pháp đếm khuẩn lạc Phương pháp Định tính MPN Đếm khuẩn lạc Tiến hành thử Pha loãng BGBL , ủ 44oC trong 24 giờ chọn các ống sinh hơi EMB , ủ ở 37 oC trong 24 giờ, khuẩn
lạc E.coli dẹt, có ánh kim
tím, đường kính khoảng
Pha loãng LSB ủ 38oC trong 48 giờ, cấy chuyển những ống (+) sang EC ủ 44,50C trong 24 giờ. EMB ủ ở 37 oC trong 24 giờ,
Pha loãng cấy 1ml mẫu vào đĩa petri + 5ml môi trường TSA, để yên 1-2 giờ thêm 10- 15ml môi trường VRB, ủ 370C trong 24 – 48 giờ
trong 24 giờ , thử các test sinh hóa để xác định có hay
không có E.coli trong mẫu.
ánh kim tím, đường kính khoảng 1mm Thử các test sinh hóa để xác định có phải
là E.coli trong mẫu hay
không.
đỏ đến đổ đậm, có vòng tủa muối mật cấy vào canh EC, ủ 440C, 24-48 giờ chọn ống sinh hơi cấy vào ống canh trypton, MR-VR, thạch Simmon Citrate ủ 440C trong 24 giờ,thử nghiệm IMViC sau đó tính tỷ lệ khẳng định E.coli , tính toán mật độ E.coli. Nhận xét:
- Ba phương pháp trên là ba phương pháp cổ điển thường dùng nhất cho việc xác định E.coli. Nếu nghi ngờ có E.coli sẽ thử phản ứng sinh hóa. Tuy nhiên, thay vì thử phản ứng sinh hóa mất 24 giờ ta sẽ chuyển sang cấy vào môi trường Rapid E.coli.
- Ba phương pháp này có ưu điểm là không tốn nhiều chi phí. Tuy nhiên có một số nhược điểm như kết quả không được chính xác hoàn toàn, tốn nhiều thời gian…
- Trong ba phương pháp trên, phương pháp định tính là tối ưu nhất và được dùng để khẳng định E.coli trong thực phẩm nhiều nhất.
Mọi thao tác trong quá trình thí nghiệm cần thiết phải tiến hành cẩn thận, chính xác.