Giống vi rút A/Anhui/05-H5N1 sau khi ựược xác ựịnh là ựã ựảm bảo các ựiều kiện về tắnh an toàn, vi rút ựược vô hoạt bằng formaldehyde với các tỷ lệ 1%, 10/00 và 10/000, thời gian tiếp xúc 30 phút.
Mục ựắch vô hoạt hoàn toàn ựược vi rút mà không làm thay ựổi hiệu giá HA vi rút.
Mức ựộ vô hoạt của vi rút ựược kiểm tra bằng cách tiêm vào xoang niệu mô của phôi gà 9-10 ngày tuổi với liều 0.1ml/phôi.
Mỗi một nồng ựộ kiểm tra dùng 10 phôi và thắ nghiệm ựược lặp lại 3 lần. Sau thời gian theo dõi 5 ngày, thu họach dich niệu mô và xác ựịnh vi rút bằng phương pháp HA. Mổ khám phôi và quan sát bệnh tắch phôi.
đánh giá mức ựộ vô họat qua hai chỉ tiêu là: + Phôi gà phát triển bình thường hay không
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 42 Kết quả ựược trình bầy ở bảng 4.3
Bảng 4.3: Kết quả xác ựịnh nồng ựộ formaldehyde dùng ựể vô hoạt vi rút A/Anhui/05-H5N1 Nồng ựộ Formaldehy de Giống vi rút Số phôi trứng gà ựược tiêm Tỷ lệ phôi sống
Kết quả kiểm tra nước niệu bằng phản ứng HA 1% A/Anhui/05-H5N1 10 0 (0%) Âm tắnh 10/00 A/Anhui/05-H5N1 10 4 (40%) Âm tắnh 10/000 A/Anhui/05-H5N1 10 10(100%) Âm tắnh Từ bảng 4.3 cho thấy:
Nồng ựộ 1% tỷ lệ số phôi kiểm tra chết 100%, thu dịch niệu mô kiểm tra HA cho kết quả âm tắnh tức là không có vi rút nhân lên. Như vậy ở nồng ựộ này vi rút ựã chết nhưng fomaldehyde ựã gây ựộc và làm chết phôi và ta không sử dụng nồng ựộ này.
Nồng ựộ 10/00 tỷ lệ số phôi kiểm tra chết 60%, kết quả kiểm tra HA âm tắnh, vi rút không nhân lên. Vậy ta cũng không chọn nồng ựộ fomaldehyde này do ựã gây ựộc và giết chết phôi.
Nồng ựộ 10/000 tỷ lệ phôi chết là 0%, kiểm tra HA cho kết quả âm tắnh, chứng tỏ vi rút ựã bị vô hoạt hoàn toàn, và không gây ựộc cho phôi.
Như vậy, sử dụng nồng ựộ fomaldehyde 10/000 ựã hoàn toàn vô hoạt ựược vi rút A/Anhui/05-H5N1, và không làm thay ựổi hiệu giá HA của kháng nguyên cúm.