HL05-01, 2007, NICVB)
Môi trường sử dụng cho thử nghiệm kiểm tra vô trùng VX-SP là FTM và TSB. Thể tích mỗi ống môi trường 20ml/ống. Tỷ lệ số ống môi trường FTM và TBS là 3:1. Trong thời gian chưa sử dụng, hai môi trường này được bảo quản ở nhiệt độ 20-25 độ C.
• Tiến hành:
- Đi găng tay vô trùng.
- Mẫu văcxin sau khi lau cồn được đặt vào khay vô trùng và chuyển vào tủ cấy vô trùng.
- Chuyển dụng cụ, môi trường vào tủ cấy vô trùng.
- Thay găng tay vô trùng
- Dùng kẹp để mở nắp các lọ văcxin, dùng pipet Pasteur hút văcxin từ các lọ cấy vào các ống môi trường. Mỗi lọ dùng riêng biệt một pipet Pasteur. - Lượng văcxin cần lấy từ mỗi lọ để cấy vào mỗi loại môi trường và thể
tích cấy vào mỗi ống môi trường được thực hiện theo bảng dưới đây: Thể tích có trong mỗi lọ Số lượng tối thiểu dùng
cho mỗi loại môi trường
Số lượng cấy vào mỗi ống môi trường < 1ml Toàn bộ VX có trong mỗi lọ Toàn bộ VX có trong mỗi lọ Từ 1ml đến 20 ml 1ml 1ml > 20 ml và < 100ml 5ml 1ml - Cách cấy:
+ Đối với FTM: đưa sâu pi-pét tới gần đáy ống môi trường, vừa bơm văcxin vừa di chuyển pi-pét lên bề mặt môi trường.
- Ủ môi trường và theo dõi
Các ống môi trường được ủ ở nhiệt độ thích hợp ít nhất 14 ngày: + FTM: ủ ở nhiệt độ 30-35oC
+ TSB: ủ ở nhiệt độ 20-25oC
- Theo dõi các ống môi trường ở 3 thời điểm để phát hiện xem có sự phát triển của vi khuẩn và nấm trong các ống môi trường hay không:
Lần 1: vào ngày thứ 3 Lần 2: vào ngày thứ 7
Lần 3: vào ngày cuối cùng.
- Đánh giá kết quả: Theo tiêu chuẩn của WHO (WHO-TRS 530, phụ lục 4) Văcxin đạt yêu cầu về vô trùng nếu không có dấu hiệu phát triển của vi khuẩn và nấm trong các ống môi trường cấy văcxin sau ít nhất 14 ngày theo dõi.