Chỉ dùng các thuốc thử loại phân tích và dùng nước có hàm lượng phospho không đáng kể so với nồng độ phospho nhỏ nhất trong mẫu cần xác định.
Với hàm lượng phosphate thấp, cần dùng nước cất 2 lần và dụng cụ hoàn toàn bằng thủy tinh.
4.1.1. Dung dịch axit sunfuric, c(H2SO4) = 9mol/l
Cho 500ml 5ml nước vào cốc 2l. Thêm cẩn thận, vừa khuấy vừa làm lạnh 500ml 5ml H2SO4=1,84g/ml. Khuấy đều và để nguội.
4.1.2. Dung dịch axit sumfuric, c(H2SO4) = 4,5mol/l
Cho 500ml 5ml nước vào cốc 2l. Thêm cẩn thận, vừa khuấy vừa làm lạnh 500ml 5ml H2SO49 M. Khuấy đều và để nguội.
4.1.3. Dung dịch axit sumfuric, c(H2SO4) = 2mol/l
Cho 500ml 5ml nước vào cốc 1l. Thêm cẩn thận 100ml 2ml H2SO49M. Khuấy đều và để nguội. Pha loãng với nước trong bình định mức đến 500ml 2ml và trộn đều.
4.1.4. Dung dịch NaOH 2M
Hòa tan 80g 1g NaOH dạng hạt trong nước, làm lạnh và pha loãng với nước đến 1 lít.
4.1.5. Dung dịch axit ascorbic C6H8O6
Hòa tan 100,5g C6H8O6 trong 100ml 5ml nước. Dung dịch này ổn định trong 2 tuần nếu giữ trong bình thủy tinh màu nâu và để trong tủ lạnh và có thể sử dụng được lâu nếu dung dịch này vẫn là không màu.
4.1.6. Molipdat trong axit, Dung dịch I
Hòa tan 13g amoni heptamolipdat [(NH4)6MoO.4H2O] trong 100ml 5ml nước. Hòa tan 0,35g 0,05g antimony kali tartrat [K(SbO)C4H4O6. 1/2H2O] trong 100ml 5ml nước.
Cho dung dịch molipdat vào 300ml 5ml dung dịch H2SO49 M, khuấy liên tục. Thêm dung dịch tartrat và trộn đều.
4.1.7. Molipdat trong axit, Dung dịch II
Hoà cẩn thận 230ml 0,5ml dung dịch H2SO49 M trong 70ml 5ml, làm nguội. Hòa tan 13g amoni heptamolipdat [(NH4)6MoO.4H2O] trong 100ml 5ml nước. thêm dung dịch axit và trộn đều. Hòa tan 0,35g 0,05g antimony kali tartrat [K(SbO)C4H4O6. 1/2H2O] trong 100ml 5ml nước. Thêm dung dịch axit- molipdat và trộn đều.
4.1.8. Dung dịch bổ chính độ độ đục – màu
Trộn hai phần thể tích axit sulfuric (4.1.2) và 1 phần thể tích axit ascorbic (4.1.5). Dung dịch này ổn định trong vài tuần nếu giữ trong bình thủy tinh màu nâu và để trong tủ lạnh.
4.1.9. Dung dịch Natri thiosulphat pentahydrat =12,0g/l
Hòa tan 1,2g 0,05g Natri thiosulphat pentahydrat Na2S2O3.5H2O trong 100ml 5ml nước. Thêm 0,05g 0,005g Na2CO3 làm chất bảo quản.
Dung dịch này ổn định trong 4 tuần nếu giữ trong bình thủy tinh màu nâu.
4.1.10. Dung dịch chuẩn gốc octophosphat, =50mg/l
Sấy khô vài gam KH2PO4 tới khối lượng không đổi ở 105oC. Hòa tan 0,2197 0,0002g KH2PO4 trong khoảng 800ml 10ml trong bình định mức 1000ml. Thêm 10ml 0,5ml H2SO44,5 M và thêm nước tới vạch.
Dung dịch này ổn định ít nhất 1 tháng nếu bảo quản trong bình nút thủy tinh kín ở 4oC.
4.1.11. Dung dịch chuẩn octophosphat= 2 mg/l
Dùng pipet lấy 20ml 0,01ml dung dich chuẩn gốc octophosphat cho vào bình định mức 500ml. Thêm nước tới vạch và trộn đều. Chuẩn bị dung dịch trong ngày phân tích.
4.1.12. Axit clohydric, (HCl) = 1,29 g/ml4.1.12. Axit clohydric, c(HCl) = 2,5 mol/l 4.1.12. Axit clohydric, c(HCl) = 2,5 mol/l
Cẩn thận thêm 200ml+10ml axit clohydric (4.1.12) vào 500ml+10ml nước. Khuấy là nguội đến nhiệt độ phòng, làm đầy tới 1000ml bằng nước cất.
4.2. Thiết bị và dụng cụ
4.2.1. máy đo phổ, loại lăng kính, loại chia vạch hoặc loại kính lọc, có có khả năng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
đặt được các cuvet dày từ 10nm đến 50nm.
Máy đo phổ được chọn cần thích hợp để đo độ hấp thụ trong vùng khả kiến và vùng hồng ngoại gần của quang phổ. Bước sóng nhạy nhất 880nm, nếu chấp nhận độ nhạy thấp hơn có thể đo ở 700nm.
4.2.2. Bộ phận gắn thiết bị lọc, để giữ bộ lọc màng với kích thước lỗ 0,45µm.4.2.3. Dụng thủy tinh 4.2.3. Dụng thủy tinh
Trước khi sử dụng, tất cả dụng cụ thủy tinh cần rửa với axit HCl (4.1.13) ở khoảng nhiệt độ từ 40oC đến 50oC và tráng kỹ với nước. Không dùng chất tẩy rửa chứa phosphate.
Dụng cụ thủy tinh chỉ dùng xác định phospho. Sau khi dùng cần rửa sạch như trên, che đậy và giữ cho đến khi dùng.
Đồ dùng thủy tinh ở giai đoạn tạo màu thỉnh thoảng cần tráng với dung dịch natri hydroxit (4.1.4), tiếp theo tráng kỹ với nước (4.1) để loại trừ cặn các phức hất có màu có xu hướng bán thành màng mỏng trên thành đồ thủy tinh.
4.3. Lấy mẫu và chuẩn bị mẫu4.3.1. Lấy mẫu 4.3.1. Lấy mẫu
Lấy mẫu phòng thí nghiệm vào lọ polyetylen, polyvinyl clorua hoặc tốt hơn là bình thủy tinh. Trong trường hợp nồng độ phosphate thấp, nhất thiết phải dùng bình thủy tinh.
Lọc mẫu (4.3.1) trong vòng 4h sau khi lấy mẫu tại nhiệt độ phòng.
Rửa sạch màng lọc có kích thước lỗ 0,45 bằng cách cho 200ml nước ấm từ 30-40oC chảy qua để loại phosphate. Loại bỏ phần nước rửa, lọc mẫu qua màng lọc và đổ bỏ 10ml dịch lọc đầu tiên. Lấy phần dịch lọc còn lại cho vào bình thủy tinh để xác định ngay octophosphat (4.4.4).
Nếu dịch lọc có pH ngoài khoảng 3-10, điều chỉnh bằng dung dịch NaOH 2M hoặc dung dịch H2SO4 2M.
Thời gian lọc không quá 10 phút. Nếu cần thiết dùng bộ lọc có đường kính lớn hơn.
4.4. Cách tiến hành4.4.1. Phần mẫu thử 4.4.1. Phần mẫu thử
Thể tích mẫu thử lớn nhất dùng là 40,0ml. thể tích này phù hợp với nồng độ octophosphat tới P = 0,8mg/l khi dùng cuvet dày 10mm. Thể tích phần mẫu thử nhỏ hơn cần được dùng để tạo thuận lợi khi xác định nồng độ phosphate cao hơn như trình bày ở bảng 1. Tương tự, nồng độ phosphate thấp có thể xác định bằng cách đo độ hấp thụ trong cuvet dày 40mm hoặc 50mm.
Bảng 1: Nồng độ và thể tích mẫu Nồngđộ octophosphat mg/l Thể tích phần mẫu thử ml Chiều dày cuvet mm 0,0 - 0,8 40 10 0,0 - 1,6 20 10 0,0 - 3,2 10 10 0,0 - 6,4 5 10 0,0 - 0,2 40 40 hoặc 50 4.4.2. Thử mẫu trắng
Tiến hành thử mẫu trắng song song với phân tích mẫu, theo đúng quy trình, cùng một lượng thuốc thử nhưng dùng thể tích nước tương ứng thay cho mẫu thử.
4.4.3. Hiệu chuẩn
4.4.3.1. Chuẩn bị dãy dung dịch chuẩn
Dùng pipet lấy tương ứng 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 và 10ml dung dịch chuẩn octophosphat (4.1.11) cho vào bình định mức 50ml. Pha loãng với nước tới khoảng 40ml. Những dung dịch này chứa nồng độ phosphate P = 0,04 mg/l đến P = 0,4 mg/l.
