tổng hợp enzyme của Bacillusspp
Để tham khảo được các đặc tính của enzyme ứng dụng cần khảo sát các yếu tố nhằm sinh tổng hợp enzyme có hoạt độ cao nhất. Đơn vị hoạt độ cellulase tính theo lượng µg glucose giải phóng trong 1 phút , đơn vị hoạt độ phytase tính theo số nmol phosphor giải phóng trong 1 phút.
Môi trường sinh tổng hợp: CMC 1%, phytate 1%, cao nấm men 1%, KH2SO4 0,2%, chiết xuất thịt 0,5%, glucose 0,5%, CaCl2 0,5%
Bố trí xác định ảnh hưởng của pH đến khả năng sinh tổng hợp enzyme của Bacillus spp
Hình 2.2: Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng của pH môi trường đến khả năng sinh tổng hợp enzyme cellulase và phytase của Bacillus spp
Thuyết minh quy trình: Chuẩn bị môi trường sinh tổng hợp như trên, dùng NaoH 1N và HCl 1N điều chỉnh về các pH 5-6-7-8-9, sau đó đem hỗn hợp đi hấp ở 121oC trong 15 phút rồi lấy ra làm nguội. Mật độ vi khuẩn cho vào 100ml dung dịch môi trường là 106 CFU/g, lắc trong 48 giờ ở nhiệt độ phòng (30oC). Thu dịch enzyme
thô bằng cách ly tâm dịch, thu dịch nổi và bảo quản ở nhiệt độ 0-4oC để kiểm tra hoạt tính enzyme cellulase, phytase.
Bố trí xác định ảnh hưởng của thời gian lắc đến khả năng sinh tổng hợp enzyme của Bacillus spp
Hình 2.3: Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng của thời gian lắc môi trường đến khả năng sinh tổng hợp enzyme cellulase và phytase của Bacillus spp
Thuyết minh quy trình: Chuẩn bị môi trường sinh tổng hợp như trên, dùng
NaoH 1N và HCl 1N điều chỉnh về các pH 7, sau đó đem hỗn hợp đi hấp ở 121oC trong 15 phút rồi lấy ra làm nguội. Mật độ vi khuẩn cho vào 100ml dung dịch môi trường là 106 CFU/ml, lắc trong thời gian 0-96 giờ với bước nhảy 12 giờ ở nhiệt độ
phòng (30oC). Thu dịch enzyme thô bằng cách ly tâm dịch, thu dịch nổi và bảo quản ở nhiệt độ 0-4oC để kiểm tra hoạt tính enzyme cellulase, phytase.
2.2.2.5 Bố trí thí nghiệm xác định một số đặc tính của enzyme cellulase vàphytase thô sinh tổng hợp từ chủng Bacillus spp