Vi rút giống gốc rút A/Anhui/05-H5N1 ựã ựược cắt bỏ ựoạn gen có ựộc lực cao nhưng vẫn giữ nguyên ựược tắnh kháng nguyên, do vậy ta kiểm tra lại tắnh an toàn của vi rút trên gà.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 40 để kiểm tra tắnh an toàn của vi rút trên gà chúng tôi ựã sử dụng gà giống Lương Phượng 4 tuần tuổi.
Sau mỗi lần tiêm truyền phôi trứng gà, dịch niệu mô ựược thu hoạch và tiếp tục tiêm lên gà khỏe với liều tiêm 1ml/gà (tiêm vào cơ lườn) ựể kiểm tra mức ựộ an toàn ựối với gà. Tổng số gà ựược sử dụng cho một lần tiêm là 10 con, (3 lần). Gà ựược theo dõi trong vòng 10 ngày tại khu chuồng nuôi an toàn sinh học của Trung tâm Chẩn ựoán Thú y Trung ương.
Hình 4.1. Chuồng nuôi gà trong ựiều kiện an toàn sinh học
Lấy dịch ngoáy ổ nhớp vào thời ựiểm 3 và 10 ngày sau khi tiêm ựể kiểm tra sự bài thải của vi rút bằng phương pháp Real time PCR.
Quy trình tiêm truyền này ựược lập lại 3 lần, với kết quả ựại diện ựược trình bày tại Bảng 4.2.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 41
Bảng 4.2: Kết quả kiểm tra tắnh an toàn của vi rút A/Anhui/05-H5N1 Kiểm tra bài thải vi rút sau khi tiêm (mẫu swab) Giống vi rút Tổng số gà ựược tiêm Triệu chứng lâm sàng 3 ngày 10 ngày A/Anhui/05-H5N1 10 Gà khỏe mạnh (-) (-)
* (-) âm tắnhKết quả sau 3 lần kiểm tra (Bảng 2) cho thấy:
-Tất cả số gà ựược tiêm cho mỗi lần là 10 con (3 lần x 10 30 con).
100% gà không có biểu hiện bệnh lý lâm sàng, gà tiêu thụ thức ăn, nước uống tốt, sống khỏe mạnh và không bài thải vi rút H5N1 (xét nghiệm bằng phương pháp Real time PCR cho kết quả âm tắnh).
Như vậy, giống vi rút A/Anhui/05-H5N1 ựạt yêu cầu an toàn, không còn khả năng gây bệnh cho gà và ựược ựánh giá là không còn ựộc lực (gây bệnh lâm sàng) ựối với gà.