Hiện nay có nhiều nghiên cứu thu nhận Collagen từ các loại da cá khác nhau. Phương pháp mà những nghiên cứu này sử dụng phổ biến là dùng tác nhân hóa học hoặc kết hợp giữa hóa học với enzyme. Theo đó, da cá được xử lý cơ học (chà, rửa, cắt nhỏ), khử tạp chất phi Collagen (lipid, protein phi Collagen, khoáng và sắc tố), sau đó được chiết bằng acid hữu cơ, kết tủa bằng muối NaCl rồi đem đi sấy khô và thu được Collagen thành phẩm. Những tính chất đặc trưng của Collagen được xác định bằng những thông số chủ yếu sau: độ nhớt, hàm lượng ẩm, nhiệt độ biến tính, khối lượng phân tử, bản đồ peptide, thành phần và số lượng acid amin…
Sơ đồ 1: Sơ đồ tổng quát công nghệ sản xuất Collagen từ da cá Tra.
Xử lý cơ học Xử lý tách tạp chất phi Collagen Chiết, kết tủa Collagen Làm khô Collagen Da cá Tra
Thuyết minh quy trình:
Nguyên liệu: da cá sử dụng cho thí nghiệm phải có màu sắc và mùi tự nhiên. Da cá được bảo quản đông (nhiệt độ bảo quản -200C) trong túi PE (5kg/ block) đến khi sử dụng.
Xử lý nguyên liệu: da cá được rã đông tự nhiên, rồi tiến hành rửa bằng nước sạch và dùng bàn chải chà rửa nhằm tách bớt mỡ còn dính bám trên da, sau đó rửa lại bằng nước sạch rồi cắt nhỏ (kích thước 1x1cm) rồi chia thành các mẫu nhỏ để phục vụ thí nghiệm.
Xử lý tách tạp chất phi Collagen: tách tạp chất phi Collagen (khoáng, lipid, sắc tố, protein phi Collagen và một số tạp chất khác) bằng các tác nhân hóa học như: acid, kiềm, nước. Trong phạm vi nghiên cứu của đề tài, tôi chỉ nghiên cứu chế độ khử tạp chất phi Collagen sử dụng môi trường kiềm và nước ấm.
Chiết, kết tủa Collagen: Chiết và kết tủa nhằm thu nhận dịch Collagen trước khi đi vào các bước tinh sạch tiếp theo. Da cá sau khi đã xử lý loại bỏ các thành phần phi Collagen được chiết và kết tủa nhiều lần bằng acid hữu cơ và muối ăn.
Làm khô, bao gói và bảo quản: Collagen kết tủa được đem đi sấy lạnh hoặc làm đông khô. Collagen thành phẩm được bao gói bằng túi PE hút chân không và bảo quản trong điều kiện lạnh.
CHƯƠNG 2
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU