Thiomesal là phức hợp có chứa thuỷ ngân được sử dụng để phòng ngừa vi khuẩn và nấm phát triển trên một số loại văcxin đặc biệt là trong quá trình đóng
ống văcxin đa liều. Nó cũng được sử dụng trong quá trình sản xuất để bất hoạt một số tác nhân vi sinh vật và độc tố để duy trì một sản phẩm vô trùng [65]. Thimerosal đã được sử dụng từ những năm 1930 trong sản xuất một số loại văcxin và sinh phẩm y tế khác. Hiện nay có rất nhiều loại văcxin được cấp phép lưu hành mà không chứa thimerosal như DTaP, Cúm, Hib của Sanofi Pasteur, viêm gan A, B của GSK đều đóng lọđơn [67].
Về mặt sản xuất, để tuân thủ theo đúng GMP thì văcxin phải tuân theo những quy định tối thiểu của WHO. Bất cứ một thay đổi nào trong công thức sản xuất văcxin kể cả những thay đổi về hàm lượng thiomesal đều có tác động lên chất lượng, an toàn và hiệu lực của văcxin. Cho dù thimerosal được thay thế bằng một chất bất hoạt khác, hoặc một chất bảo quản khác trong quá trình sản xuất hay trong sản phẩm cuối cùng thì đều đòi hỏi một quá trình cấp phép với hàng loạt những thử nghiệm lâm sàng và tiền lâm sàng để đảm bảo chất lượng và an toàn của văcxin. Đối với văcxin sử dụng công thức đóng ống đa liều thì thimerosal sẽ phòng lây nhiễm tốt hơn những chất bảo quản khác như là 2- phenoxy ethanol [65]. Đối với văcxin VNNB, WHO yêu cầu hàm lượng tối đa của thimerosal là ≤120 µg/ml [64]. Một số văcxin khác như DTP, độc tố uốn ván, bạch hầu, độc tố ho gà, viêm gan B, Hib và cúm thì hàm lượng thimerosal được yêu cầu ở các nồng độ khác nhau theo tiêu chuẩn của WHO.
Về nguyên lý chung thì văcxin nên được sử dụng ở dạng đóng lọ liều đơn là tốt nhất, như vậy giá thành sẽ cao. Hơn nữa đóng lọ liều đơn đòi hỏi kho lạnh bảo quản lớn hơn cũng như tăng nhu cầu vận chuyển. Điều này thực sự khó khả thi cho các nhà sản xuất. Vì vậy sẽ có hiệu quả kinh tế cao hơn khi sử dụng lọ đa liều.Văcxin VNNB sản xuất ở Việt Nam hiện nay đã và đang được sử dụng cho CTTCMR, vì vậy đóng lọ đa liều là rất thuận tiện cho mỗi đợt tiêm chủng. Như vậy Thimerosal vẫn là chất bảo quản lý tưởng cho văcxin VNNB phục vụ cho CTTCMR. Theo TCVN hiện nay có hai phương pháp xác định hàm lượng Thimerosal trong văcxin. Đó là phương pháp hoá lý và phương pháp vi sinh vật [19]. Phương pháp vi sinh vật thực hiện dựa trên sự hình thành vòng ức chế kháng khuẩn được tạo bởi dung dịch Thimerosal chuẩn và Thimerosal có trong
mẫu thử. Đo đường kính các vòng ức chế vi khuẩn mọc của các đậm độ Thimerosal chuẩn, xây dựng đường chuẩn và tính ra hàm lượng Thimerosal có trong văcxin mẫu thử. Phương pháp này có ưu điểm cho kết quả chính xác nếu có mẫu chuẩn chất lượng, hơn nữa Thimerosal chuẩn lại đắt tiền và không có phổ biến mà phải đặt mua rất lâu. Vì vậy chúng tôi lựa chọn phương pháp hoá lý dựa trên cơ sở Thimerosal phản ứng với Dithizon tạo thành hợp chất có độ hấp phụ cực đại ở bước sóng 430 nm. Đo độ hấp phụ của hợp chất tạo thành ở bước sóng này. Sáu loạt văcxin VNNB được kiểm tra hàm lượng Thimerosal theo SOP: HL01-01, 2005, NICVB [23]. Trên hình 3.2 cho thấy biên độ dao động của 6 loạt văcxin rất ít từ 82-85,2 µg/ml so với mẫu chuẩn EJP034A là 76,3 µg/ml. Vậy 6/6 loạt văcxin thử nghiệm đều đạt yêu cầu theo tiêu chuẩn của WHO [64] và Việt Nam [1].