4.4.3.2. Tạo màu
Thêm vào mỗi bình 1ml dung dịch axit ascorbic, tiếp theo là 2ml dung dịch axit molipdat I (4.1.6). Thêm nước tới vạch và lắc kỹ.
Quá trình tiến hành với các khoảng nồng độ như trong bảng 1.
Đo độ hấp thụ của mỗi dung dịch bằng máy đo phổ (4.2.1) sau 10 và 30 phút ở bước song 880nm hoặc 700nm nếu chấp nhận độ nhạy thấp hơn. Dùng nước để đối chứng.
4.4.3.4. Dựng đường chuẩn
Vẽ đồ thị hấp thụ (trục y) và hàm lượng photpho (trục x),mg/l, của dãy dung dịch hiệu chuẩn. tương quan giữa độ hấp thụ (trục y) với hàm lượng phosphor (trục x) là tuyến tính. Xác định độ dốc của đồ thị.
4.4.4. Phép xác định4.4.4.1. Tạo màu 4.4.4.1. Tạo màu
4.4.4.1.1. Qui trình chuẩn
Dùng pipet lấy lượng mẫu thử đã định (4.4.1), vào bình định mức dung tích 50ml và pha loãng tới 40ml 2ml, nếu cần. Tiến hành như mô tả 4.4.3.2.
Nếu mẫu thử chứa asenat thì phải khử bằng thiosulphat trong môi trường axit thành asenit. Việc khử định lượng cho asenat đến nồng độ ít nhất là 2mg As/l, làm như sau.
Dùng pipet chuyển nhiều nhất là 40ml mẫu thử vào bình định mức 50ml. Thêm 0,4ml dung dịch H2SO44,5 M, 1ml dung dịch axit ascorbic và 1ml dung dịch Natri thiosulphat, khuấy và để trong 10 phút. Thêm 2ml Dung dịch II, Thêm nước tới vạch, khuấy đều. Làm tiếp như ở 4.4.3.3. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
4.4.4.1.2. Tiến hành với trường hợp mẫu bị đục
Nếu mẫu thử đục và/hoặc có màu, làm như sau:
Thêm 3ml thuốc thử bổ chính độ đục – màu (4.1.8) vào phần thể tích mẫu thử đã chọn. Pha loãng thành 50ml và đo độ hấp thụ. Giá trị độ hấp thu đo được theo qui định ở 4.4.3.3 phải trừ đi độ hấp thụ của dung dịch này.
4.4.4.2. Đo phổ
Xem mục 4.4.3.3
Nếu mẫu thử chứa chất gây cản asenat đã được xử lý bằng thiosulphat, phải đo trong vòng 10 phút, nếu không mẫu sẽ bị nhạt màu.
4.5. Biểu thị kết quả4.5.1. Tính toán 4.5.1. Tính toán
Nồng độ octophosphat, P, biểu thị bằng miligam trên lít được tính theo công thức:
Trong đó: A là độ hấp thụ của mẫu thử
A0 là độ hấp thụ của dung dịch mẫu trắng f là hàm số độ dốc đồ thị hiệu chuẩn, l/mg Vmax là thể tích mẫu (sau khi pha)
VS là thể tích thực của mẫu thử.
Báo cáo nồng độ phospho như sau, không lấy hơn ba số có nghĩa: - < 0,1 mg/l chính xác đến 0,001 mg/l
- < 10 mg/l chính xác đến 0,01 mg/l - > 10 mg/l chính xác đến 0,1 mg/l.
Dữ liệu về độ chụm nêu ở bảng B.1, thu được từ cuộc phỏng vấn thí nghiệm với 16 phòng thí nghiệm tham gia.
4.6. Báo cáo kết quả
Báo cáo kết quả cần có các thông tin sau: a) Mọi thông tin cần thiết để nhận biết mẫu; b) Viện dẫn tiêu chuẩn này;
c) Viện dẫn phương pháp đã sử dụng, và điều/mục. d) Kết quả thu được
e) Các thao tác không có trong điều này hoặc được coi là tùy ý chọn, cùng với mọi bất thường có thể đã ảnh hưởng đến kết quả.
PHỤ LỤC 2
TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 6179-1:1996
Chất lượng nước – Xác định amoni
Phần 1: phương pháp trắc phổ thao tác bằng tay
Water qualíty – determination of ammonium Part 1: Mannual spectrometric method