỏ tôm, vỏ cua.
Quy trình tách chiết chitin đƣợc tiến hành nhƣ sau: 100g vỏ tôm, vỏ cua sẽ đƣợc hòa vào 300ml dịch chiết enzyme (nƣớc ép bã dứa). Thay dịch enzyme 2 lần vào sáng và chiều trong một ngày. Xử lý liên tục bằng dịch chiết enzyme trong khoảng 1 tuần. Rửa sạch và thu cặn. Quá trình này sẽ loại bỏ hết lƣợng khoáng trong vỏ tôm, vỏ cua. Thử lại với dung dịch HCl 1,2N nếu không thấy sủi bọt là đƣợc. Sau đó, lƣợng protein trong vỏ tôm, vỏ cua sẽ đƣợc xử lý 2 lần với dung dịch
Nguyễn Ngọc Mai Cao học sinh K4B
NaOH 2% (hoặc 1%) ở 900C trong 45 phút, sau đó rửa sạch bằng nƣớc máy đến pH trung tính. Sản phẩm thu đƣợc là chế phẩm chitin thô còn chứa các chất màu. Các chất màu trong chế phẩm đƣợc tẩy đầu tiên bằng xử lý với dung dịch thuốc tím (KmnO4) 0,1% trong 15 phút, rửa sạch với nƣớc máy. Tiếp đó, xử lý với dung dịch oxalic acid (C2H2O4) 1% ngâm trong 1 đến 2 giờ cho đến khi sản phẩm có màu trắng thì lấy ra, rửa sạch với nƣớc máy. Sau đó đem chế phẩm đi phơi khô tự nhiên hoặc sấy ở 500C, sẽ thu đƣợc chế phẩm chitin sạch.